醫(yī)療器械呼吸道病原菌核酸檢測試劑盒產(chǎn)品需求文檔

醫(yī)療器械呼吸道病原菌核酸檢測試劑盒

產(chǎn)品需求文檔目錄目錄 2 第1章引言 3 第2章產(chǎn)品綜述 4 TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"產(chǎn)品名稱 4\o"CurrentDocument"產(chǎn)品介紹 4產(chǎn)品組成 5\o"CurrentDocument"產(chǎn)品預(yù)期用途 5產(chǎn)品分類 5產(chǎn)品主要功能、性能 6\o"CurrentDocument"整機(jī)技術(shù)要求 8\o"CurrentDocument"環(huán)境特性 8\o"CurrentDocument"可靠性及壽命 8\o"CurrentDocument"軟件升級要求 8EMC設(shè)計需求 8\o"CurrentDocument"第5章適用標(biāo)準(zhǔn) 9第第1章引言本文的目的為規(guī)劃好呼吸道病原菌核酸檢測試劑的產(chǎn)品功能及規(guī)格，作為后續(xù)開發(fā)的設(shè)計需求，為后期產(chǎn)品驗證和確認(rèn)提供依據(jù)。第第2章產(chǎn)品綜述產(chǎn)品名稱錯誤!未找到引用源。產(chǎn)品介紹環(huán)介導(dǎo)恒溫擴(kuò)增法（Loop-mediatedIsothermal—5—Amplification,LAMP）的原理是針對靶序列的6個區(qū)域設(shè)計4條特異引物（包括2條內(nèi)引物和2條外引物），利用具備鏈置換功能的DNA聚合酶在恒定溫度（65℃左右）下不斷復(fù)制擴(kuò)增DNA，其反應(yīng)過程包括啞鈴狀模板合成階段、循環(huán)擴(kuò)增階段、伸長和再循環(huán)階段，最終形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)和多環(huán)花椰菜樣結(jié)構(gòu)的DNA片段混合物。通常還在反應(yīng)體系中添加兩條環(huán)引物，使之分別與莖環(huán)結(jié)構(gòu)結(jié)合，啟動鏈置換合成，循環(huán)復(fù)制，提高反應(yīng)效率。本試劑盒在恒溫擴(kuò)增反應(yīng)體系中加入熒光染料，利用熒光染料摻入法進(jìn)行實時熒光檢測。陽性樣本擴(kuò)增檢測時會產(chǎn)生“S”形實時熒光擴(kuò)增曲線，一步完成對靶基因的擴(kuò)增和檢測。該檢測技術(shù)與微流控芯片技術(shù)相結(jié)合，可同時對多種核酸靶基因進(jìn)行并行擴(kuò)增檢測。每張芯片上設(shè)有10個反應(yīng)池，依次編號1-10號。每張芯片在特定反應(yīng)池包埋固定一套引物用于其對應(yīng)核酸靶序列的擴(kuò)增與檢測。本產(chǎn)品的主要原材料包括：引物、酶、dNTPs、熒光染料、對照品和芯片底片。這些原材料均為外購方式獲得。引物為申請人自行設(shè)計后由專業(yè)的合成公司合成。芯片底片為申請人自主研發(fā)、外協(xié)加工。申請人選擇有資質(zhì)的供應(yīng)商提供的原料，通過功能性試—6—驗，篩選出最佳原材料和供應(yīng)商，制定了各主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)檢驗合格。試劑盒在企業(yè)內(nèi)部產(chǎn)品放行之前使用企業(yè)參考品進(jìn)行最終放行檢測，參考品采用臨床分離株和標(biāo)準(zhǔn)菌株制備而成，包含陰性參考品、陽性參考品、最低檢出限參考品和重復(fù)性參考品。陰性參考品為乙酸鈣不動桿菌、屎腸球菌、奇異變形桿菌、瓊氏不動桿菌、陰溝腸桿菌和摩氏摩根菌的混合菌液。陽性參考品的成分為試劑盒覆蓋的7種陽性病原菌，由7種單菌株和4種混合菌株組成。最低檢出限參考品的成分為試劑盒覆蓋的7種陽性病原菌，由7種單菌株和3種混合菌株組成。重復(fù)性參考品為試劑盒覆蓋的7種陽性病原菌的混合菌液。試劑盒檢測結(jié)果符合質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)后才可放行使用。（二）生產(chǎn)品組成產(chǎn)品由試劑盒A、試劑盒B組成，主要組成成分見表1。表1主要組成成分組成組分名稱主要組分規(guī)格數(shù)量試劑盒A芯片引物1人份/片12片試劑盒B恒溫擴(kuò)增試劑熒光染料、酶、dNTPs420UL/管1管陽性對照品7種陽性菌核酸105UL/管1管陰性對照品1XTE105UL/管1管產(chǎn)品預(yù)期用途本產(chǎn)品本試劑盒用于定性檢測有呼吸道癥狀的住院患者痰液中7種臨床常見下呼吸道病原菌，包括：耐甲氧西林葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌。樣本類型是從疑似下呼吸道感染的住院患者痰液提取的核酸。本試劑盒適用于有呼吸道癥狀的住院患者的下呼吸道感染的輔助診斷。產(chǎn)品分類產(chǎn)品分類見表1。表1產(chǎn)品分類分類方式類型抗電擊類型抗電擊程度-密閉方式密封工作方式非連續(xù)運(yùn)行設(shè)備第第3章產(chǎn)品主要功能、性能本產(chǎn)品分析性能評估內(nèi)容主要包括：核酸提取效率、陰—7—/陽性符合率、最低檢出限、包容性、交叉反應(yīng)、干擾試驗、重復(fù)性、方法學(xué)比對等。申請人提交了有效運(yùn)行的質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的三批產(chǎn)品在適用機(jī)型iChip-400恒溫核酸擴(kuò)增分析儀上的性能評估資料。在核酸提取效率中，比較評估了產(chǎn)品配套使用的核酸提取試劑盒的提取效果,結(jié)果表明配套使用的核酸提取試劑盒的核酸提取效率滿足產(chǎn)品使用需求。在陰/陽性符合率中，申請人采用三批成品試劑盒，檢測企業(yè)陽性參考品和陰性參考品。結(jié)果表明陽性符合率和陰性符合率均為100%。在最低檢出限研究中，申請人采用三批成品試劑盒，檢測系列濃度梯度樣本，將達(dá)到95%陽性檢出率的最低濃度水平作為確定的最低檢出限，并進(jìn)行最低檢出限驗證。結(jié)果表明：耐甲氧西林葡萄球菌（20種型別）、金黃色葡萄球菌（1種型別）、大腸埃希氏菌（4種型別）、肺炎克雷伯菌（3種型別）、銅綠假單胞菌（5種型別）、鮑曼不動桿菌（2種型另U）和嗜麥芽窄食單胞菌（4種型別）的最低檢出限為5義102CFU/uL；確定耐甲氧西林葡萄球菌（2種型別）、大腸埃希氏菌（3種型別）、鮑曼不動桿菌（2種型別）的最低檢出限為2.5X102CFU/UL；大腸埃希氏菌（18種型別）最低檢出限為1X102CFU/uLo由于本試劑盒對各病原體的檢測并不是分型檢測，所以選擇該病原體不同型別檢出限濃度中—8—的最高濃度作為該指標(biāo)的最低檢出限濃度，最終確定該產(chǎn)品的最低檢出限為5X102CFU/uLo在包容性研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對標(biāo)準(zhǔn)菌株及不同型別的病原體進(jìn)行檢測。包括耐甲氧西林葡萄球菌的22種型別（SccmectypeI、SCCmecTypeII、SccmectypeIII、SCCmectypeIV、SCCmecV、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林表皮葡萄球菌、耐甲氧西林溶血葡萄球菌、耐甲氧西林腐生葡萄球菌、耐甲氧西林人葡萄球菌、耐甲氧西林施氏葡萄球菌、耐甲氧西林木糖葡萄球菌、耐甲氧西林松鼠葡萄球菌、耐甲氧西林山羊葡萄球菌、耐甲氧西林孔氏葡萄球菌、耐甲氧西林模仿葡萄球菌、耐甲氧西林克氏葡萄球菌、耐甲氧西林緩慢葡萄球菌、耐甲氧西林沃氏葡萄球菌、耐甲氧西林中間型葡萄球菌、耐甲氧西林耳葡萄球菌、耐甲氧西林解糖葡萄球菌）、肺炎克雷伯菌的3個亞種（鼻硬結(jié)亞種、肺炎亞種、臭鼻亞種）、金黃色葡萄球菌金黃亞種、大腸埃希氏菌的25種型別（出血性大腸埃希氏菌O157:H7、腸致病性大腸埃希氏菌0157、腸侵襲性大腸埃希氏菌、致瀉大腸埃希氏菌O86:K61、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌025：K19、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌O78:K80、志賀毒性大腸埃希氏菌、腸道集聚性大腸埃希氏菌、致病性大腸埃希氏菌O26:K60、致瀉大腸埃希氏菌0127:K63、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌0126:K71、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌O8:K40、腸侵襲性一9一大腸埃希氏菌028ac:K73、致瀉大腸埃希氏菌044:K74、致瀉大腸埃希氏菌055:K59、出血性大腸埃希氏菌0111:H8、腸侵襲性大腸埃希氏菌0112ac:K66腸侵襲性大腸埃希氏菌0124:K72、致瀉大腸埃希氏菌O125:K70、致瀉大腸埃希氏菌0128:K67、致瀉大腸埃希氏菌O114:K90、致瀉大腸埃希氏菌0119:K69、腸侵襲性大腸埃希氏菌0136:K78、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌06:K15、致瀉大腸埃希氏菌0142:K86）、銅綠假單胞菌的5種型別（G型、B型、L型、F型、E型）、鮑曼不動桿菌的4種型別（ST195型、ST457型、ST92型、ST75型）和嗜麥芽窄食單胞菌的4種型別（ST31型、ST4型、ST25型、ST29型）。結(jié)果表明試劑盒對標(biāo)準(zhǔn)菌株及不同型別的病原體均能正確檢出，說明試劑盒包容性良好。在交叉反應(yīng)研究中，申請人采用三批成品試劑盒，分別進(jìn)行了近源菌交叉反應(yīng)、不在試劑盒檢測范圍中的呼吸道感染相關(guān)病原體的交叉反應(yīng)。結(jié)果表明：本試劑盒與近源菌（表皮葡萄球菌、人形葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、科氏葡萄球菌科氏亞種、頭葡萄球菌頭亞種、沃氏葡萄球菌、傷口埃希氏菌、赫氏埃希氏菌、蟑螂埃希氏菌、產(chǎn)酸克雷伯氏菌、土生克雷伯氏菌、產(chǎn)氣克雷伯氏菌、施氏假單胞菌、惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌、瓊氏不動桿菌、乙酸鈣不動桿菌、洛菲不動桿菌、嗜根寡養(yǎng)單胞菌、嗜酸寡養(yǎng)單胞菌、還原亞硝酸鹽寡養(yǎng)單胞菌）不存在交叉，與其他呼吸道病原體（腺病—10—毒、人副流感2型病毒、人副流感3型病毒、呼吸道合胞病毒A型、人冠狀病毒HCoV-OC43、人冠狀病毒HCoV-HKU1、人冠狀病毒HCoV-229E、人冠狀病毒HCoV-NL63、甲型流感病毒、乙型流感病毒、肺炎支原體、百日咳桿菌、白色念珠菌、肺炎衣原體、肺孢子菌、棒狀桿菌屬、化膿性鏈球菌、流感嗜血桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、結(jié)核分枝桿菌、唾液鏈球菌、卡他莫拉菌、腦膜炎奈瑟菌）無交叉反應(yīng)。在干擾試驗中，申請人采用三批成品試劑盒，對樣本中可能含有的人基因組DNA（33ng/HL）、人全血（30%）、黏蛋白（2.5mg/mL）、阿奇霉素（8口g/mL）、頭孢克肟（9Ug/mL）、抗生素（6ng/mL莫匹羅星）、抗病毒藥物（426ng/mL扎那米韋、60mg/mL利巴韋林、7.5mg/mL奧司他韋、0.2mg/mL帕拉米韋）、鼻噴霧劑（0.3mg/mL苯福林、25ng/mL羥甲唑林、0.45%氯化鈉）進(jìn)行研究，結(jié)果表明：低于上述濃度的內(nèi)源/外源性物質(zhì)，不會對本產(chǎn)品的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。對微生物（乙酸鈣不動桿菌、屎腸球菌、奇異變形桿菌、瓊氏不動桿菌、陰溝腸桿菌、摩氏摩根菌、肺炎鏈球菌）進(jìn)行研究，結(jié)果表明：上述微生物不會對本產(chǎn)品的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。另外，申請人對正常人和非呼吸系統(tǒng)疾病患者的痰液樣本進(jìn)行檢測，確定通過嚴(yán)格控制陽性判斷值，可以較大程度上排除呼吸道定植菌對本試劑盒的潛在干擾，本試劑盒采用痰液檢測不會對疾病的診斷造成誤導(dǎo)?！?1—在重復(fù)性研究中，申請人采用三批成品試劑盒，對陰性、強(qiáng)陽、中陽和弱陽性共4個濃度樣本分別進(jìn)行連續(xù)21天的重復(fù)性檢測，評估了批內(nèi)/批間、日內(nèi)/日間、不同地點、不同儀器以及不同操作者之間的精密度。結(jié)果表明：本試劑盒的批間/批內(nèi)、日間/日內(nèi)重復(fù)性良好，且不同操作人員和不同儀器對試劑盒的檢測沒有影響。在方法學(xué)比對研究中，申請人分別用本試劑盒和已上市同類試劑盒對收集的陽性樣本進(jìn)行檢測。結(jié)果表明：兩種試劑盒對收集的陽性臨床樣本檢測結(jié)果一致性良好。本次申報產(chǎn)品僅包括1種包裝規(guī)格（12人份/盒），1種適用機(jī)型，申請人提供了三批產(chǎn)品在適用機(jī)型上的性能評估資料。第4章整機(jī)技術(shù)要求4.1環(huán)境特性表3整機(jī)環(huán)境要求工作環(huán)境條件存儲環(huán)境條件環(huán)境溫度2℃?+8℃-20℃±3相對濕度40%?80%10%?93%大氣壓86kPa?106kPa50kPa?106kPa4.2可靠性及壽命整機(jī)使用壽命：1年。軟件升級要求無。EMC設(shè)計需求無第5章適用標(biāo)準(zhǔn)該產(chǎn)品設(shè)計應(yīng)符合以下標(biāo)準(zhǔn)。表4適用標(biāo)準(zhǔn)清單GB/T191-2008包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T9969.1-2008工業(yè)產(chǎn)品使用說明書總則YY/T0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》GB9706.1-2007醫(yī)用電氣設(shè)備第一部分：安全通用要求GB/T14710-2009醫(yī)用電器環(huán)境要求及試驗方法YY0505-2012《醫(yī)用電氣設(shè)備第