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文檔簡介
第6章黃酮類化合物----黃酮類的鑒定鑒定一、薄層色譜法(TLC)二、
紙色譜法(PC)一、
薄層色譜法
一般采用吸附薄層,吸附劑大多用硅膠和聚酰胺。(1)硅膠薄層色譜:用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物分離苷元常用展開劑:甲苯-甲酸甲酯-甲酸;氯仿-甲醇等。(2)聚酰胺薄層色譜:分離含游離酚羥基的黃酮苷與苷元。展開劑:具有較強的極性,大多含有醇、酸或水如:乙醇-水(3:2),水-乙醇-甲酸-乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5)聚酰胺薄層(乙醇/水)二、紙色譜法(PC)
PC適于分離各種天然黃酮類化合物及其苷類的混合物。黃酮苷:一般采用雙向展開
7黃酮類化合物的檢識和結構鑒定第一相展開采用醇性展開劑如:BAWn-BuOH:HOAc:H2O=4:1:5上層
TBAt-BuOH:HOAc:H2O=3:1:1
水飽和n-BuOH層析行為:Rf值:苷元>單糖苷>雙糖苷一般:苷元在0.70以上,而苷則小于0.7。第二相展開采用水性展開劑如:2~6%HOAc水溶液
3%NaCl水溶液
HOAc:濃HCl:H2O=30:3:10層析行為:連接糖鏈越長,Rf
越大(>0.5);
苷元Rf較小,有的留在原點。ABCDABCD苷元苷元紙色譜
第I向醇性展開劑第II向水性展開劑(BAW、TBA、水飽和正丁醇)
(2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl)
正相色譜
反相色譜固定相(水)極性>流動相
(有認為是吸附原理)Rf規(guī)律:極性小的化合物Rf大
極性大的化合物Rf大苷元>單糖苷>雙糖苷Rf規(guī)律與左邊相反母核相同,二-OH>三-OH>四-OH>五-OH黃酮主要應用:苷元的分離鑒別
黃酮苷及花色素類的分離鑒別雙相色譜9紙層析(PC):采用雙向紙層析。
苷元:
平面型分子:黃酮(醇)、查耳酮的Rf小,幾乎留在
原點不動(Rf<0.02);
非平面型分子:二氫黃酮(醇)、二氫查耳酮的Rf大,
因親水性較強(Rf0.10-0.30)。
層析檢查方法:
①觀察熒光,用紫外光燈照射看到有色斑點,NH3處理
產生明顯的色變。
②用2%AlCl3甲醇液噴霧,UV燈下呈亮黃色熒光斑點。習題有下列四種黃酮類化合物A、R1=R2=HB、R1=H,R2=RhaC、R1=Glc,R2=HD、R1=Glc,R2=Rha比較其酸性及極性的大小:
酸性()>()>()>()極性()>()>()>()比較這四種化合物在如下三種色譜中Rf值大小順序:(1)硅膠TLC(條件CHCl3—MeOH4:1展開),Rf值()>()>()>()(2)聚酰胺TLC(條件60%甲醇—水展開),Rf值
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