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文檔簡介
第3章
微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu)微生物(病毒)古生菌(Archaea)細(xì)菌(Bacteria)真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細(xì)胞藻類、原生動(dòng)物等非細(xì)胞型細(xì)胞型原核微生物真核微生物(Eukarya)又稱真細(xì)菌(eubacteria),包括普通細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、枝原體、立克次氏體和衣原體等古生菌在進(jìn)化譜系上與真細(xì)菌及真核生物相互并列,且與后者關(guān)系更近,而其細(xì)胞構(gòu)造卻與真細(xì)菌較為接近,同屬于原核生物。Eubacteria
(真細(xì)菌)Archaebacteria
(古細(xì)菌)第一節(jié)真細(xì)菌(Eubacteria)一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列(P29)球狀桿狀螺旋狀基本形態(tài)一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列1、球狀1)概念:細(xì)胞個(gè)體呈球形或橢圓形。一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列1、球狀2)排列:不同種的球菌在細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)形成不同的空間排列方式,常被作為分類依據(jù)。A金黃色葡萄球菌3)例子B淋病奈瑟氏球菌C肺炎鏈球菌一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列2、桿狀1)概念:細(xì)胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(xì)(直徑)比較穩(wěn)定,而長度則常因培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列2、桿狀2)排列:桿狀細(xì)菌的排列方式常因生長階段和培養(yǎng)條件而發(fā)生變化,一般不作為分類依據(jù)。一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列2、桿狀
桿狀細(xì)菌的排列方式常因生長階段和培養(yǎng)條件而發(fā)生變化,一般不作為分類依據(jù)。A枯草芽孢桿菌B地衣芽孢桿菌3)例子C銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)D結(jié)核分枝桿菌E炭疽病的病原菌-----------炭疽桿菌F破傷風(fēng)梭菌一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形態(tài)和排列3、螺旋狀弧菌螺旋菌螺旋體菌(參見P347)1)弧菌:菌體只有一個(gè)彎曲,其程度不足一圈,形似“C”字或逗號,鞭毛偏端生。(寄生性弧菌-----蛭弧菌)霍亂弧菌2)螺旋菌:菌體回轉(zhuǎn)如螺旋,螺旋數(shù)目和螺距大小因種而異。鞭毛二端生。細(xì)胞壁堅(jiān)韌,菌體較硬。顯微鏡下的螺旋菌例子:幽門螺旋菌左:顯微數(shù)碼攝像右:結(jié)構(gòu)示意圖3)螺旋體菌:菌體柔軟,用于運(yùn)動(dòng)的類似鞭毛的軸絲位于細(xì)胞外鞘內(nèi)。梅毒密螺旋體一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(一)個(gè)體形狀和排列4、其它形狀1)柄桿菌(prosthecatebacteria)細(xì)胞上有柄(stalk)、菌絲(hyphae)、附器(appendages)等細(xì)胞質(zhì)伸出物,細(xì)胞呈桿狀或梭狀,并有特征性的細(xì)柄。一般生活在淡水中固形物的表面,其異常形態(tài)使得菌體的表面積與體積之比增加,能有效地吸收有限的營養(yǎng)物;(一)個(gè)體形狀和排列2)星形細(xì)菌(star-shapedbacteria)3)方形細(xì)菌(square-ahapedbacteria)(Stella)(Haloarcula)4、其它形狀(一)個(gè)體形狀和排列4、其它形狀4)異常形態(tài)環(huán)境條件的變化:物理、化學(xué)因子的刺激培養(yǎng)時(shí)間過長阻礙細(xì)胞正常發(fā)育細(xì)胞衰老營養(yǎng)缺乏自身代謝產(chǎn)物積累過多異常形態(tài)正常形態(tài)環(huán)境條件恢復(fù)正常(二)大小1、范圍(參見P33,最小和最大的細(xì)菌)最?。号c無細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒相仿(50nm)最大:肉眼可見(0.75mm);(二)大小1、范圍費(fèi)氏刺骨魚菌(0.08mmx0.6mm)(Epulopisciumfishelsoni)比大腸桿菌大100萬倍(1985年發(fā)現(xiàn))最大細(xì)菌德國科學(xué)家H.N.Schulz等1999年在納米比亞海岸的海底沉積物中發(fā)現(xiàn)的一種硫磺細(xì)菌(sulfurbacterium),其大小可達(dá)0.75mm,Thiomargaritanamibiensis,---------“納米比亞硫磺珍珠”最大細(xì)菌(0.75mm)與果蠅頭部大小相當(dāng)(二)大小1、范圍(nanobacteria)(50nm)最大和最小細(xì)菌的個(gè)體大小懸殊:(Thiomargaritanamibiensis)(0.75mm)10億~100億倍一、一般形態(tài)及細(xì)胞結(jié)構(gòu)(二)大小1、范圍(二)大小1、范圍光學(xué)顯微鏡物鏡的特性在對細(xì)菌進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察時(shí),油鏡最常使用,也最為重要。(二)大小1、范圍一般細(xì)菌的大小范圍:0.5~1mm(直徑)0.2~1mm(直徑)
X1~80mm(長度)0.3~1mm(直徑)
X1~50mm(長度)(長度是菌體兩端點(diǎn)之間的距離,而非實(shí)際長度)(二)大小2、測量方法顯微鏡測微尺顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行測算(二)大小2、細(xì)菌大小測量結(jié)果的影響因素個(gè)體差異;干燥、固定后的菌體會(huì)一般由于脫水而比活菌體縮短1/3-1/4;染色方法的影響,一般用負(fù)染色法觀察的菌體較大;幼齡細(xì)菌一般比成熟的或老齡的細(xì)菌大;環(huán)境條件,如培養(yǎng)基中滲透壓的改變也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞大小的變化。(參見P31)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特殊構(gòu)造:部分細(xì)菌具有的或一般細(xì)菌在特殊環(huán)境下才有的構(gòu)造(見P39)一般構(gòu)造:一般細(xì)菌都有的構(gòu)造(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁1)概念:
細(xì)胞壁(cellwall)是位于細(xì)胞表面,內(nèi)側(cè)緊貼細(xì)胞膜的一層較為堅(jiān)韌,略具彈性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁2)證實(shí)細(xì)胞壁存在的方法:(1)細(xì)菌超薄切片的電鏡直接觀察;(2)質(zhì)、壁分離與適當(dāng)?shù)娜旧?,可以在光學(xué)顯微鏡下看到細(xì)胞壁;(3)機(jī)械法破裂細(xì)胞后,分離得到純的細(xì)胞壁;(4)制備原生質(zhì)體,觀察細(xì)胞形態(tài)的變化;(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁3)細(xì)胞壁的功能:(1)固定細(xì)胞外形和提高機(jī)械強(qiáng)度;(2)為細(xì)胞的生長、分裂和鞭毛運(yùn)動(dòng)所必需;(3)滲透屏障,阻攔酶蛋白和某些抗生素等大分子物質(zhì)(分子量大于800)進(jìn)入細(xì)胞,保護(hù)細(xì)胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物質(zhì)的損傷;(4)細(xì)菌特定的抗原性、致病性以及對抗生素和噬菌體的敏感性的物質(zhì)基礎(chǔ);(參見P38)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:(參見P46)簡單染色法
正染色
革蘭氏染色法鑒別染色法抗酸性染色法
芽孢染色法
死菌
姬姆薩染色法
負(fù)染色:莢膜染色法等細(xì)菌染色法
活菌:用美藍(lán)或TTC(氧化三苯基四氮唑)等作活菌染色(參見P26)
(1)革蘭氏染色1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(1)革蘭氏染色C.Gram(革蘭)于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細(xì)菌的染色方法。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(1)革蘭氏染色1、初染:用堿性染料結(jié)晶紫對菌液涂片進(jìn)行初染2、媒染:用碘溶液進(jìn)行媒染,其作用是提高染料和細(xì)胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固。3、脫色:用乙醇或丙酮沖洗進(jìn)行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細(xì)胞內(nèi)的為革蘭氏陽性細(xì)菌,而革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)晶紫被洗掉,細(xì)胞呈無色。4、復(fù)染:用一種與結(jié)晶紫不同顏色堿性染料對涂片進(jìn)行復(fù)染。例如沙黃,它使原來無色的革蘭氏陰性細(xì)菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽性細(xì)菌繼續(xù)保持深紫色1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(1)革蘭氏染色1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(1)革蘭氏染色表3-1革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌細(xì)胞壁成分的比較(P39)(參見P39,圖3-2)1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁特點(diǎn):厚度大(20~80nm)
化學(xué)組分簡單,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁肽聚糖(peptidoglycan)磷壁酸(teichoicacid)又稱粘肽(mucopeptide)、胞壁質(zhì)(murein)或粘質(zhì)復(fù)合物(mucocomplex),是真細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分。結(jié)合在革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁A、肽聚糖厚約20~80nm,由40層左右的網(wǎng)格狀分子交織成的網(wǎng)套覆蓋在整個(gè)細(xì)胞上。雙糖單位原核生物所特有的已糖1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁A、肽聚糖由四個(gè)氨基酸分子按L型與D型交替方式連接而成雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,從而引起細(xì)菌因肽聚糖細(xì)胞壁的“散架”而死亡。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁A、肽聚糖目前所知的肽聚糖已超過100種,在這一“肽聚糖的多樣性”中,主要的變化發(fā)生在肽橋上??缭诫木厶菍硬⑴c細(xì)胞膜相交聯(lián)的膜磷壁酸(又稱脂磷壁酸),由甘油磷酸鏈分子與細(xì)胞膜上的磷脂進(jìn)行共價(jià)結(jié)合后形成。其含量與培養(yǎng)條件關(guān)系不大??捎?5%熱酚水提取,也可用熱水從脫脂的凍干細(xì)菌中提取。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、磷壁酸革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞壁上特有的化學(xué)成分,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。壁磷壁酸,它與肽聚糖分子間進(jìn)行共價(jià)結(jié)合,含量會(huì)隨培養(yǎng)基成分而改變,一般占細(xì)胞壁重量的10%,有時(shí)可接近50%。用稀酸或稀堿可以提取。(參見P41)二價(jià)陽離子,特別是高濃度的Mg2+。的存在,對于保持膜的硬度,提高細(xì)胞膜上需Mg2+的合成酶的活性極為重要。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(2)革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、磷壁酸(參見P41)主要生理功能:細(xì)胞壁形成負(fù)電荷環(huán)境,增強(qiáng)細(xì)胞膜對二價(jià)陽離子的吸收;貯藏磷元素;增強(qiáng)某些致病菌對宿主細(xì)胞的粘連、避免被白細(xì)胞吞噬以及抗補(bǔ)體的作用;革蘭氏陽性細(xì)菌特異表面抗原的物質(zhì)基礎(chǔ);噬菌體的特異性吸附受體;能調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素(autolysin)的活力,防止細(xì)胞因自溶而死亡??勺鳛榧?xì)菌分類、鑒定的依據(jù)1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁肽聚糖外膜外膜蛋白周質(zhì)空間1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁A、肽聚糖埋藏在外膜層之內(nèi),是僅由1~2層肽聚糖網(wǎng)狀分子組成的薄層(2~3nm),含量約占細(xì)胞壁總重的10%,故對機(jī)械強(qiáng)度的抵抗力較革蘭氏陽性菌弱。內(nèi)消旋二氨基庚二酸(m-DAP)(只在原核微生物細(xì)胞壁上發(fā)現(xiàn))沒有特殊的肽橋,只形成較為疏稀、機(jī)械強(qiáng)度較差的肽聚糖網(wǎng)套(參見P41)1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)(參見P41)
位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外層,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干種蛋白質(zhì)組成的膜,有時(shí)也稱為外壁。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)位于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚(8~10nm)的類脂多糖類物質(zhì)。組成:類脂A;
核心多糖(corepolysaccharide);
O-特異側(cè)鏈(O-specificsidechain,或稱O-多糖或O-抗原)
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)脂多糖的主要功能LPS結(jié)構(gòu)的多變,決定了革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞表面抗原決定簇的多樣性;根據(jù)LPS抗原性的測定,沙門氏菌屬(Salmonella)的抗原型多達(dá)2107種,一般都源自O(shè)-特異側(cè)鏈種類的變化。這種多變性是革蘭氏陰性細(xì)菌躲避宿主免疫系統(tǒng)攻擊,保持感染成功的重要手段。也可依此用靈敏的血清學(xué)方法對病原菌進(jìn)行鑒定,在傳染病的診斷中有其重要意義。
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)脂多糖的主要功能LPS負(fù)電荷較強(qiáng),與磷壁酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等陽離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用,對細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)起穩(wěn)定作用。
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)脂多糖的主要功能類脂A是革蘭氏陰性細(xì)菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ);
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁B、外膜(outermembrane)脂多糖的主要功能具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能;許多噬菌體在細(xì)胞表面的吸附受體;1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁C、外膜蛋白(outermembraneprotein)嵌合在LPS和磷脂層外膜上的蛋白。有20余種,但多數(shù)功能尚不清楚。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁C、外膜蛋白(outermembraneprotein)孔蛋白(porins)是由三個(gè)相同分子量(36000)蛋白亞基組成的一種三聚體跨膜蛋白,中間有一直徑約1nm的孔道,通過孔的開、閉,可對進(jìn)入外膜層的物質(zhì)進(jìn)行選擇。非特異性孔蛋白特異性孔蛋白可通過分子量小于800~900的任何親水性分子只容許一種或少數(shù)幾種相關(guān)物質(zhì)通過,如維生素B12和核苷酸等。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁C、外膜蛋白(outermembraneprotein)脂蛋白(lipoprotein)是一種通過共價(jià)鍵使外膜層牢固地連接在肽聚糖內(nèi)壁層上的蛋白,分子量約為7200。1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁D、周質(zhì)空間(periplasmicspace,periplasm)又稱壁膜間隙。在革蘭氏陰性細(xì)菌中,一般指其外膜與細(xì)胞膜之間的狹窄空間(寬約12~15nm),呈膠狀。周質(zhì)空間是進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)的重要中轉(zhuǎn)站和反應(yīng)場所1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁D、周質(zhì)空間
在周質(zhì)空間中,存在著多種周質(zhì)蛋白(periplasmicproteins)水解酶類;合成酶類;結(jié)合蛋白;受體蛋白;1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(3)革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁D、周質(zhì)空間
1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(4)革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌的比較(參見P44,表3-2)1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(4)革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌的比較1、細(xì)胞壁4)革蘭氏染色與細(xì)胞壁:
(4)革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌的比較革蘭氏染色的原理(參見P46)(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁5)特殊細(xì)胞壁的細(xì)菌:某些分枝桿菌和諾卡氏菌的細(xì)胞壁主要由一類被稱為霉菌酸(Mycolicacid)的枝鏈羥基脂質(zhì)組成,后者被認(rèn)為與這些細(xì)菌感染能力有關(guān)。(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁5)特殊細(xì)胞壁的細(xì)菌:用抗酸性染色對宿主體內(nèi)的分枝桿菌病原體進(jìn)行檢測(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、細(xì)胞壁6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:
缺壁突變——L型細(xì)菌
實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)形成基本去盡——原生質(zhì)體(G+)缺壁細(xì)菌
人工去壁
部分去除——球狀體(G-)
在自然界長期進(jìn)化中形成——枝原體(參見P46)1、細(xì)胞壁6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:(1)L型細(xì)菌(L-formofbacteria)細(xì)菌在某些環(huán)境條件下(實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi))通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷變異型。因英國李斯德(Lister)預(yù)防研究所首先發(fā)現(xiàn)而得名(1935年,念珠狀鏈桿菌Streptobacillusmoniliformis)大腸桿菌、變形桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、分枝桿菌和霍亂弧菌等20多種細(xì)菌中均有發(fā)現(xiàn),被認(rèn)為可能與針對細(xì)胞壁的抗菌治療有關(guān)。特點(diǎn):沒有完整而堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多形態(tài);有些能通過細(xì)菌濾器,故又稱“濾過型細(xì)菌”;對滲透敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落(直徑在0.1mm左右);1、細(xì)胞壁6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:(2)原生質(zhì)體(protoplast)在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細(xì)胞壁合成而形成的僅由一層細(xì)胞膜包裹的,圓球形、對滲透壓變化敏感的細(xì)胞,一般由革蘭氏陽性細(xì)菌形成。特點(diǎn):對環(huán)境條件變化敏感,低滲透壓、振蕩、離心甚至通氣等都易引起其破裂;有的原生質(zhì)體具有鞭毛,但不能運(yùn)動(dòng),也不被相應(yīng)噬菌體所感染;在適宜條件(如高滲培養(yǎng)基)可生長繁殖、形成菌落,形成芽孢。及恢復(fù)成有細(xì)胞壁的正常結(jié)構(gòu)。比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì),是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體育種的良好實(shí)驗(yàn)材料。1、細(xì)胞壁6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:(3)球狀體(sphaeroplast),又稱原生質(zhì)球采用上述同樣方法,針對革蘭氏陰性細(xì)菌處理后而獲得的殘留部分細(xì)胞壁(外壁層)的球形體。與原生質(zhì)體相比,它對外界環(huán)境具有一定的抗性,可在普通培養(yǎng)基上生長。1、細(xì)胞壁6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:(4)枝原體(Mycoplasma)在長期進(jìn)化過程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無細(xì)胞壁的原核生物。因它的細(xì)胞膜中含有一般原核生物所沒有的甾醇,?所以即使缺乏細(xì)胞壁,其細(xì)胞膜仍有較高的機(jī)械強(qiáng)度。(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)2、細(xì)胞膜1)概念:細(xì)胞質(zhì)膜(cytoplasmicmembrane),又稱質(zhì)膜(plasmamembrane)、細(xì)胞膜(cellmembrane)或內(nèi)膜(innermembrane),是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜,厚約7~8nm,由磷脂(占20%~30%)和蛋白質(zhì)(占50%~70%)組成。(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)2、細(xì)胞膜2)觀察方法:質(zhì)壁分離后結(jié)合鑒別性染色在光學(xué)顯微鏡下觀察;原生質(zhì)體破裂;超薄切片電鏡觀察;電鏡觀察到的細(xì)胞質(zhì)膜,是在上下兩暗色層之間夾著一淺色中間層的雙層膜結(jié)構(gòu),這與細(xì)胞膜的化學(xué)組成有關(guān)。(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)2、細(xì)胞膜3)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:(1)磷脂(參見p47)親水的極性端疏水的非極性端3)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:(2)膜蛋白具運(yùn)輸功能的整合蛋白(integralprotein)或內(nèi)嵌蛋白(intrinsicprotein)具有酶促作用的周邊蛋白(peripheralprotein)或膜外蛋白(extrinsicprotein)膜蛋白約占細(xì)菌細(xì)胞膜的50%~70%,比任何一種生物膜都高,而且種類也多。--------細(xì)胞膜是一個(gè)重要的代謝活動(dòng)中心。3)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:(3)液態(tài)鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)①膜的主體是脂質(zhì)雙分子層;②脂質(zhì)雙分子層具有流動(dòng)性;③整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂質(zhì)雙分子層的疏水性內(nèi)層中;④周邊蛋白表面含有親水基團(tuán),故可通過靜電引力與脂質(zhì)雙分子層表面的極性頭相連;⑤脂質(zhì)分子間或脂質(zhì)與蛋白質(zhì)分子間無共價(jià)結(jié)合;⑥脂質(zhì)雙分子層猶如一“海洋”,周邊蛋白可在其上作“漂浮”運(yùn)動(dòng),而整合蛋白則似“冰山”狀沉浸在其中作橫向移動(dòng)。1972年,辛格(J.S.Singer)和尼科爾森(G.L.Nicolson)(參見P48)3)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:(3)液態(tài)鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)3)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:(4)甾醇類物質(zhì)由磷脂分子形成的雙分子膜中加入甾醇類物質(zhì)可以提高膜的穩(wěn)定性真核生物細(xì)胞膜中一般含有膽固醇等甾醇,含量為5%-25%。原核生物與真核生物的最大區(qū)別就是其細(xì)胞膜中一般不含膽固醇,而是含有hopanoid。甾醇的一般結(jié)構(gòu)(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)2、細(xì)胞膜4)細(xì)胞膜的生理功能:①選擇性地控制細(xì)胞內(nèi)、外的營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的運(yùn)送;②是維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的屏障;③合成細(xì)胞壁和糖被的各種組分(肽聚糖、磷壁酸、LPS、
莢膜多糖等)的重要基地;④膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代謝的酶系,是細(xì)胞的產(chǎn)能場所;⑤是鞭毛基體的著生部位和鞭毛旋轉(zhuǎn)的供能部位;(參見P48)(二)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)2、細(xì)胞膜5)間體(mesosome,或中體):細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造,其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見于革蘭氏陽性細(xì)菌。青霉素酶分泌、DNA復(fù)制、分配以及細(xì)胞分裂有關(guān)(參見P49)細(xì)胞質(zhì)的主要成分為核糖體、貯藏物、多種酶類和中間代謝物、質(zhì)粒、各種營養(yǎng)物和大分子的單體等,少數(shù)細(xì)菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物1)概念:
細(xì)胞質(zhì)(cytoplasm)是細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。含水量約80%。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)顆粒狀貯藏物(reservematerials):貯藏物是一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性沉淀顆粒,主要功能是貯存營養(yǎng)物。
糖原:大腸桿菌、克雷伯氏菌、芽孢桿菌和藍(lán)細(xì)菌等
碳源及能源類
聚β-羥丁酸(PHB):固氮菌、產(chǎn)堿菌和腸桿菌等
硫粒:紫硫細(xì)菌、絲硫細(xì)菌、貝氏硫桿菌等貯藏物藻青素:藍(lán)細(xì)菌
藻青蛋白:藍(lán)細(xì)菌
磷源(異染粒):迂回螺菌、白喉棒桿菌、結(jié)核分枝桿菌氮源類(參見P49)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)顆粒狀貯藏物(reservematerials):①聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)在含乙酸或丁酸的培養(yǎng)基中生長時(shí),細(xì)胞內(nèi)貯藏的PHB可達(dá)其干重的60%。類脂性質(zhì)的碳源類貯藏物(參見P49)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)顆粒狀貯藏物(reservematerials):①聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)PHB于1929年被發(fā)現(xiàn),至今已發(fā)現(xiàn)60屬以上的細(xì)菌能合成并貯藏。它無毒、可塑、易降解,被認(rèn)為是生產(chǎn)醫(yī)用塑料、生物降解塑料的良好原料。(參見P49)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)顆粒狀貯藏物(reservematerials):②多糖類貯藏物在真細(xì)菌中以糖原為多糖原粒較小,不染色需用電鏡觀察,用碘液染成褐色,可在光學(xué)顯微鏡下看到。糖原粒淀粉粒有的細(xì)菌積累淀粉粒,用碘液染成深蘭色。(參見P49)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)顆粒狀貯藏物(reservematerials):③異染粒(metachromaticgranules)大小:為0.5~1.0μm,成份:無機(jī)偏磷酸的聚合物,功能:1)貯藏磷元素和能量,2)降低細(xì)胞的滲透壓。一般在含磷豐富的環(huán)境下形成。3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物在暗視野顯微鏡下看到的迂回螺菌(Spirillum
volutans)異染粒(迂回體)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)貯藏物(reservematerials):④藻青素(cyanophycin)一種內(nèi)源性氮源貯藏物,同時(shí)還兼有貯存能源的作用。通常存在于藍(lán)細(xì)菌中。由含精氨酸和天冬氨酸殘基(1:1)的分枝多肽所構(gòu)成,分子量在25000~125000。(參見P49)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)貯藏物(reservematerials):⑤硫粒(sulfurglobules)很多真細(xì)菌在進(jìn)行產(chǎn)能代謝或生物合成時(shí),常涉及對還原性的硫化物如H2S,硫代硫酸鹽等的氧化。在環(huán)境中還原性硫素豐富時(shí),常在細(xì)胞內(nèi)以折光性很強(qiáng)的硫粒的形式積累硫元素。當(dāng)環(huán)境中環(huán)境中還原性硫缺乏時(shí),可被細(xì)菌重新利用。3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物2)貯藏物(reservematerials):微生物儲(chǔ)藏物的特點(diǎn)及生理功能:不同微生物其儲(chǔ)藏性內(nèi)含物不同(例如厭氣性梭狀芽孢桿菌只含PHB,大腸桿菌只儲(chǔ)藏糖原,但有些光和細(xì)菌二者兼有)微生物合理利用營養(yǎng)物質(zhì)的一種調(diào)節(jié)方式當(dāng)環(huán)境中缺乏能源而碳源豐富時(shí),細(xì)胞內(nèi)就儲(chǔ)藏較多的碳源類內(nèi)含物,甚至達(dá)到細(xì)胞干重的50%,如果把這樣的細(xì)胞移入有氮的培養(yǎng)基時(shí),這些儲(chǔ)藏物將被作為碳源和能源而用于合成反應(yīng)。儲(chǔ)藏物以多聚體的形式存在,有利于維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的平衡,避免不適合的pH,滲透壓等的危害。(例如羥基丁酸分子呈酸性,而當(dāng)其聚合成聚-β-羥丁酸(
PHB)就成為中性脂肪酸了,這樣便能維持細(xì)胞內(nèi)中性環(huán)境,避免菌體內(nèi)酸性增高。)儲(chǔ)藏物在細(xì)菌細(xì)胞中大量積累,還可以被人們利用。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物3)磁小體(megnetosome)趨磁細(xì)菌細(xì)胞中含有的大小均勻、數(shù)目不等的Fe3O4顆粒,外有一層磷脂、蛋白或糖蛋白膜包裹。(參見P50)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物3)磁小體(megnetosome)功能是導(dǎo)向作用,即借鞭毛游向?qū)υ摼钣欣哪唷⑺缑嫖⒀醐h(huán)境處生活。實(shí)用前景,包括生產(chǎn)磁性定向藥物或抗體,以及制造生物傳感器等(參見P50)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物4)羧酶體(carboxysome)一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物其大小與噬菌體相仿,約10nm,內(nèi)含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶,在自養(yǎng)細(xì)菌的CO2固定中起著關(guān)鍵作用。采用免疫電鏡技術(shù)觀察藍(lán)細(xì)菌cyanobacteriumChlorogloeopsisfritischii中的羧酶體(參見P51)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物5)氣泡(gasvocuoles)許多光合營養(yǎng)型、無鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌中存在的充滿氣體的泡囊狀內(nèi)含物,大小為0.2~1.0μm×75nm,內(nèi)由數(shù)排柱形小空泡組成,外有2nm厚的蛋白質(zhì)膜包裹。功能:調(diào)節(jié)細(xì)胞比重以使細(xì)胞漂浮在最適水層中獲取光能、O2和營養(yǎng)物質(zhì)藍(lán)細(xì)菌生長時(shí)依靠細(xì)胞內(nèi)的氣泡而漂浮于湖水表面,并隨風(fēng)聚集成塊,常使湖內(nèi)出現(xiàn)“水花”。有些厭氧性光合細(xì)菌利用氣泡集中在水下10-30米深處,這樣既能吸收適宜的光線和營養(yǎng)進(jìn)行光和作用,又可以避免直接與氧接觸。專性好氧的鹽桿菌屬(Halobacterium)的細(xì)菌,卻生活在含氧極少的飽和鹽水中,它們細(xì)胞中氣泡顯著,其作用被認(rèn)為是使菌體浮于鹽水表面,以保證細(xì)胞更接近空氣。(參見P51)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物5)氣泡(gasvocuoles)氣泡的膜只含蛋白質(zhì)而無磷脂。二種蛋白質(zhì)相互交連,形成一個(gè)堅(jiān)硬的結(jié)構(gòu),可耐受一定的壓力。膜的外表面親水,而內(nèi)側(cè)絕對疏水,故氣泡只能透氣而不能透過水和溶質(zhì)。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物6)載色體(Chromatophore)光和細(xì)菌進(jìn)行光和作用的部位相當(dāng)于綠色植物的葉綠體(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物7)核糖體(ribosome)組成:70S=50S(大)+30S(?。┕δ埽旱鞍踪|(zhì)合成場所(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物8)質(zhì)粒(plasmid)移到第八章“微生物遺傳”(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)4、核區(qū)(nuclearregionorarea)(參見P51)原核生物所特有的無核膜結(jié)構(gòu)、無固定形態(tài)的原始細(xì)胞核(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)4、核區(qū)(nuclearregionorarea)(參見P51)原核生物所特有的無核膜結(jié)構(gòu)、無固定形態(tài)的原始細(xì)胞核(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢(參見P51)1)概念
某些細(xì)菌在其生長發(fā)育后期,在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體,稱為芽孢(endospore或spore,偶譯“內(nèi)生孢子”)。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢(參見P51)2)細(xì)菌芽孢的特點(diǎn)整個(gè)生物界中抗逆性最強(qiáng)的生命體,是否能消滅芽孢是衡量各種消毒滅菌手段的最重要的指標(biāo)。常規(guī)加壓蒸汽滅菌的條件:121℃,15min以上115℃,30min以上芽孢是細(xì)菌的休眠體,在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營養(yǎng)態(tài)細(xì)胞;產(chǎn)芽孢細(xì)菌的保藏多用其芽孢。產(chǎn)芽孢的細(xì)菌多為桿菌,也有一些球菌。芽孢的有無、形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類和鑒定中的重要指標(biāo)。芽孢與營養(yǎng)細(xì)胞相比化學(xué)組成存在較大差異,容易在光學(xué)顯微鏡下觀察。(相差顯微鏡直接觀察;芽孢染色)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢(參見P53-54)3)芽孢的形成與芽孢的萌發(fā)過程(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢(參見P53-54)3)芽孢的形成與芽孢的萌發(fā)過程(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢(參見P55)4)芽孢的耐熱機(jī)制芽孢與母細(xì)胞相比不論化學(xué)組成、細(xì)微結(jié)構(gòu)、生理功能等方面都完全不同(表3-3)(參見P52圖3-13)滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說芽孢衣對多價(jià)陽離子和水分的透性很差皮層的離子強(qiáng)度很高,產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,結(jié)果造成皮層的充分膨脹。核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水,因此,具極強(qiáng)的耐熱性。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢5)伴孢晶體(parasporalcrystal)(參見P56)
少數(shù)芽孢桿菌,例如蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)在其形成芽孢的同時(shí),會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體——δ內(nèi)毒素,稱為伴孢晶體。伴孢晶體對200多種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用,因而可將這類產(chǎn)伴孢晶體的細(xì)菌制成有利于環(huán)境保護(hù)的生物農(nóng)藥——細(xì)菌殺蟲劑。特點(diǎn):不溶于水,對蛋白酶類不敏感;容易溶于堿性溶劑。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢5)伴孢晶體(parasporalcrystal)伴孢晶體鱗翅目幼蟲口服伴孢晶體在腸道迅速溶解(中腸pH為9.0-10.5)吸附于上皮細(xì)胞,引起滲透性喪失,腸道穿孔腸道中的堿性溶液進(jìn)入血液,后者pH升高,昆蟲全身麻痹而死亡(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢5)伴孢晶體(parasporalcrystal)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢6)細(xì)菌的其他休眠構(gòu)造1粘液孢子(myxospore)粘細(xì)菌(myxobacteria)產(chǎn)生(參見P56)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)5、特殊的休眠構(gòu)造——芽孢6)細(xì)菌的其他休眠構(gòu)造(參見P56)2孢囊(cyst)]棕色固氮菌(Azotobactervinelandii)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)6、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造———糖被(glycocalyx)1)概念
包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被按其有無固定層次、層次厚薄又可細(xì)分為莢膜(capsule或macrocapsule,大莢膜)、微莢膜(microcapsule)、粘液層(slimelayer)和菌膠團(tuán)(zoogloea)。(詳見P57)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)6、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造———糖被(glycocalyx)1)概念(詳見P57)莢膜粘液層菌膠團(tuán)(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)6、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造———糖被(glycocalyx)2)特點(diǎn)(詳見P57-58)(1)主要成分是多糖、多肽或蛋白質(zhì),尤以多糖居多。經(jīng)特殊的莢膜染色,特別是負(fù)染色(又稱背景染色)后可在光學(xué)顯微鏡清楚地觀察到它的存在。(三)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)6、細(xì)菌細(xì)胞壁以外的構(gòu)造———糖被(glycocalyx)2)特點(diǎn)(詳見P57-58)(
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