婦科栓劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

作者簡介：袁捷（1971-），男，副研究員，醫(yī)學(xué)博士，主要研究方向?yàn)橹兴幮滤庨_發(fā)研究通訊作者：*黃松（1974-），男，助理研究員，博士，主要研究方向?yàn)樾滤幯芯块_發(fā)與植化電話E-mail:hsl318@婦科栓劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究袁捷1,2，李婧1，黃松1,2*，陳吉航1（1．廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州510006；2．東莞廣州中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥數(shù)理工程研究院，廣東東莞523808）摘要：目的研究婦科栓劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),以更好控制產(chǎn)品質(zhì)量。方法建立黃連、黃柏、苦參、蛇床子的薄層色譜法(TLC)和龍膽苦苷的高效液相色譜含量測定方法。結(jié)果TLC法可檢出黃連黃柏、苦參、蛇床子，斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無干擾專屬性強(qiáng)。龍膽苦苷在0.688～6.880μg范圍內(nèi)線性良好（r=0．9999），平均加樣回收率為l01．91％，RSD為2.00％(n=6)。結(jié)論試驗(yàn)方法定性、定量方法簡單、可靠、準(zhǔn)確，可用于該制劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：婦科栓劑；薄層鑒別；龍膽苦苷；高效液相色譜法StudyontheQualityStandardofFukesuppositoryYUANJie，LIJing，HUANGSong，CHENJi-hang，HUANGMeng-qiu(1.GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou,510006,China;2.DongguanMathematicalEngineeringAcademyofChineseMedicineandGuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine,Dongguan,523808,China)Abstract:ObjectTostudythequalitativestandardofFukesuppository,soastobettercontrolthequalityofthisproduct.MethodToestablishtheThinLayerChromatography(TLC)forRhizomaCoptidis，CortexPhellodendriChinensis，RadixSophoraeFlavescentis，F(xiàn)ructusCnidii,anddeterminationmethodforgentiopicrinbytheHighPerformanceLiquidChromatography(HPLC).ResultTheTLCmethodcanwellidentifyRhizomaCoptidis，CortexPhellodendriChinensis，RadixSophoraeFlavescentis，F(xiàn)ructusCnidii,withclearspots,non-interferenceofnegativecontrolsandgoodspecificity.Asatisfactorylinearityofthegentiopicrinisobtained,rangingfrom0.688～6.880μg,withagoodcorrelationcoefficient(R=0.9999).Theaveragerecoveryis101.91%,RSDas2.00%(n=6).ConclusionThismethodissimpleforqualitativeandquantitative,reliableandprecise,canbeusedforqualitativecontrolofthispreparation.Keywords:Fukesuppository;TLC;gentiopicrin;HPLC婦科栓劑為廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)中心研制的復(fù)方中藥栓劑，該制劑由湖南某中醫(yī)院臨床驗(yàn)方開發(fā)而成，該方在臨床上使用多年,具有清熱解毒，消炎止痛，殺蟲止癢，消腫止痛之功效，對(duì)治療霉菌性，滴蟲性，細(xì)菌性陰道炎，宮頸炎，外陰瘙癢，濕疹等病癥效果十分顯著，并對(duì)淋病具有輔助治療作用。本試驗(yàn)建立了龍膽的主要成分龍膽苦苷的含量測定方法以及黃連、黃柏、苦參、蛇床子的薄層鑒別方法。1儀器與試藥1.1儀器SHIMADZU高效液相色譜儀(日本島津公司)，LC－20AT泵，SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器，SPD-20A紫外可見光檢測器，Aquapro艾科浦u系列純水機(jī)，CP225D十萬分之一電子天平（德國sartorius公司），硅膠G，硅膠GF254（青島海洋化工廠生產(chǎn)）。1.2試藥黃柏（121510-200501），黃連（120913-200407），苦參（121019-200304），蛇床子（121030-200405），鹽酸小檗堿(批號(hào)110713－200208)，苦參堿(批號(hào)110805－200306)，龍膽苦苷（110770-200611），蛇床子素（110822-200305）均由中國藥品生物制品檢定所提供；甲醇、乙腈（色譜純，德國默克公司），其余試劑均為分析純，婦科栓劑為廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心的中試樣品。2方法與結(jié)果2.1薄層鑒別2.1.1黃連黃柏的薄層鑒別取三個(gè)批號(hào)的本品各4.5g，加稀鹽酸溶液100mL，加熱使溶解，超聲30min，靜置過濾，取濾液20mL，水浴蒸干，加甲醇2mL使溶解。濾液作為供試品溶液。另取黃連黃柏對(duì)照品藥材各0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再取去黃連黃柏的模擬處方，按供試品溶液的制備方法，依法制精密量取2.2.2項(xiàng)下對(duì)照品溶液1，3，5，7，10mL，置10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，制成不同濃度對(duì)照品溶液，精密吸取10μL，分別進(jìn)樣，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，分別記錄峰面積積分值，測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=1041999.071711X+22688.51639，線性范圍為0.688～6.880μg，r=0.9999；表明龍膽苦苷在0.688~6.880μg內(nèi)線性關(guān)系良好。2.2.6精密度試驗(yàn)精密吸取龍膽苦苷對(duì)照品溶液10μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，以峰面積計(jì)算龍膽苦苷的RSD為1.10%；將龍膽苦苷對(duì)照品溶液在7日內(nèi)連續(xù)測定6次，以峰面積計(jì)算龍膽苦苷的RSD為2.05%。結(jié)果表明日內(nèi)精密度和日間精密度均良好。2.2.7重復(fù)性試驗(yàn)取同一批樣品(批號(hào)中試1)，按“3.2.2”項(xiàng)下方法制成供試品溶液共5份，分別測得龍膽苦苷含量平均值分別為0.89mg·g-1，RSD為1.57%。結(jié)果表明重復(fù)性良好。2.2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一份供試品溶液(批號(hào)中試1)，分別于0，2，4，6，8，10，12，24h進(jìn)樣測定。結(jié)果表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定，龍膽苦苷峰面積的RSD(n=8)分別為1.43%。2.2.9加樣回收率試驗(yàn)取已知含量的樣品(批號(hào)中試1)，切碎，研勻，取約1.0g，共6份，精密稱定，每份樣品分別加入精密稱取的龍膽苦苷對(duì)照品。按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備溶液，分別進(jìn)樣測定，計(jì)算平均回收率為101.91%，RSD=2.00%。結(jié)果見表1。表1加樣回收率測定結(jié)果取樣量（g）樣品中龍膽苦苷含量（mg）加入龍膽苦苷量（mg）測得龍膽苦苷總量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）1.0230.911.021.98104.86101.912.001.0530.941.102.07102.980.9940.881.041.95102.441.0150.900.981.8798.641.0300.920.961.89101.391.0430.931.072.01100.942.2.10樣品的測定對(duì)3批婦科栓劑中試樣品進(jìn)行含量測定，每批樣品取5份，用外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果三批樣品中龍膽苦苷平均含量分別為0.89mg·g-1、0.92mg·g-1、0.95mg·g-1，RSD分別為1.57%、1.35%、1.49%。3討論3.1黃連和黃柏中都含有鹽酸小檗堿，單獨(dú)鑒別時(shí)產(chǎn)生相互干擾，因此采用2味藥材同時(shí)鑒別，結(jié)果薄層色譜中斑點(diǎn)分離良好，陰性樣品無干擾。在鹽酸小檗堿的鑒別中，提取樣品時(shí)選用稀鹽酸而不用常規(guī)的甲醇進(jìn)行提取，是因該婦科栓劑的基質(zhì)不溶于水而極易溶于甲醇等極性大的有機(jī)溶劑里。薄層層析時(shí)，經(jīng)過多次試驗(yàn)，總結(jié)了濕度對(duì)鹽酸小檗堿的分離影響大，本實(shí)驗(yàn)得出最佳的分離濕度是42%。3.2在苦參的鑒別中，先參考藥典[1]（2005版）里的展開劑進(jìn)行展開，同時(shí)參考唐曉[2]、張濤[3]等人文獻(xiàn)資料，兩者進(jìn)行比較，結(jié)果表明用一個(gè)展開劑甲苯-丙酮-乙酸乙酯-濃氨試液（2：3：4：0.4）進(jìn)行一次性展開就可得到良好的清晰的斑點(diǎn)，與藥典的二次展開相比，該方法更加簡便易行。3.3在蛇床子的鑒別中，對(duì)婦科栓劑樣品進(jìn)行提取時(shí)，提取前可以省去除基質(zhì)這