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文檔簡介
臨床血液常規(guī)檢驗儀器演示文稿當前第1頁\共有69頁\編于星期三\18點優(yōu)選臨床血液常規(guī)檢驗儀器當前第2頁\共有69頁\編于星期三\18點第一節(jié)血細胞分析儀教學要求掌握血細胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測型血細胞分析儀器的檢測原理,網(wǎng)織紅細胞檢測原理,血紅蛋白檢測原理、儀器性能評價和維護。了解血細胞分析儀的分類、性能指標、常見故障和排除及進展。當前第3頁\共有69頁\編于星期三\18點第一節(jié)血細胞分析儀學習內(nèi)容一、血細胞分析儀的分型二、血細胞分析儀的檢測原理三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)四、血細胞分析儀的性能指標與評價五、血細胞分析儀的維護及常見故障六、血細胞分析儀的進展思考題當前第4頁\共有69頁\編于星期三\18點一、血細胞分析儀的分型血細胞分析儀(Bloodcellanalyzer,BCA)是指對一定體積全血內(nèi)血細胞異質(zhì)性進行自動分析的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細胞自動計數(shù)儀(ABCC)、血液學自動分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA,AHA外延過大。當前第5頁\共有69頁\編于星期三\18點一、血細胞分析儀的分型
血細胞分析儀分型按自動化程度按檢測原理按對白細胞的分類水平當前第6頁\共有69頁\編于星期三\18點二、血細胞分析儀的檢測原理(一)血細胞分析儀的細胞計數(shù)原理當前第7頁\共有69頁\編于星期三\18點
請記住哦!庫爾特(電阻抗)血細胞檢測原理二、血細胞分析儀的檢測原理當前第8頁\共有69頁\編于星期三\18點當前第9頁\共有69頁\編于星期三\18點當前第10頁\共有69頁\編于星期三\18點當前第11頁\共有69頁\編于星期三\18點(2)紅細胞和血小板檢測的直方圖二、血細胞分析儀的檢測原理當前第12頁\共有69頁\編于星期三\18點2.聯(lián)合檢測型血細胞分析儀檢測原理
二、血細胞分析儀的檢測原理當前第13頁\共有69頁\編于星期三\18點
二、血細胞分析儀的檢測原理當前第14頁\共有69頁\編于星期三\18點當前第15頁\共有69頁\編于星期三\18點體積(volume,V)電阻抗原理測定細胞體積和數(shù)量電導(dǎo)性(conductivity,C)高頻電磁探針,測量細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),細胞內(nèi)核漿比例光散射(scatter,S)細胞內(nèi)粗顆粒的光散射強度要比細顆粒更強二、血細胞分析儀的檢測原理當前第16頁\共有69頁\編于星期三\18點(3)光散射與細胞化學聯(lián)合檢測原理
這類儀器是應(yīng)用激光散射與細胞化學染色技術(shù)對白細胞進行分類計數(shù)。二、血細胞分析儀的檢測原理當前第17頁\共有69頁\編于星期三\18點高角度前向散射光:細胞核及顆粒的信息低角度前向散射光:細胞大小的信息結(jié)合細胞化學染色技術(shù)對白細胞進行分類計數(shù)二、血細胞分析儀的檢測原理當前第18頁\共有69頁\編于星期三\18點(4)電阻抗、射頻與細胞化學聯(lián)合檢測原理
這類儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細胞計數(shù)技術(shù)結(jié)合細胞化學技術(shù),通過4個不同的檢測系統(tǒng)對白細胞、幼稚細胞進行分類和計數(shù)。二、血細胞分析儀的檢測原理當前第19頁\共有69頁\編于星期三\18點
白細胞分類散射圖
聯(lián)合使用多項技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細胞化學染色)同時分析一個細胞,綜合分析實驗數(shù)據(jù),從而得出較為準確的白細胞“五分類”結(jié)果。二、血細胞分析儀的檢測原理當前第20頁\共有69頁\編于星期三\18點(5)網(wǎng)織紅細胞檢測原理網(wǎng)織紅細胞中嗜堿性物質(zhì)RNA,在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強度與RNA含量成正比用流式細胞術(shù)檢測網(wǎng)織紅細胞大小和
RNA含量及血紅蛋白的含量二、血細胞分析儀的檢測原理當前第21頁\共有69頁\編于星期三\18點網(wǎng)織紅細胞等與試劑反應(yīng)前后的變化反應(yīng)前反應(yīng)后二、血細胞分析儀的檢測原理當前第22頁\共有69頁\編于星期三\18點熒光(RNA)強度ReticulocytesPLTRBC高熒光強度低熒光強度中熒光強度WBC前向散射光(細胞大小)血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞成熟度分類二、血細胞分析儀的檢測原理當前第23頁\共有69頁\編于星期三\18點3.干式離心分層型血細胞分析儀的細胞計數(shù)原理將血液充入到含特殊試劑(抗凝劑、熒光染料)的毛細管內(nèi)專用離心機上離心,儀器根據(jù)血中各種血細胞成份的比重不同分層亦不同的原理,血細胞被吖啶橙染色后,各層細胞會有明顯的顏色差異,然后將毛細管放在特殊的判讀機上對不同細胞層進行比對定量分析計算機綜合信息處理,得到紅細胞、中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、血小板、血紅蛋白等參數(shù)。二、血細胞分析儀的檢測原理當前第24頁\共有69頁\編于星期三\18點(二)血細胞分析儀的血紅蛋白測定原理
除干式、無創(chuàng)型外,各型BCA對血紅蛋白測定都采用光電比色原理血細胞懸液中加入溶血劑后,紅細胞溶解釋放出血紅蛋白,后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物,進入血紅蛋白測試系統(tǒng)特定波長(530~550nm)下進行光電比色二、血細胞分析儀的檢測原理當前第25頁\共有69頁\編于星期三\18點
基本結(jié)構(gòu)機械系統(tǒng)電學系統(tǒng)血細胞檢測系統(tǒng)血紅蛋白測定系統(tǒng)計算機控制系統(tǒng)三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第26頁\共有69頁\編于星期三\18點
1.機械系統(tǒng)包括機械裝置(如全自動有進樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等)和真空泵,以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻,以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測區(qū)三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第27頁\共有69頁\編于星期三\18點2.電學系統(tǒng)包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動真空泵電子控制系統(tǒng),以及儀器的自動監(jiān)控、故障報警和排除等
三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第28頁\共有69頁\編于星期三\18點3.血細胞檢測系統(tǒng)國內(nèi)常用的血細胞分析儀,使用的檢測技術(shù)可分為電阻抗檢測技術(shù)和光散射檢測技術(shù)兩大類三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第29頁\共有69頁\編于星期三\18點電阻抗檢測技術(shù):由檢測器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測計數(shù)系統(tǒng)和自動補償裝置組成流式光散射檢測技術(shù):由激光光源、檢測裝置和檢測器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測計數(shù)系統(tǒng)和自動補償裝置組成三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第30頁\共有69頁\編于星期三\18點
4.血紅蛋白測定系統(tǒng)由光源、透鏡、濾光片、流動比色池和光電傳感器等組成。
5.計算機控制系統(tǒng)
三、血細胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)當前第31頁\共有69頁\編于星期三\18點四、血細胞分析儀的性能指標與評價(一)儀器的性能指標
1.測試參數(shù)
2.細胞形態(tài)學分析
3.測試速度
4.樣本量
5.工作條件與基本功能
6.技術(shù)要求
當前第32頁\共有69頁\編于星期三\18點(二)血細胞分析儀的評價ICSH公布了電子血細胞分析儀的評價方案:在細胞計數(shù)、血紅蛋白測定方面,要評價儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準確性等四、血細胞分析儀的性能指標與評價當前第33頁\共有69頁\編于星期三\18點四、血細胞分析儀的性能指標與評價(二)血細胞分析儀的評價
1.精密度
2.攜帶污染率
3.總重復(fù)性
4.線性范圍
5.標本老化
6.抗干擾性
7.白細胞分類的鑒定當前第34頁\共有69頁\編于星期三\18點(三)血細胞分析儀的校準
出廠前已經(jīng)過廠方技術(shù)鑒定合格,但由于運輸振動或因故障維修后或長時間停用后再啟用等原因,以及正常使用半年以上或認為有必要時,都必須對儀器進行調(diào)校及性能測試,這對了解儀器性能,發(fā)現(xiàn)問題,確保檢驗質(zhì)量有重要意義四、血細胞分析儀的性能指標與評價當前第35頁\共有69頁\編于星期三\18點五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除
(一)儀器的維護血細胞分析儀屬高精密儀器,應(yīng)有專人負責,按儀器廠家的的要求進行日保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)及年終的大保養(yǎng),并建立儀器保養(yǎng)和維修檔案。同時要做好:檢測器、液路和機械傳動部分的維護當前第36頁\共有69頁\編于星期三\18點(二)儀器的維護
1.檢測器的維護
①采血順利
②防止纖維絲堵孔
③關(guān)機前對檢測器的微孔進行清理沖洗
④計數(shù)期間,及時按“反沖”鍵,沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)
⑤定期卸下檢測器,用5%次氯酸鈉浸泡清洗
五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除檢測器當前第37頁\共有69頁\編于星期三\18點
2.液路的維護五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除當前第38頁\共有69頁\編于星期三\18點3.機械傳動部位的維護五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除當前第39頁\共有69頁\編于星期三\18點(三)常見故障排除有自我診斷功能,有故障發(fā)生時,內(nèi)置電腦的錯誤檢查功能顯示出“錯誤信息”,并伴有報警聲五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除當前第40頁\共有69頁\編于星期三\18點1.開機時的常見故障2.測試過程中常見的錯誤信息其中檢測器的微孔堵塞是影響檢驗結(jié)果準確性最常見的原因。根據(jù)微孔堵塞的程度,將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。五、血細胞分析儀的維護與常見故障排除(三)常見故障排除當前第41頁\共有69頁\編于星期三\18點六、血細胞分析儀的進展儀器測試原理的不斷創(chuàng)新白細胞分類的改進紅細胞和血小板計數(shù)原理的改進新血細胞分析參數(shù)的出現(xiàn)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用儀器自動化水平的提高無創(chuàng)血液分析儀的上市當前第42頁\共有69頁\編于星期三\18點紅細胞和血小板計數(shù)原理的改進二維激光散射法測定紅細胞和血小板
克服了電阻抗法在病理情況下測定MCH、MCHC結(jié)果不準及血小板計數(shù)精確性較差的缺點
六、血細胞分析儀的進展當前第43頁\共有69頁\編于星期三\18點當前第44頁\共有69頁\編于星期三\18點思考題1.BCA的概念及功能是什么?2.簡述電阻抗血細胞檢測原理。3.簡述聯(lián)合檢測型BCA白細胞分類計數(shù)的實質(zhì)和共有特點4.簡述BCA網(wǎng)織紅細胞檢測原理。5.如何對BCA進行分類?半自動與全自動BCA的主要區(qū)別?6.如何對BCA進行評價?7.電阻抗型BCA和聯(lián)合檢測型BCA的基本結(jié)構(gòu)?8.BCA的進展表現(xiàn)在哪幾個方面?9.BCA常見的堵孔原因有哪些?如何處理?10.BCA保證血小板準確計數(shù)的技術(shù)有哪些?當前第45頁\共有69頁\編于星期三\18點
第二節(jié)血液凝固分析儀教學要求掌握血凝儀的檢測原理和基本結(jié)構(gòu)熟悉半自動、全自動血凝儀的特點,血凝儀的性能評價以及各種檢測方法的優(yōu)缺點了解血凝儀的分類、臨床應(yīng)用、儀器的維護
請記住哦!當前第46頁\共有69頁\編于星期三\18點學習內(nèi)容一、概述一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測原理三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的性能評價五、血凝儀的維護六、血凝儀的臨床應(yīng)用●思考題當前第47頁\共有69頁\編于星期三\18點一、概述血液凝固分析儀(automatedcoayulationanalyzer,ACA)是采用一定分析技術(shù),對血栓與出血有關(guān)成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器在血栓/出血實驗室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀(簡稱血凝儀)當前第48頁\共有69頁\編于星期三\18點發(fā)展史1910年,Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年,Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20世紀70年代前為血凝儀的初級階段一、概述當前第49頁\共有69頁\編于星期三\18點20世紀70年代,較精確的各種自動血凝儀先后問世。其特點是,單通道、終點法的半自動血凝儀,也稱第一代產(chǎn)品20世紀80年代末,多通道、多方法與原理的半自動血凝儀相繼誕生,稱之為第二代產(chǎn)品各代血凝儀的特點一、概述當前第50頁\共有69頁\編于星期三\18點20世紀90年代以來,多通道、多方法、多功能全自動(即第三代)血凝儀不斷涌現(xiàn)一、概述當前第51頁\共有69頁\編于星期三\18點二、血凝儀的分型及特點(一)血凝儀分型按自動化程度半自動血凝儀全自動血凝儀全自動血凝工作站三者有何區(qū)別?當前第52頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理血凝儀檢測原理主要檢測方法:凝固法、底物顯色法、免疫學法、干化學法等。
彼此有何不同?當前第53頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理
血凝儀檢驗技術(shù)原理(二)底物顯色法生物化學法以底物釋放產(chǎn)色基團量的變化測定有關(guān)因子(一)凝固法生物物理法鉤狀法:纖維蛋白原——纖維蛋白——導(dǎo)電性判定終點光學法散射比濁法——凝固過程中散射光變化透射比濁法——凝固過程中吸光度變化濁度變化光度變化雙磁路磁珠法——用電磁探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點光電磁珠法——用光探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點超聲波法——超聲波衰減程度判斷終點(三)免疫學法抗原抗體直接比濁乳膠比濁散射比濁透射比濁免疫比濁當前第54頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理1.凝固法原理是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量(光、電、超聲、機械運動等)的變化,再由計算機分析所得最終結(jié)果,稱生物物理法。按測量原理分為電流法、超聲分析法、光學法和磁珠法四種。呵!是血漿凝固的變化當前第55頁\共有69頁\編于星期三\18點光學法(比濁法):是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化,導(dǎo)致光強度變化來測定相關(guān)因子
三、血凝儀的檢測原理光學法光路圖有何不同?誰優(yōu)當前第56頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理光學法血凝儀工作流程當前第57頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理纖維蛋白的形成與吸光度啊?為何在50%?當前第58頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理
磁珠法原理:是根據(jù)磁珠運動的幅度隨血漿凝固過程中黏度的增加而變化來測量凝血功能的方法。根據(jù)儀器對磁珠運動測量原理的不同,又可分為光電探測法和電磁珠探測法。
當前第59頁\共有69頁\編于星期三\18點雙磁路磁珠法原理三、血凝儀的檢測原理光電磁珠法原理可以用光檢測磁珠擺動衰減幅度用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度當前第60頁\共有69頁\編于星期三\18點光學法與磁珠法原理主要區(qū)別光學法原理:是用光探測凝固過程中血漿濁度的(吸光度)變化來判斷終點;光電磁珠法原理:是用光探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點;雙磁路磁珠法原理:是用電磁探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點。三、血凝儀的檢測原理當前第61頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理2.產(chǎn)色底物法原理:實質(zhì)為光電比色原理,是通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變化來推測所測物質(zhì)的含量和活性,也稱生物化學法
當前第62頁\共有69頁\編于星期三\18點三、血凝儀的檢測原理3.免疫學方法原理以純化的被檢物質(zhì)為抗原,制備相應(yīng)的抗體,然后利用抗原抗體反應(yīng)對被檢物進行定性或定量測定。血凝儀使用免疫比濁法當前第63頁\共有69頁\編于星期三\18點四、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)1.半自動血凝儀的基本結(jié)構(gòu)主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測系統(tǒng)(光學、磁場)及微機組成全
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