無病毒苗木的鑒定及保存

無病毒苗木的鑒定及保存主講人：孟凡麗01020304目錄：脫毒效果的鑒定農(nóng)藝性狀鑒定無病毒苗木的繁殖無病毒苗木的保存1234指示植物法電子顯微鏡法抗血清鑒定法分子生物學(xué)檢測法一、脫毒效果的鑒定

利用病毒在其他植物上產(chǎn)生特定癥狀作為鑒別病毒存在與否及種類的方法稱指示植物法。一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測靈敏、準(zhǔn)確、可靠、操作簡便。根據(jù)不同病毒，選擇合適的指示植物。一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測（1）優(yōu)點：（2）對指示植物的要求：容易栽培。對要鑒別的病毒敏感，易接種，易感染，癥狀顯著。一、脫毒效果的鑒定汁液涂抹法嫁接接種法1.指示植物檢測(3)鑒定方法:一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測（1）汁液涂抹法香石竹汁液涂抹脫毒鑒定法操作示意圖研缽中研磨，過濾。15432取被鑒定植物幼葉1－3g。濾液中加少量500－600目金剛砂。棉花球醮汁液涂抹葉面2－3次。指示植物15－25℃培養(yǎng)。一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測（1）汁液涂抹法一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測（2）嫁接接種法草莓指示植物小葉嫁接檢測法示意圖一、脫毒效果的鑒定1.指示植物檢測（2）嫁接接種法將被鑒定植物的芽或幼葉嫁接在指示植物上，4～6周后根據(jù)指示植物癥狀來判斷是否脫毒?？乖c抗體發(fā)生特異性反應(yīng)（血清學(xué)反應(yīng)），根據(jù)反應(yīng)的癥狀可鑒別病毒存在與否和種類，這種方法稱為血清學(xué)鑒定。一、脫毒效果的鑒定(1)概念：2.抗血清鑒定法一、脫毒效果的鑒定2.抗血清鑒定法(2)原理：病毒侵入動物體后，動物血清中會產(chǎn)生抗體，含抗體的血清稱為抗血清，病毒即為抗原。專一性高，結(jié)果準(zhǔn)確，快速簡便，一般幾小時甚至幾分鐘就可完成。①間接法：是用家兔球蛋白的山羊抗體與酶結(jié)合后制成羊抗兔酶標(biāo)記抗體，檢測各種病毒。一、脫毒效果的鑒定2.抗血清鑒定法（3）優(yōu)點：（4）方法：②雙抗體夾心法：是用酶特異性抗體檢測抗原的方法。利用電鏡直接觀察、檢查出有無病毒存在。還可得知有關(guān)病毒顆粒的大小、形狀和結(jié)構(gòu)。一、脫毒效果的鑒定(1)概念：3.電子顯微鏡法一、脫毒效果的鑒定3.電子顯微鏡法(2)優(yōu)點：由于觀察病毒特征是相當(dāng)穩(wěn)定的，故對病毒鑒定及研究一種未知的病原物是很重要的。通過檢測病毒核酸來證實病毒的存在。一、脫毒效果的鑒定(1)概念：4.分子生物學(xué)檢測法一、脫毒效果的鑒定(2)優(yōu)點：

此法操作簡便，靈敏度高，特異性強，檢測速度快，可用于大量樣品的檢測。4.分子生物學(xué)檢測法無病毒苗木經(jīng)過脫毒和脫毒效果鑒定后，還需進行田間農(nóng)藝性狀鑒定，確證脫毒苗仍保持原品種的特征特性之后，才能作為原種進行推廣。二、農(nóng)藝性狀鑒定三、無病毒苗木的繁殖主要采用無性繁殖方法，如嫁接、扦插、壓條、匍匐莖繁殖和微型塊莖(根)繁殖等方法繁育無病毒苗木。1.建立無病毒母本園2.完善繁育手續(xù)3.規(guī)范繁育技術(shù)三、無病毒苗木的繁殖在繁殖無病毒苗木時，對其繁殖技術(shù)有如下要求：02040301無病毒苗木應(yīng)種植在300目的防蟲網(wǎng)內(nèi)。噴施農(nóng)藥防治蟲害，保證無病毒苗木在