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文檔簡介
凝膠內(nèi)沉淀試驗免疫學檢驗技術(shù)—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗?zāi)z內(nèi)沉淀試驗指可溶性抗原、抗體在含有電解質(zhì)的凝膠內(nèi)自由擴散形成濃度梯度,二者在比例合適的位置形成肉眼可見的沉淀線或沉淀環(huán)?!?—
凝膠內(nèi)沉淀試驗常用凝膠瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)試驗類型雙向瓊脂擴散試驗(雙擴);單向瓊脂擴散試驗(單擴)—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗單向瓊脂擴散試驗將定量抗體混勻在瓊脂中,繼而加入待測抗原溶液使其在凝膠內(nèi)局部向周圍自由擴散,抗體與待測的抗原,在兩者比例合適的部位結(jié)合形成白色沉淀環(huán),環(huán)的大?。╠)與抗原的濃度成正相關(guān)(可定量)?!?—
凝膠內(nèi)沉淀試驗單向瓊脂擴散試驗基本過程準備一張潔凈載玻片→配瓊脂(先加熱溶解,然后冷卻至50℃左右時加入已知Ab)→制板→打孔→1、2、3、4孔加已知濃度Ag→下一排孔加待測Ag→37℃,16h→量出各沉淀環(huán)直徑d→d-CAg繪制標準曲線→查得待測Ag含量1234Ab已知CAg待測CAg—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗單向瓊脂擴散試驗形成的沉淀環(huán)及標準曲線動畫:單向瓊脂擴散試驗是怎樣對抗原進行定量的?環(huán)的大?。╠)與抗原的濃度(C)成正相關(guān)(可定量)—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗雙向瓊脂擴散試驗將抗原抗體分別加在瓊脂糖不同的對應(yīng)孔中,兩者在凝膠中自由擴散,在比例合適處形成白色沉淀線(可定性、半定量)?!?—
凝膠內(nèi)沉淀試驗雙向瓊脂擴散試驗基本過程準備一張潔凈載玻片→配瓊脂(先加熱溶解,然后冷卻至50℃)→制板→打孔→1、2、3、4孔加Ag→5、6、7、8孔加Ab→37℃,16h→觀察每對Ag和Ab間沉淀線形成情況18765234AgAb—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗雙向瓊脂擴散試驗的應(yīng)用
1、抗原或抗體的定性分析(有無沉淀線)18765234AgAb動畫:怎樣解讀雙向瓊脂擴散試驗形成的沉淀線?
2、抗原或抗體的相對分子量和相對濃度的分析—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗雙向瓊脂擴散試驗的應(yīng)用
3、分析抗原的性質(zhì)(完全相同“√”;部分相同“√上一點”;完全不同“×”)AbAbAbAg1Ag2Ag1Ag2Ag1Ag2—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗雙向瓊脂擴散試驗的應(yīng)用4、抗體效價測定出現(xiàn)沉淀線最高的抗體稀釋度5、抗原或抗體純度鑒定微課:雙向瓊脂擴散試驗測效價(走迷宮2)—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗1:2561:1281:641:321:161:81:41:2答案:效價大于等于1:256提問右圖中抗體的效價為多少?—*—
凝膠內(nèi)沉淀試驗AgAb?Ag提問將試管中的三角形抗原進行提純后,用雙擴檢查純化
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