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《薯類種子種苗生產(chǎn)技術(shù)》試管苗的培養(yǎng)條件目錄CONTENTS二試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)條件一試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件(一)光照
1.光照強度:范圍1000~5000lx(勒克斯),一般3000~4000lx。2.光質(zhì):白光,紅光,不同波長的光3.光照時間:10~16h,12h,16h,光周期,誘導(dǎo)開花4.調(diào)控:日光燈,人工/定時器一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件(二)溫度1.最適溫度恒溫,大多植物,25℃±2℃,﹤15℃或﹥35℃會造成危害。2.溫度處理低溫處理,高溫處理3.調(diào)控空調(diào)器空調(diào)器調(diào)控一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件(三)空氣濕度1.容器內(nèi):幾乎達100%。2.環(huán)境:70%~80%,過低,過高,問題3.調(diào)控:空調(diào)器除濕模式/除濕機/灑水(噴水)一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件(四)PH1.范圍:最適PH5.6~5.8,PH6.0~6.5,大于7,或小于4均不行。2.高溫高壓滅菌會使PH下降0.2~0.8,故調(diào)時高于目標0.5。3.調(diào)節(jié):0.1~1mol/LNaOH/HCl調(diào)節(jié)4.PH影響瓊脂的凝固能力:大于6.0變硬,小于5.0不能很好凝固。一、試管苗培養(yǎng)所需的環(huán)境條件(五)氣體培養(yǎng)容器內(nèi)的氣體成分影響培養(yǎng)物的生長與分化,
氧氣是愈傷組織生長所必須的,固體培養(yǎng)與液體靜置培養(yǎng)時,應(yīng)有部分組織與空氣接觸,因此要考慮培養(yǎng)中的通氣問題。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(一)大量元素1.N是蛋白質(zhì)、酶、葉綠素、維生素、核酸、磷脂、生物堿等的組成成分,在植物生命活動中占有重要的位置。2.P是磷脂的主要成分。常用KH2PO4、NaH2PO4等。3.K對碳水化合物合成,轉(zhuǎn)移,以及氮素代謝等有密切關(guān)系。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(一)大量元素4.Mg、S、Ca是葉綠素的組成成分,又是激酶的活化劑,對核蛋白體結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定作用。5.S是含S氨基酸的蛋白質(zhì)的組成成分。6.Ca是構(gòu)成細胞壁的成分,對細胞分裂,穩(wěn)定質(zhì)膜結(jié)構(gòu)有顯著作用,Ca及鈣調(diào)素在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(二)微量元素在微量元素中,鐵的使用最大:◆一些氧化酶的組成成分◆葉綠素形成的必要條件◆使用乙二胺四乙酸鐵(EDTA-Fe)鰲合物防止鐵的沉淀。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(二)微量元素硼與蛋白質(zhì)合成、糖類運輸有著密切的關(guān)系銅是某些氧化酶的成分,能夠促進離體根的生長錳參與植物的光合、呼吸代謝鉬參與氮素的代謝氯是光合作用水光解的活化劑微量元素的主要作用是作為酶的輔助因子或激活劑參與代謝的調(diào)節(jié)。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(三)碳源碳源物質(zhì)包括糖類物質(zhì)、醇類物質(zhì)和有機酸,以糖類物質(zhì)最重要。糖類物質(zhì)特點:◆具有熱易變的性質(zhì)◆利于吸收和利用◆使用濃度一般在2%~5%◆提供能源和調(diào)節(jié)滲透壓二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(四)維生素類以各種輔酶的形式存在◆參與多種代謝活動◆對生長,分化等有很好的促進作用◆主要分為脂溶性維生素和水溶性維生素◆常用維生素有VB1和VB6二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(五)肌醇環(huán)己六醇◆細胞壁的構(gòu)建材料◆參與碳水化合物、磷脂代謝及離子平衡等生理活動◆促進活性物質(zhì)發(fā)揮作用二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(六)氨基酸蛋白質(zhì)的組成成分◆有機氮源◆可直接被細胞吸收利用◆培養(yǎng)基中常用的是甘氨酸(七)天然復(fù)合物促進某些愈傷組織和器官的生長◆化學(xué)成分不明、復(fù)雜◆天然營養(yǎng)混合物如:水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(八)瓊脂是使用最普遍的凝固劑◆用量一般在6~10g/L之間◆顏色以淺、透明度高好,潔凈為上品。除了瓊脂外,在組織培養(yǎng)中還可以使用瓊脂糖、結(jié)冷膠等。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(九)活性炭吸附培養(yǎng)基及培養(yǎng)物分泌物中的抑制物質(zhì)◆抑制外植體褐變◆防止玻璃苗的產(chǎn)生◆促進培養(yǎng)物生長和分化◆促進生根缺點:沒有選擇性。(十)抗生素防止外植體內(nèi)生菌造成的污染?;钚蕴慷?、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(十一)生長素類促進細胞伸長和分裂◆促進生根、抑制器官脫落、性別控制、延長休眠、頂端優(yōu)勢、單性結(jié)實◆誘導(dǎo)愈傷組織形成◆溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中,后者的溶解效果更好◆常用的生長素:IAA(吲哆乙酸)、NAA(奈乙酸)、IBA(吲哆丁酸)、2,4-D(二氯苯氧乙酸)。二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(十二)細胞分裂素類促進細胞分裂和分化◆誘導(dǎo)胚狀體和不定芽的形成◆延緩組織的衰老并增強蛋白質(zhì)的合成◆用于離體成花的調(diào)控◆溶于0.5~1.0mol/L的鹽酸或稀薄的NaOH中◆常用的細胞分裂素:
KT(激動素)BA(6-卞基腺嘌呤)2-ip(異戊烯氨基嘌呤)玉米素二、試管苗培養(yǎng)所需的營養(yǎng)成分(十三)赤霉素類和脫落酸赤霉素類◆組織培養(yǎng)中不常使用◆加速細胞的伸長生長
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