病毒與工農(nóng)業(yè)應(yīng)用實踐

作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學(xué)資源庫病毒與工農(nóng)業(yè)應(yīng)用實踐1.噬菌體的侵染與異常發(fā)酵

發(fā)酵周期延長；碳源消耗緩慢；OD值不升或下降；pH值變化大，明顯上升；發(fā)酵液產(chǎn)氣泡，粘稠，拉絲；革氏染色不均勻，菌體少，有碎片；發(fā)酵產(chǎn)物形成緩慢或根本不形成；用敏感菌作平板檢查時，出現(xiàn)大量噬菌斑；電鏡觀察，可見大量噬菌體粒子。一、噬菌體與發(fā)酵工業(yè)2.噬菌體的分離與檢查直接觀察法（電鏡）雙層平板法或液體法3.預(yù)防噬菌體污染的措施(1)決不使用污染或有污染嫌疑的菌種，并經(jīng)常輪換生產(chǎn)菌種;(2)嚴格保持環(huán)境衛(wèi)生;(3)各種非生產(chǎn)菌液及時滅活;(4)生產(chǎn)設(shè)備定期清洗、滅菌;(5)嚴格操作守則。

4.已染噬菌體后發(fā)酵過程應(yīng)采取的措施(1)加入少量的表面活性劑，如0.1～0.2％土溫等，抑制噬菌體吸附；(2)加入少量的抗生素，如1～2μg/ml的四環(huán)素、氯霉素等，抑制噬菌體蛋白合成；(3)加入一些金屬螯合劑，如草酸鈉等也對抑制噬菌體的吸附有幫助。(4)如要繼續(xù)發(fā)酵，應(yīng)及時向發(fā)酵液中補加抗噬菌體的菌種。(5)如果是在發(fā)酵后期感染噬菌體，應(yīng)盡快將發(fā)酵液中的產(chǎn)品提取以減少損失。

二、噬菌體與基因工程通過結(jié)構(gòu)改造，可成為理想的基因工程的載體作為基因工程載體的優(yōu)點：(1)由于λ噬菌體基因組中約一半基因不是噬菌體生長和噬菌斑形成所必需的，可被外源基因取代而不影響其生長繁殖。(2)λ噬菌體能將其自身基因組與宿主基因組進行整合，可使插入的外源基因隨宿主基因共同復(fù)制，便于目標(biāo)基因的收獲。(3)λ噬菌體載體感染效率高，對宿主不需要象質(zhì)粒轉(zhuǎn)化那樣制備感受態(tài)細胞，操作簡便。p91p921.λ噬菌體作為基因工程載體的優(yōu)點：(1)有大的基因片段可以接受改造。(2)子代病毒粒子是通過病毒DNA穿出宿主細胞膜而釋放，宿主細胞并不裂解，可使病毒粒子上攜帶的基因?qū)崿F(xiàn)持續(xù)表達和分泌。(3)基因組為單鏈DNA，是測序和突變分析的理想材料，同時胞內(nèi)復(fù)制型的雙鏈DNA便于基因重組的操作。2.大腸桿菌絲狀噬菌體M13、fd、f1噬菌體展示技術(shù)：攜帶外源基因的噬菌體基因經(jīng)過繁殖后所編碼的酶蛋白分子可獨立的展示于噬菌體衣殼表面而不影響噬菌體的結(jié)構(gòu)和生物活性。三、病毒與農(nóng)業(yè)應(yīng)用昆蟲病毒作為生物殺蟲劑防治農(nóng)業(yè)害蟲生物殺蟲劑使用至今仍不普及的主要原因：(1)生物殺蟲劑價格高；(2)病毒殺蟲劑的專一性過高導(dǎo)致治理多種害蟲感染無法用一種殺蟲劑高效殺滅害蟲；(3)使用條件苛刻，導(dǎo)致殺蟲效果不理想；(4)殺蟲速度慢。