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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)二微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)營養(yǎng)條件----培養(yǎng)基人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同要求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì).培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基的成分水碳源氮源無機(jī)鹽生長因子其他條件配制培養(yǎng)基時(shí)還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子)以及氧氣的需求。環(huán)境條件-----無菌技術(shù)----消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法?;瘜W(xué)試劑消毒法:用酒精擦拭雙手、氯氣消毒水源等。紫外線消毒法:紫外線照射接種室、接種箱或超凈工作臺。無菌技術(shù)----灼燒滅菌將微生物的接種工具,如接種環(huán)、接種針或其他金屬器具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速徹底滅菌。接種過程中,試管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通過火焰灼燒來滅菌。無菌技術(shù)----干熱滅菌

將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi),在160~170℃加熱1~2小時(shí)可達(dá)到滅菌目的。能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬器具等。無菌技術(shù)----高壓蒸汽滅菌

將滅菌物品放置高壓蒸汽滅菌鍋中,一般保持壓力為100KPa、溫度121℃條件下,維持15~30分鐘。思考---選擇合適方法消毒或滅菌培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿玻棒、試管、燒瓶、吸管實(shí)驗(yàn)者的雙手環(huán)境條件-----培養(yǎng)溫度和時(shí)間種類

條件溫度天數(shù)細(xì)菌30~37度1~2d放線菌25~28度5~7d真菌25~28度3~4d純化技術(shù)------菌落菌落:微生物在固體培養(yǎng)基表面生長可形成菌落。單菌落:一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。

獲得單菌落就達(dá)到了純化培養(yǎng)微生物的目的。實(shí)驗(yàn)藥品及器材

大腸桿菌菌液、液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、酒精燈、70%酒精棉、高壓滅菌鍋、涂布器、接種環(huán)、恒溫培養(yǎng)箱等。配制培養(yǎng)基----液體培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化(不加瓊脂)調(diào)pH滅菌配制培養(yǎng)基----固體培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化(添加瓊脂)調(diào)pH滅菌倒平板(50℃)純化遵大腸蛙桿菌--帳--平板鍬劃線棟法平板帶劃線糟法是餅通過劣接種臥環(huán)在列固體杰培養(yǎng)錄基表降面連鼓續(xù)劃藍(lán)線的許操作贈(zèng),將兄聚集膽的菌妙種逐衣步稀汪釋分銀散到慕培養(yǎng)些基的息表面烤。在比數(shù)次碰劃線踢后培躲養(yǎng),堅(jiān)可以孫得到境單菌捏落。純化激大腸嬌桿菌--剝--稀釋離涂布灑法稀釋辦涂布腦平板唯法是銳將菌飲液進(jìn)賀行一換系列裳的梯玩度稀僵釋,堂然后初將不衛(wèi)同稀脊釋度嶄的菌虜液分嘉別涂闊布到死固體窗培養(yǎng)淘基上澆進(jìn)行掃培養(yǎng)紋。合適的稀貼釋度分菌液順涂布乖后可紋在固嚼體培型養(yǎng)基撈上形蠶成單究菌落允。注意欠:取洞出涂棵布器腰時(shí),軋要讓抵多余順的酒窩精在茂燒杯壓中滴輔盡,允然后繁將沾芽有少躺量酒嫁精的附涂布績器再派灼燒侮滅菌炕。培養(yǎng)將接眠種后雪的培撲養(yǎng)基銳和一悼個(gè)未衫接種液的培降養(yǎng)基壩都放臘入37℃恒絨溫箱影中,培養(yǎng)12小時(shí)慨和24小時(shí)動(dòng)后,分別勿觀察滋并記暮錄結(jié)抱果。實(shí)驗(yàn)雀四壟微生淺物數(shù)瘡量的濁測定統(tǒng)計(jì)慚菌落絨數(shù)目購估算途樣品酷中的隆活菌夫數(shù)量當(dāng)稀招釋度攤足夠寺高時(shí)努,平更板上溜的一蓮個(gè)菌腫落來優(yōu)源于濫菌液壁中的但一個(gè)咱活菌述。在實(shí)故際操逼作中艙,通平常選棉用一篩定稀層釋范噴圍的樣樣品損液進(jìn)抖行培津養(yǎng)以鞋保證芝獲得小菌落挨數(shù)在30~30樂0之間暫、適俊于計(jì)程數(shù)的摸平板畏。合適斥的稀同釋度測定書土壤派中細(xì)痰菌的幅數(shù)量墻,一肥般選倆用104、105和106倍的揚(yáng)稀釋芝液進(jìn)帽行平班板培估養(yǎng)實(shí)驗(yàn)隔方法稀釋覽涂布煮法實(shí)驗(yàn)日步驟土壤擴(kuò)取樣秋。配制宇一系資列梯釣度稀前釋土鑒壤溶自液涂布章在固膚體培珠養(yǎng)基咽上,語按照根不同漸微生想物培集養(yǎng)溫貞度和倡時(shí)間霧進(jìn)行江培養(yǎng)男。統(tǒng)計(jì)乏菌落抬:每恐個(gè)梯如度應(yīng)固多涂斜幾個(gè)額平板快,取殲其平青均值填。并置設(shè)置腎空白漁對照扭。估算攜每克怖樣品擦中的誰菌株交數(shù):統(tǒng)計(jì)火結(jié)果螺常常研用菌抓落數(shù)腐目。蜻所測獻(xiàn)得的丑菌落群數(shù)目豆一般行小于朝實(shí)際怪菌液驅(qū)中的真活菌改數(shù)。顯微患鏡直稀接計(jì)殿數(shù)法畜:血乳球計(jì)塘數(shù)板蠶法統(tǒng)計(jì)爹結(jié)果巴:一筍般用揮活菌瞧數(shù)表砍示。濾膜夢法:鳴測定肢飲用振水中好大腸位桿菌幕的數(shù)竹目已知有體積志的水疤過濾擺后,意將濾究膜放頭在伊帝紅—美藍(lán)掉培養(yǎng)蜻基上江培養(yǎng)歲。在換該培

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