adtau外泌體磷酸化檢測(cè)艾爾茲海默癥神經(jīng)退行性疾病

目錄阿爾茲海默癥

病因臨床表現(xiàn)檢查診斷治療方法外泌體Tau蛋白及其磷酸化目前一頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)阿爾茨海默?。ˋD）別稱:早老性癡呆，老年性癡呆，老年前期癡呆英文名稱:Alzheimerdisease，AD就診科室:神經(jīng)內(nèi)科多發(fā)群體:70歲以上阿爾茨海默病（AD）是一種起病隱匿的進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。臨床上以記憶障礙、失語(yǔ)、失用、失認(rèn)、視空間技能損害、執(zhí)行功能障礙以及人格和行為改變等全面性癡呆表現(xiàn)為特征，病因迄今未明。65歲以前發(fā)病者，稱早老性癡呆；65歲以后發(fā)病者稱老年性癡呆。目前二頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)病因該病可能是一組異質(zhì)性疾病，在多種因素（包括生物和社會(huì)心理因素）的作用下才發(fā)病。從目前研究來看，該病的可能因素和假說多達(dá)30余種，如家族史、女性、頭部外傷、低教育水平、甲狀腺病、母育齡過高或過低、病毒感染等。與AD有關(guān)的遺傳學(xué)位點(diǎn)，目前已知的至少有以下4個(gè)：早發(fā)型AD基因座分別位于2l、14、1號(hào)染色體。相應(yīng)的可能致病基因?yàn)锳PP、S182和STM-2基因。遲發(fā)型AD基因座位于19號(hào)染色體，可能致病基因?yàn)檩d脂蛋白E（APOE）基因。目前三頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)臨床表現(xiàn)該病起病緩慢或隱匿，病人及家人常說不清何時(shí)起病。多見于70歲以上（男性平均73歲，女性為75歲）老人，少數(shù)病人在軀體疾病、骨折或精神受到刺激后癥狀迅速明朗化。女性較男性多（女∶男為3∶1）。主要表現(xiàn)為認(rèn)知功能下降、精神癥狀和行為障礙、日常生活能力的逐漸下降。根據(jù)認(rèn)知能力和身體機(jī)能的惡化程度分成三個(gè)時(shí)期。第一階段（1～3年）為輕度癡呆期。表現(xiàn)為記憶減退，對(duì)近事遺忘突出出現(xiàn)時(shí)間定向障礙，對(duì)所處的場(chǎng)所和人物能做出定向，對(duì)所處地理位置定向困難.第二階段（2～10年）為中度癡呆期。表現(xiàn)為遠(yuǎn)近記憶嚴(yán)重受損不能獨(dú)立進(jìn)行室外活動(dòng)，在穿衣、個(gè)人衛(wèi)生以及保持個(gè)人儀表方面需要幫助情感由淡漠變?yōu)榧痹瓴话?，常走?dòng)不停，可見尿失禁第三階段（8～12年）為重度癡呆期?；颊咭呀?jīng)完全依賴照護(hù)者，嚴(yán)重記憶力喪失，僅存片段的記憶；日常生活不能自理，大小便失禁，呈現(xiàn)緘默、肢體僵直，查體可見錐體束征陽(yáng)性，有強(qiáng)握、摸索和吸吮等原始反射。最終昏迷，一般死于感染等并發(fā)癥。目前四頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)檢查1.神經(jīng)心理學(xué)測(cè)驗(yàn)2.血液學(xué)檢查3.神經(jīng)影像學(xué)檢查4.腦電圖（EEG）5.腦脊液檢測(cè)6.基因檢測(cè)簡(jiǎn)易精神量表（MMSE）：是目前臨床上測(cè)查本病智能損害程度最常見的量表。專門用于檢測(cè)AD嚴(yán)重程度的變化，但主要用于臨床試驗(yàn):日常生活能力評(píng)估;行為和精神癥狀（BPSD）的評(píng)估:包括阿爾茨海默病行為病理評(píng)定量表（BEHAVE-AD）、神經(jīng)精神癥狀問卷（NPI）和Cohen-Mansfield激越問卷（CMAI）等主要用于發(fā)現(xiàn)存在的伴隨疾病或并發(fā)癥、發(fā)現(xiàn)潛在的危險(xiǎn)因素、排除其他病因所致癡呆。包括血常規(guī)、血糖、血電解質(zhì)包括血鈣、腎功能和肝功能、維生素B12、葉酸水平、甲狀腺素等指標(biāo)。結(jié)構(gòu)影像學(xué)：用于排除其他潛在疾病和發(fā)現(xiàn)AD的特異性影像學(xué)表現(xiàn):頭CT（薄層掃描）和MRI（冠狀位）檢查，可顯示腦皮質(zhì)萎縮明顯，特別是海馬及內(nèi)側(cè)顳葉，支持AD的臨床診斷。功能性神經(jīng)影像：如正電子掃描（PET）和單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描（SPECT）可提高癡呆診斷可信度。AD的EEG表現(xiàn)為α波減少、θ波增高、平均頻率降低的特征。但14%的患者在疾病早期EEG正常。EEG用于AD的鑒別診斷，可提供朊蛋白病的早期證據(jù)，或提示可能存在中毒-代謝異常、暫時(shí)性癲癇性失憶或其他癲癇疾病。腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白質(zhì)、葡萄糖和蛋白電泳分析：血管炎、感染或脫髓鞘疾病疑似者應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)?？焖龠M(jìn)展的癡呆患者應(yīng)行14-3-3蛋白檢查，有助于朊蛋白病的診斷。腦脊液β淀粉樣蛋白、Tau蛋白檢測(cè)：AD患者的腦脊液中β淀粉樣蛋白（Aβ42）水平下降（由于Aβ42在腦內(nèi)沉積，使得腦脊液中Aβ42含量減少），總Tau蛋白或磷酸化Tau蛋白升高?？蔀樵\斷提供參考。淀粉樣蛋白前體蛋白基因（APP）、早老素1、2基因（PS1、PS2）突變?cè)诩易逍栽绨l(fā)型AD中占50%。載脂蛋白APOE4基因檢測(cè)可作為散發(fā)性AD的參考依據(jù)。目前五頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)腦脊液β淀粉樣蛋白、Tau蛋白檢測(cè)

腦脊液β淀粉樣蛋白、Tau蛋白檢測(cè)：AD患者的腦脊液中β淀粉樣蛋白（Aβ42）水平下降（由于Aβ42在腦內(nèi)沉積，使得腦脊液中Aβ42含量減少），總Tau蛋白或磷酸化Tau蛋白升高。研究顯示，Aβ42診斷的靈敏度86%，特異性90%；總Tau蛋白診斷的靈敏度81%，特異性90%；磷酸化Tau蛋白診斷的靈敏度80%和特異性92%；Aβ42和總Tau蛋白聯(lián)合診斷AD與對(duì)照比較的靈敏度可達(dá)85%～94%，特異性為83%～100%。這些標(biāo)記物可用于支持AD診斷，但鑒別AD與其他癡呆診斷時(shí)特異性低（39%～90%）。目前尚缺乏統(tǒng)一的檢測(cè)和樣本處理方法。目前六頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)治療一般治療AD患者常伴有軀體疾病，而且病程中又可出現(xiàn)新的認(rèn)知功能障損害和精神癥狀，涉及到精神科、神經(jīng)科、內(nèi)科各學(xué)科等多學(xué)科治療。應(yīng)細(xì)致、定期地觀察病人，對(duì)有明顯幻覺、妄想等危險(xiǎn)行為者，應(yīng)及時(shí)住院治療，對(duì)生活不能自理的晚期病人應(yīng)建議注相關(guān)醫(yī)院，同時(shí)應(yīng)向其家屬普及安全和護(hù)理知識(shí)。應(yīng)限制外出或陪伴外出。飲食中補(bǔ)充富含卵磷脂、維生素A、維生素E、鋅、硒等微量元素的事物，限制鋁的攝入等藥物治療1、神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)的藥物1）膽堿能藥物：乙酰膽堿為促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)遞質(zhì)。膽堿酯酶抑制劑：通常只適用輕、中度AD無患者，因此其療效依賴于膽堿神經(jīng)元的完整程度。2）非膽堿能藥物：老年腦功能衰退的原因還與其他神經(jīng)遞質(zhì)如去甲腎上腺素、多巴胺、5-羥色胺、γ-氨基丁酸、神經(jīng)肽等的失衡有關(guān)。此類藥物有司來吉蘭、利諾吡啶等。2、腦細(xì)胞代謝激活劑3、腦血循環(huán)促進(jìn)劑4、鈣離子拮抗劑

：在含有神經(jīng)元纖維纏結(jié)的腦細(xì)胞核來源于AD病人的成纖維細(xì)胞，均可見得鈣的堆積。5、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子

6、抗氧化劑：蝦青素、輔酶Q10、維生素E、花青素、葉黃素、司來吉林等7、雌激素：其作用機(jī)理尚不清楚8、中醫(yī)目前七頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)帕金森綜合征對(duì)比帕金森疊加綜合征的表現(xiàn)類似帕金森，但程度重，病變廣，對(duì)左旋多巴治療反應(yīng)不佳，包括多系統(tǒng)萎縮（MSA）、進(jìn)行性核上麻痹（PSP）和皮質(zhì)基底節(jié)變性（CBD）、路易體癡呆（DLB）等。繼發(fā)性帕金森綜合征多是由藥物、感染、中毒、腦卒中、外傷等明確病因所致。用于治療精神疾病的神經(jīng)安定劑（吩噻嗪類和丁酰苯類）是最常見的致病藥物。遺傳性帕金森綜合征可見于肝豆?fàn)詈俗冃浴ahr病、多巴反應(yīng)性肌張力障礙（DRD）等。帕金森綜合征最常見的病因是原發(fā)性帕金森病，該病因黑質(zhì)紋狀體變性、腦內(nèi)多巴胺含量顯著減少所致，對(duì)左旋多巴治療有效，約占帕金森綜合征的80%。目前八頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)二、Tau蛋白與阿爾茲海默癥Tau蛋白介紹阿爾茨海默?。ˋD）的TAU變化tau蛋白病理性-----外泌體作用項(xiàng)目、專利、文獻(xiàn)：分析循環(huán)外泌體中的蛋白，開發(fā)阿爾茨海默癥血液測(cè)試;Tau/P-Tau蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線目前九頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)1、Tau蛋白介紹促進(jìn)微管裝配和穩(wěn)定,可能參與神經(jīng)細(xì)胞極性的建立和維護(hù)。糖基結(jié)合軸索的微管,而N-端結(jié)合神經(jīng)質(zhì)膜組件,這表明Tau蛋白作為一個(gè)鏈接器之間的蛋白質(zhì)。軸突的極性是預(yù)定的Tau/MAPT定位(神經(jīng)細(xì)胞)的域定義的細(xì)胞中心體。短亞型允許可塑性的細(xì)胞骨架，而更長(zhǎng)的亞型可能優(yōu)先在穩(wěn)定中發(fā)揮作用Microtubule-associatedproteintau（微管相關(guān)蛋白MAPs）

神經(jīng)原纖維纏結(jié)蛋白；螺旋形細(xì)絲蛋白（PHF-Tau）目前十頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)Tau蛋白磷酸化tau蛋白是一種微管相關(guān)蛋白(microtubuleassociatedproteins,MAPs)，主要存在于軸突內(nèi)，由位于17號(hào)染色體長(zhǎng)臂(17q)的tau蛋白基因編碼，長(zhǎng)度在100kb以上，有16個(gè)外顯子，其中11個(gè)編碼tau蛋白。現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)21個(gè)異常過度磷酸化位點(diǎn)，主要位于N-末端(Ser198~Thr217)和C-末端(Ser396~Ser422)至微管結(jié)合重復(fù)區(qū)。目前研究較多的有6個(gè)磷酸化位點(diǎn)，分別為Thr181、Ser199/202、Ser202/Thr205、Thr231、Ser262/356和Ser396/404。tau蛋白分子包括6種含有3~4個(gè)微管結(jié)合重復(fù)區(qū)的變異體，分別由352、381、383、410、412和441個(gè)氨基酸殘基組成，分子量為48~67kDa，是同一基因不同mRNA剪接的產(chǎn)物，主要區(qū)別在于C-末端有3或4個(gè)微管結(jié)合區(qū)及N-末端的插入序列數(shù)目(0~2個(gè))。AD患者腦中可出現(xiàn)3種tau蛋白：易溶型非磷酸化tau蛋白(C-Tau)、易溶型磷酸化tau蛋白(P-Tau)和雙股螺旋絲(pairedhelicalfilaments,PHFs)聚合tau蛋白(PHF-Tau)，它們可能代表神經(jīng)原纖維退化過程的不同階段[3]。研究結(jié)果證實(shí)，海馬、內(nèi)嗅區(qū)回路的軸突內(nèi)PHF-Tau的數(shù)量決定了癡呆的臨床表現(xiàn)和程度，同時(shí)也是AD中發(fā)生認(rèn)知和記憶功能障礙的重要原因。目前十一頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)2、阿爾茨海默病的磷酸化在阿爾茨海默病大腦中的神經(jīng)元細(xì)胞骨架逐步瓦解,取而代之的是纏結(jié)的配對(duì)螺旋細(xì)絲(PHF)和直絲,主要由過度磷酸化形式的TAU(PHF-TAU或ADP-TAU)。O-GlcNAcylation大大減少在阿爾茨海默病大腦大腦皮層增加TAU/MAPT磷酸化目前十二頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)tau蛋白參與下的淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)假說Tau蛋白與微管蛋白結(jié)合促進(jìn)其聚合形成微管，其高度可溶，主要存在軸突中與微管結(jié)合。在與tau蛋白相關(guān)的疾病中，其主要病理改變?yōu)閠au蛋白磷酸化而致使不能與微管結(jié)合，從而造成軸突轉(zhuǎn)運(yùn)障礙。AD的主要病理特點(diǎn)之一也是腦內(nèi)神經(jīng)元磷酸化tau蛋白高度聚集。針對(duì)tau蛋白的研究顯示其可能為AD治療的另一關(guān)鍵點(diǎn)。tau蛋白的磷酸化又涉及到一系列激酶如CDK5、鈣調(diào)蛋白酶、GSK3β等的激活，設(shè)計(jì)針對(duì)這些激酶的藥物是治療AD的途徑之一。

磷酸化tau蛋白與阿爾茨海默病病理過程從Aβ到tau蛋白，阿爾茨海默病的治療方式在探索中前進(jìn)，針對(duì)tau蛋白的免疫治療前景廣闊。大量免疫學(xué)研究顯示在動(dòng)物試驗(yàn)中降低磷酸化tau是可行的，且可以改善認(rèn)知功能。一些tau蛋白相關(guān)疫苗也正處于前期臨床階段，很快也將進(jìn)入臨床試驗(yàn)。目前十三頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)病理性tau蛋白的積累是阿爾茨海默病的一個(gè)重要特點(diǎn)。在疾病的早期Tau蛋白從內(nèi)嗅皮質(zhì)向海馬區(qū)域傳播。大腦中的吞噬細(xì)胞小膠質(zhì)細(xì)胞與tau蛋白的病理相關(guān)，但他們?cè)趖au蛋白聚集中的作用仍是未知的。Asai,H.,etal.(2015).NatNeurosci18(11):1584-1593.

IF=16Budnik,V.,etal.(2016).NatRevNeurosci17(3):160-172.

IF=313、tau蛋白病理性-----外泌體作用來自波士頓大學(xué)的研究者們開發(fā)了一種腺相關(guān)病毒為基礎(chǔ)的模型，tau蛋白可在4周內(nèi)從內(nèi)嗅皮層快速聚集至齒狀回。研究發(fā)現(xiàn)，去除小膠質(zhì)細(xì)胞可顯著抑制tau的聚集，并且在該小鼠模型齒狀回中降低興奮性。

此外，研究證明，小膠質(zhì)細(xì)胞通過分泌外泌體的方式傳播tau蛋白，并且在體外和體內(nèi)抑制外泌體合成可顯著降低tau蛋白聚集。這些數(shù)據(jù)表明，小膠質(zhì)細(xì)胞和外泌體促進(jìn)了tau蛋白病的發(fā)展，該外泌體分泌途徑可能是一個(gè)潛在的治療靶標(biāo)。目前十四頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)研究項(xiàng)目：分析循環(huán)外泌體中的蛋白，開發(fā)阿爾茨海默癥血液測(cè)試

研究者：加州大學(xué)醫(yī)學(xué)和免疫學(xué)教授EdwardGoetzl背景蛋白質(zhì)檢測(cè)注意事項(xiàng)前景展望阿爾茨海默癥（AD）是一種進(jìn)程性的神經(jīng)退行性疾病，俗稱為老年癡呆癥。目前醫(yī)生們主要通過臨床癥狀、大腦成像和腦脊液提取來診斷阿爾茨海默癥。雖然這些診斷往往是正確的，但只有尸檢才能證實(shí)疾病標(biāo)志的存在：大腦中的β淀粉樣蛋白斑塊和tau錯(cuò)誤折疊形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)。源自神經(jīng)元的外泌體含有細(xì)胞特異性的蛋白質(zhì)和RNA。如果可以通過循環(huán)外泌體追蹤異常的β淀粉樣蛋白和tau蛋白，那么定期血檢就可以用來監(jiān)控阿爾茨海默癥患者的疾病進(jìn)程。Goetzl及其同事收集了阿爾茨海默癥患者確診前后的血樣。他們先用SystemBiosciences公司的ExoQuick分離血樣中的所有外泌體，再用結(jié)合神經(jīng)元表面蛋白的抗體富集神經(jīng)元外泌體，檢測(cè)這些外泌體所含的蛋白質(zhì)。研究顯示，在阿爾茨海默癥患者的神經(jīng)元外泌體中，tau、磷酸化tau和β淀粉樣蛋白的表達(dá)水平顯著較高。舉例來說，阿爾茨海默癥神經(jīng)元外泌體的磷酸化tau比對(duì)照多十倍。現(xiàn)在還不清楚血液中神經(jīng)元外泌體的總量是否會(huì)隨著疾病狀態(tài)發(fā)生改變，因此我們應(yīng)該適當(dāng)處理數(shù)據(jù)，在單個(gè)外泌體水平上進(jìn)行分析。此外，蛋白質(zhì)從外泌體提取出來之后需要迅速分析，“外泌體把蛋白質(zhì)保護(hù)得很好，一旦我們將蛋白質(zhì)提取出來，它們就很容易降解，”Goetzl指出。2013年Goetzl與人合作建立了NanoSomiX公司，以開發(fā)阿爾茨海默癥血液測(cè)試。他說：“我們希望能夠提前10-15年鑒定到疾病風(fēng)險(xiǎn)，讓高風(fēng)險(xiǎn)人群使用預(yù)防性藥物，”時(shí)間：2016年4月14日目前十五頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)診斷率AD：96.4%診斷率FTD：87.5%結(jié)論:

神經(jīng)組織分泌于血液的外泌體中，P-S396-tau、P-T181-tau和Aβ–42水平，在臨床發(fā)病前10年的診斷阿爾茨海默癥（AD）目前十六頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)研究背景ExosomalTauCTE的許多臨床特征在普通人群中很常見，在沒有歷史的情況下頭部撞擊暴露，使臨床診斷困難。正如現(xiàn)在常見的其他神經(jīng)退行性疾病，如阿爾茨海默病，需要通過客觀生物標(biāo)志物來診斷生命中的CTE。慢性創(chuàng)傷性腦部病變是慢性創(chuàng)傷性腦病(CTE)是一個(gè)tauopathy與之前暴露于重復(fù)的影響,如發(fā)生碰撞通過美式足球和其他運(yùn)動(dòng)。診斷是通過神經(jīng)病理檢查進(jìn)行的。目前十七頁(yè)\總數(shù)二十一頁(yè)\編于九點(diǎn)JournalofAlzheimer’sDisease51(2016