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種子生產(chǎn)與經(jīng)營專業(yè)教學(xué)資源庫《種子貯藏技術(shù)》頑拗型種子組織培養(yǎng)結(jié)合超低溫保存方法目錄CONTENTS一二三保存過程保存的材料冷凍保護(hù)劑近年來，應(yīng)用液氮保存生物組織已有不少成功例子，保存植物成功的例子也不少，包括原生質(zhì)、細(xì)胞、愈傷組織、器官、胚。下胚軸來源的愈傷組織胚狀體一、保存過程材料(如胚)分離－－消毒－－(防凍劑使用)－－冷凍－－貯藏－－解凍－－恢復(fù)生長(培養(yǎng)基上)。

經(jīng)低溫貯存的橡膠種胚已取得再生植株二、保存的材料用來保存的材料常常是離體胚(excisedembryos)和離體的胚軸(excisedaxis)。這兩者在中文的文獻(xiàn)中常被混為一談，其實(shí)后者不包括子葉。

如前面所述的Chaudhury(1991)從茶籽分離出胚軸（0.1%氯化汞消毒15min）,干燥至13%水分以下，經(jīng)液氮17h貯存，在培養(yǎng)長成5~6cm高的健康幼苗。三、冷凍保護(hù)劑防凍劑或者稱冷凍保護(hù)劑在超低溫保存生物材料中，具有重要的重要。從1949年polge等人用甘油作為精子的冷凍保護(hù)劑以來，保護(hù)劑一直是超低溫保存研究中一個重要的方面?，F(xiàn)在常用的冷凍劑有二甲基亞砜、甘油、脯氨酸、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、聚乙二醇（PEG）等。三、冷凍保護(hù)劑

首例真正頑拗型種離體胚在液氮保存后存活是Normah等（1986）用木菠蘿胚完成的。胚干燥2-5h，水分在14%-20%，液氮內(nèi)保存24h后，20%-69%胚存活，并形成了具有正常根、芽的幼苗。木菠蘿不能干致20%以下的水分，否則顯著降低生活力，采用離體干燥可將水分降致10%，生活里仍在80%以上。用脯氨酸處理后，可干致8

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