第三章藥物雜質(zhì)檢測技術(shù)演示文稿

第三章藥物雜質(zhì)檢測技術(shù)演示文稿目前一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點優(yōu)選第三章藥物雜質(zhì)檢測技術(shù)目前二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點導(dǎo)學(xué)情景情景描述：一天，小娟發(fā)現(xiàn)阿司匹林長毛了，小娟輕輕一抹，毛沒了，正打算把脫了小毛的藥片放入瓶里，恰好她表姐進(jìn)來了，看到此情景制止了小娟的行為，把長毛的藥片裝好，準(zhǔn)備交到藥店的過期或變質(zhì)藥品回收處。學(xué)前導(dǎo)語：藥品在生產(chǎn)、貯存過程中由于各種因素影響，會發(fā)生變質(zhì)反應(yīng)，產(chǎn)生多種雜質(zhì)，這些雜質(zhì)不僅沒有治療作用，往往還對人體有害。目前三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第一節(jié)雜質(zhì)的來源與雜質(zhì)檢查方法一、雜質(zhì)的來源及分類雜質(zhì)（impurities）是指：

1.有毒副作用的物質(zhì)

2.本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)

3.本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)目前四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點藥物的純度和化學(xué)試劑的純度的區(qū)別

前者主要從雜質(zhì)對用藥安全、有效性及藥物的穩(wěn)定性的影響方面考慮，后者是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對試劑的使用范圍和使用目的的影響來考慮。藥品只有兩個等級：合格或不合格?；瘜W(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。不能用化學(xué)試劑的規(guī)格代替藥品標(biāo)準(zhǔn)，不能將化學(xué)試劑當(dāng)做藥品直接用于臨床治療。目前五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（一）藥物中雜質(zhì)的來源1.生產(chǎn)過程中引入（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物

（2）試劑、溶劑、催化劑類

（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)目前六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.貯藏過程中產(chǎn)生

水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等目前七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等目前八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（二）藥物中雜質(zhì)的分類1.按雜質(zhì)的產(chǎn)生和分布特點分類（1）一般雜質(zhì)自然界中分布廣泛容易引入的雜質(zhì)氯化物硫酸鹽水分重金屬等（2）特殊雜質(zhì)特定藥物中產(chǎn)生，如阿司匹林中水楊酸硫酸阿托品中莨菪堿。2.按雜質(zhì)作用特點分類（1）信號雜質(zhì)（2）有害雜質(zhì)3.按雜質(zhì)結(jié)構(gòu)特點分類分為無機(jī)雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)目前九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二、藥物雜質(zhì)限量與雜質(zhì)檢查方法（一）雜質(zhì)限量指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示。限量檢查定義：不測定雜質(zhì)的含量，只檢查雜質(zhì)是否超過限量的方法。目前十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格目前十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（二）藥物雜質(zhì)檢查方法對照法靈敏度法比較法目前十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點1.對照法限量檢查法（LimitTest）方法：取一定量待檢查雜質(zhì)的對照液與一定量供試品液在相同條件處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否超限。要求：遵循平行操作原則特點：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量目前十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點雜質(zhì)限量計算雜質(zhì)限量=雜質(zhì)的最大允許量/供試品量雜質(zhì)限量=標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度X標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/供試品量L=CV/S×100%目前十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例1對乙酰氨基酚中硫酸鹽的檢查：取本品2.0g，加水100ml，加熱溶解后，冷卻、過濾、取濾液25ml，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1.0ml（1ml相當(dāng)于100μg的硫酸根）制成的對照液比較、濁度不得更大。求硫酸鹽的限量為多少？目前十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例2丙磺舒中檢查重金屬：取丙磺舒1.0g，依法檢查，重金屬不得超過百萬分之十，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛液多少ml？（每ml相當(dāng)于10μg的pb）目前十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例3檢查氯化鈉中砷鹽，規(guī)定取標(biāo)準(zhǔn)砷液2.0ml（1ml相當(dāng)于1ug的As）制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，要求砷含量不得超過0.00004%。問應(yīng)取供試品多少克。目前十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例4磷酸可待因中嗎啡檢查：取本品0.1g，加鹽酸溶液使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15分鐘，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡溶液【取無水嗎啡2.0ml，加鹽酸使溶解成100ml】5.0ml，用同一方法制成的對照液比較，不得變深，問限量為多少？目前十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點靈敏度法是以反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)的限量。系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。特點：不需對照品。目前十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例：純化水中氯化物檢查，在50ml中純化水中加入硝酸5滴，及硝酸銀試液1ml，要求不得發(fā)生渾濁。氯化物的限量就是測定條件下不產(chǎn)生氯化銀的渾濁為限。目前二十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點比較法方法：取供試品一定量依法檢查，測定待檢雜質(zhì)的吸收度或旋光度等與規(guī)定的限量比較，不得更大。特點：準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的吸收度或旋光度并與規(guī)定限量比較，不需要對照物。目前二十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查

藥物中雜質(zhì)的檢查是利用藥物與雜質(zhì)之間性質(zhì)（包括物理、化學(xué)性質(zhì)）的不同，選擇適當(dāng)有效的方法進(jìn)行檢查測定。藥典2015年版將一般雜質(zhì)的檢查方法收載于四部通則中，藥典正文中各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不再重復(fù)記敘這些方法，而是直接引用。目前二十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一般雜質(zhì)檢查要求：1.遵循平行操作原則（1）儀器的配對性如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致。（2）對照品與供試品的同步操作目前二十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.正確的取樣及供試品的稱量范圍（1g不超過±2%，＞1g不超過±1%）3.正確的比色、比濁方法及檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時應(yīng)對供試管和對照管各復(fù)查二份目前二十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一、氯化物檢查法一）檢查原理（對照法）利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀試液作用，生產(chǎn)氯化銀白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成氯化銀渾濁比較，以判斷供試品中氯化物是否超過限量。目前二十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）操作方法（藥典附錄）1.供試液：除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。目前二十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.對照溶液：另取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對照溶液。3.比濁：于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比濁。目前二十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（三）注意事項標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液

10ugCl/ml，50ml溶液中含50～80ug的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5～8ml。2.反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

目前二十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（1）加速AgCl渾濁的形成；（2）產(chǎn)生較好的乳濁；（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。目前二十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

3.試劑：硝酸銀

4.供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。

6.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。目前三十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

7.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

（1）內(nèi)消色法：分為兩等分量，一份加硝酸銀，出現(xiàn)沉淀，過濾。再加標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉和水，作為對照溶液。

（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。目前三十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二、硫酸鹽檢查法檢查原理(對照法)利用硫酸鹽在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇生成白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下與氯化鋇生成的渾濁比較，以判斷藥物中硫酸鹽是否超過限量。目前三十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）操作方法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40ml（如溶液顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得供試液。另取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，按同樣方法制成對照液于供試液與對照液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml，用水稀釋至50ml，搖勻，放置10min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。目前三十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點三）注意事項標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液:每1ml相當(dāng)于0.1mg的SO42－，50ml溶液中含0.1～0.5mg的SO42－所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1.0～5.0ml。2.反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。目前三十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.試劑：氯化鋇4.供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀5.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。目前三十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點四）干擾及排除加入鹽酸，排除碳酸離子等干擾。溫度太低，水浴加熱，加快渾濁產(chǎn)生。若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。供試液不澄明，用成酸性的水洗過的濾紙過濾。

目前三十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點三、鐵鹽檢查法1.原理對照法在鹽酸酸性溶液中，鐵鹽與硫氰酸銨生成紅色可溶解硫氰酸鐵配位離子，與標(biāo)準(zhǔn)液用同法處理，進(jìn)行比較，觀察顏色。目前三十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.檢查方法（藥典附錄）除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻（供試液及處理）；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對照溶液比較，即得。目前三十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點對照液：取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻目前三十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.測定條件（1）標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液及對照液用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0～5.0ml目前四十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

（2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。

（3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行（4）檢查Fe2+和Fe3+

目前四十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

（5）鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。目前四十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點4.干擾及排除

（1）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。

（2）干擾離子的影響（增加酸度，增加硫氰酸銨等

（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。目前四十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點四、重金屬（鉛）檢查法

重金屬主要指銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、鎳等，通常在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉試液作用而顯色的金屬雜質(zhì)。重金屬可以影響藥物的穩(wěn)定性及安全性。重金屬的檢查以鉛的檢查最為代表。目前四十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點重金屬檢查藥典2000收載了四種方法第一法：該法也稱硫代乙酰胺法第二法：熾灼殘渣法第三法硫化鈉法第四法微孔濾膜法目前四十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第一法（也稱硫代乙酰胺法）1.原理對照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

CH3CSNH2+H2O→CH3CONH2+H2SPb2++H2S→PbS+2H+（PH3.5）目前四十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.操作方法取25ml納氏比色管兩只，甲管中加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5）2ml后，加水或規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，乙管中加入按各藥品項規(guī)定下的方法制成的供試液25ml；再分別于甲、乙兩管中加入硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，比色。目前四十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

3.測定條件

（1）用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10gPb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20g的Pb2+，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1~2ml。目前四十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（2）本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5，此時硫化鉛沉淀較完全。（酸度大，顏色淺甚至不顯色）

（3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑

目前四十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.干擾及排除（1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

A.外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

B.內(nèi)消色法

C.改用第四法，微孔濾膜過濾法目前五十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（2）若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸Vc或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾（3）若藥物本身能生成不溶性硫化物時，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后（生成穩(wěn)定配合物），依第三法檢查（加入硫化鈉）。目前五十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第二法熾灼殘渣法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。

1.原理對照法

500～600℃熾灼后的殘渣，經(jīng)處理后，依一法檢查。目前五十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.操作方法

取熾灼殘渣，加硝酸，放冷，加鹽酸，加水，加氨水對酚酞顯示中性，再加醋酸鹽緩沖液，加水稀釋作為供試液。另根據(jù)規(guī)定配置標(biāo)準(zhǔn)液，用第一法檢查，可得。含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。目前五十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

1.原理對照法在氫氧化鈉堿性條件下，重金屬雜質(zhì)與硫化鈉生成有色硫化物，再與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理的顏色進(jìn)行比較，來判斷重金屬的含量。目前五十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.測定條件

（1）NaOH堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉用于難溶于稀酸能溶于堿水的藥物。如巴比妥類。目前五十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第四法微孔濾膜法

適用于含2～5g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。依一法檢查，微孔濾膜過濾后比較色斑。（含量低，難以比色）目前五十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點五、砷鹽檢查法（一）古蔡法1.原理對照法

鋅與酸生成新生態(tài)的氫，砷化氫遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較目前五十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點目前五十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2）標(biāo)準(zhǔn)砷斑制備（3）供試品砷斑制備（4）比色（5）結(jié)果判斷目前五十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.注意事項（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（三氧化二砷）臨用新配（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。目前六十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點B.碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；D.可抑制微量銻化氫的干擾，在實驗條件下，100gSb存在也不干擾測定。（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A.還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；

目前六十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（4）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。（5）鋅粒應(yīng)無砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察目前六十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點4.干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時，加HNO3，△，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。

目前六十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。常用的有機(jī)破壞方法：堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作目前六十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點（4）本法適用于不含Sb（銻）或含Sb量小于100g的供試品。目前六十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點七、干燥失重測定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，通常以百分率表示。主要是水分，揮發(fā)性物質(zhì)。方法：一）常壓干燥法、二）干燥劑干燥法、三）減壓干燥法目前六十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一）常壓干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。操作：將供試品置相同條件已干燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定，于烘箱內(nèi)在規(guī)定溫度下干燥至恒重（連續(xù)兩次干燥后重量差在0.3mg以下），根據(jù)減失的量和取樣量計算供試品的干燥失重。目前六十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點注意事項：1.干燥溫度一般為105℃，干燥時間2~4小時，取出于干燥器中冷卻至室溫稱重。2.第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。3.供試品平鋪于稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松物質(zhì)不超過10mm，顆粒大的需研細(xì)4.含結(jié)晶水的可提高干燥溫度。目前六十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點5.供試品易熔化的，可先在低溫下干燥，然后在規(guī)定溫度下干燥6.受熱易分解而達(dá)不到恒重的，采用一定溫度干燥一定時間減失的重量代表干燥失重。目前六十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點目前七十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。將供試品置于干燥器內(nèi)，利用干燥器內(nèi)的干燥劑吸收供試品中的水分，干燥至恒重。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5

。目前七十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點目前七十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點三）減壓干燥法

適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。減壓干燥器或恒溫減壓干燥器目前七十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點目前七十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點六、酸堿度檢查法溶劑：新沸冷水為溶劑，不溶于水的藥物可以用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解，或?qū)⑺幬锱c水混搖，使所含酸堿性雜質(zhì)溶解，濾過，取濾液檢查。目前七十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一）酸堿滴定法原理：在規(guī)定的指示液條件下，用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標(biāo)。目前七十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例：檢查氯化鈉的酸堿度取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚藍(lán)指示液2滴，如顯黃色（示為酸性），加氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.10ml，應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；如顯藍(lán)色或綠色（示為堿性），加鹽酸滴定液（0.02mol/L）0.20ml，應(yīng)變?yōu)辄S色。目前七十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）指示劑法原理：利用規(guī)定指示劑的變色pH范圍控制供試液中酸堿雜質(zhì)限量。例：純化水的酸堿度檢查取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯色（控制酸度）；另取10ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色（控制堿度），即純化水酸堿度控制在pH4.2-7.6.目前七十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點三）pH測定法采用電位法直接測定溶液的pH.,準(zhǔn)確度高，用于注射液等的檢查。目前七十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)——是指該藥物的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。例：阿司匹林中游離的水楊酸；腎上腺素中的酮體；硫酸阿托品中的莨菪堿等。目前八十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

藥物中特殊雜質(zhì)的檢查，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的，方法的專屬性十分關(guān)鍵：物理法：嗅味、顏色、溶解行為化學(xué)法：酸堿差異、氧化還原、雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀（顏色、氣體）等旋光法：比旋度、旋光度分光光度法：紫外、比色原子吸收、紅外等色譜法：紙色譜、薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜目前八十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點物理法1.嗅味及揮發(fā)性差異（雜質(zhì)有特殊嗅味）例：乙醇中檢查雜醇油，將乙醇滴在無嗅清潔的濾紙上，待乙醇自然揮發(fā)后，不應(yīng)留有雜油醇異嗅；麻醉乙醚中檢查異嗅：取本品10ml，置瓷蒸發(fā)器中，使自然揮發(fā)，揮散完畢，不得有異味目前八十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品2.0g,直火加熱無辛味。濃過氧化氫中不揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：10ml水浴蒸干殘渣＜15mg目前八十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點2.顏色的差異（控制有色雜質(zhì)）參照溶液顏色檢查法。例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.0g，加NaOH試液10ml，加水25ml，與黃色3號比色液比，不得更深。目前八十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.溶解行為差異（雜質(zhì)和藥物的可溶性不同）例，檢查硫酸鋇中的酸中溶解物：將供試品加稀鹽酸與純化水煮沸，濾除硫酸鋇后，濾液蒸干，遺留殘渣不得超過規(guī)定限量。例，磺胺嘧啶中原料2-氨基嘧啶等堿性雜質(zhì)檢查：利用磺胺嘧啶溶于堿，雜質(zhì)不溶液堿，供試品加氫氧化鈉后澄清為合格。目前八十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點化學(xué)法1.酸堿性差異例：苯巴比妥中檢查巴比妥酸：供試品加水煮沸，濾液加甲基橙指示液，不得顯紅色為合格。2.氧化還原性差異例：氯化鈉中碘化物的檢查：供試品中加淀粉混合液（硫酸、亞硝酸、淀粉）濕潤，日光下觀察，5分鐘內(nèi)不得顯藍(lán)色痕跡。目前八十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點酸堿性的差異

1.規(guī)定消耗滴定液體積例如己酸羥孕酮中正己酐、對甲苯磺酸檢查：(NaOH0.02mol/L)

取本品0.20g+中性乙醇+溴麝香草酚藍(lán)微藍(lán)色＜0.50ml

2.pH法例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸檢查：0.01g/mlpH3.0～4.5.

3.指示劑法

例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅色。目前八十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點氧化還原性的差異例如：NaCl中I-和Br-檢查EOCl/2Cl-=+1.3595V＞EOBr/2Br-=+1.065V

＞EOI/2I-=+0.5345V,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉顯藍(lán)色

再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性綠色化合物。因此ChP規(guī)定：本品50mg+4mlH2O+1dI2+5ml乙醚乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。目前八十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點3.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀氯化鈉中檢查鋇鹽藥物中草酸鹽的檢查4.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色5.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生氣體藥物中微量硫化物：酸性條件下放出H2S氣體，與醋酸鉛試紙形成棕色硫斑，與標(biāo)準(zhǔn)硫斑比較。氰化物檢查（改進(jìn)普魯士藍(lán)法，氣體擴(kuò)散三硝基苯酚鋰法）目前八十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者+Pb(Ac)2

白色∴ChP規(guī)定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸+0.5mlPb(Ac)2

不得發(fā)生混濁，即為合格。例二、硝酸毛果蕓香堿中其他生物的檢查：后者+氨水+K2Cr2O7∴ChP規(guī)定：本品0.2g+20mlH2O兩份；I份+數(shù)滴氨試液；另

1份+數(shù)滴K2Cr2O7試液，均不得發(fā)生混濁。目前九十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色例一、鹽酸普萘洛爾中游離α-萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)，生成偶氮染料。∴ChP規(guī)定：供試品20mg+乙醇與10%NaOH液各2ml+重氮苯磺酸試液1ml,放置3min；如顯色，與0.3mlα-萘酚對照液（20μg/ml)比較不得更深。例二、碘他拉酸中氨基化合物的檢查：利用重氮化-偶合反應(yīng)∴ChP規(guī)定：供試品2.5mg/ml經(jīng)重氮化-偶合反應(yīng)后，在波長

485nm測得A＜0.25目前九十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體

ChP附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：第一法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法原理：CN-+酒石酸HCN[Fe(CN)6]4-Fe4[Fe(CN)6]第二法：氣體擴(kuò)散-三硝基苯酚鋰法原理：HCN擴(kuò)散進(jìn)入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在

500nm波長處測定吸收度?！鱂e2+Fe3+目前九十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì)某些環(huán)狀有機(jī)藥物在生產(chǎn)中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜質(zhì)，這些雜質(zhì)與有機(jī)分子中的碳原子以共價鍵結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī)破壞后檢查，各國藥典所采用的方法為氧瓶燃燒法。

目前九十三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點旋光法具有旋光活性的藥物，測定旋光度或比旋度來控制雜質(zhì)限量。例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4目前九十四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點分光光度法由于藥物和雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同，對光吸收的性質(zhì)就有差異，因此，利用雜質(zhì)與藥物對光選擇性吸收的差異，檢查藥物所含雜質(zhì)。一）紫外分光光度法二）比色法三）原子吸收分光光度法四）紅外分光光度法目前九十五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一）紫外分光光度法原理：利用紫外分光光度法檢查雜質(zhì)限量，通常是采用檢查雜質(zhì)吸收度的方法。配制一定濃度的供試品溶液，選擇在藥品無吸收而雜質(zhì)有吸收的波長處測定吸收度，規(guī)定測得得吸收度不得超過某一限制。目前九十六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點地蒽酚（二羥基蒽醌）λ432nm地蒽酚基本無吸收二羥基蒽醌最大吸收規(guī)定：0.01%的供試溶液在432nm處的A≤0.12目前九十七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液的吸收度比來控制雜質(zhì);純品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59;99.5%時A247nm/A258nm=0.79;

因此規(guī)定供試品A247nm/A258nm

＜0.79;即所含苯丙酮＜0.5%.目前九十八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）比色法原理：對照法目視比色分光光度計測定吸收度后進(jìn)行比較目前九十九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點三）原子吸收分光光度法原理：是利用待測元素?zé)舭l(fā)出的特征譜線通過供試品蒸汽時，被蒸汽中待測元素的基態(tài)原子所吸收，通過測定輻射光強(qiáng)度減弱的程度可求出供試品中待測元素的含量。通常借比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品的吸收度，求得樣品中待測元素的含量。目前一百頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點儀器——原子吸收分光光度計。光源：待測元素作為陰極的空心陰極燈原子化器：霧化器和燃燒燈構(gòu)成，作用是產(chǎn)生原子蒸汽單色器：檢測器：目前一百零一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點特點：靈敏度高，專屬性強(qiáng)，主要用于金屬元素的測定。方法：取供試品按規(guī)定配制成供試液B；另取等量供試品，加入限量的待測元素溶液，制備成對照液A。先將A液噴入火焰，調(diào)節(jié)儀器使具有合適讀數(shù)a；在相同條件下，噴入供試液B，記錄讀數(shù)b。b相當(dāng)于供試品溶液中待測元素的含量，a-b相對于對照溶液中加按限量加入的待測元素的量。當(dāng)b<(a-b)時，表示供試品中所含雜質(zhì)元素符合規(guī)定，當(dāng)b>（a-b）時，表示供試品中所含雜質(zhì)元素超過限量，為不合格。目前一百零二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點限量檢查時：對照品液=供試品+限量-----a

供試品液=------------------b

符合規(guī)定時b＜(a-b);b＞(a-b)不合格。目前一百零三頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例：肝素鈉中檢查鉀鹽：取本品0.10g，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋置刻度，搖勻，即為供試品溶液B；另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鉀溶液5ml，置50ml量瓶中，加B溶液稀釋至刻度線，搖勻，作為對照液A。在766.5nm波長處測定a和b，如果b<(a-b)則肝素鈉中鉀鹽含量合格。供試液供試液+標(biāo)準(zhǔn)KCl原子吸收λ766.5nm測定ba則應(yīng)b<a-b目前一百零四頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點四）紅外分光光度法原理：某些多晶型藥物由于晶型不同，某些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角發(fā)生不同程度的變化，可導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征帶頻率，峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異。目前一百零五頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點特點：主要用于藥物中無效或低效晶型檢查。例：無味氯霉素混懸劑中A晶型的檢查、甲苯咪唑中A晶型檢查目前一百零六頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點

A晶型C晶型在640cm-1有強(qiáng)吸收吸收很弱在662cm-1吸收很弱有強(qiáng)吸收

662cm-1640cm-1662cm-1640cm-1

對照品+10%A晶型D2D1

供試品D2D1＜10%R=D1/D2

＞R’=D’1/D’2甲苯咪唑中A晶型檢查目前一百零七頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點色譜法色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的吸附或分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測，因而廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法檢查特殊雜質(zhì)的方法有：紙色譜法、薄層色譜法，高效液相色譜法，氣相色譜法。目前一百零八頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點一）紙色譜法（紙層析法，PC)

常用于極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。目前一百零九頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點方法：取一定量的供試品溶液及雜質(zhì)限量對照液，于同一色譜濾紙上點樣，展開，處理后比較雜質(zhì)斑點的個數(shù)、顏色或熒光強(qiáng)度等，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。目前一百一十頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點例：地高辛中檢查洋地黃毒苷分別點加供試品溶液及洋地黃毒苷對照品溶液于同一色譜濾紙上，以新制的甲酰胺飽和的二甲苯-丁酮溶液上行展開，120℃烘干、放冷、噴新配制的三氯醋酸-氯仿溶液，再于100℃烘干后，在365nm紫外燈光下檢視，供試品溶液所顯斑點的熒光強(qiáng)度與對照液的斑點比較，不得更強(qiáng)。特點：紙色譜展開時間長，斑點較為擴(kuò)散，應(yīng)用不如TLC廣泛。目前一百一十一頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點二）薄層色譜法在特殊雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多，具有靈敏（ug）、簡便、快速、不需特殊設(shè)備的優(yōu)點。目前一百一十二頁\總數(shù)一百二十二頁\編于十七點1.在一定供試品和檢測條件下，不允許有雜質(zhì)色斑，是利用顯色劑對雜質(zhì)的最小檢出量控制其限量。（需要顯示劑，不需要對照）例：馬來酸噻嗎洛爾中檢查有關(guān)雜質(zhì)取本品，加甲醇制成每ml含25mg的溶液，吸取上液5μl，點于硅膠G薄層板上，以