秦艽規(guī)范化炮制技術(shù)研究項目試驗研究實施方案

年4月19日秦艽規(guī)范化炮制技術(shù)研究項目試驗研究實施方案文檔僅供參考試驗研究實施方案TOC\o"1-2"\h\z\u一、項目研究內(nèi)容 2二、項目實施進度 5三、項目技術(shù)規(guī)程 5四、項目實施(工藝)記錄 19五、項目實施(檢驗)記錄 21***12月

試驗研究實施方案一、項目研究內(nèi)容(1)秦艽飲片規(guī)范化炮制環(huán)境構(gòu)建技術(shù)研究。按照<藥品(飲片)生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)>的要求,完善秦艽飲片規(guī)范化炮制硬件設(shè)施設(shè)備,健全產(chǎn)品質(zhì)量管理制度體系,對秦艽規(guī)范化炮制、質(zhì)量檢測車間、設(shè)備、空氣、水質(zhì)進行定期監(jiān)測和安全性評價,針對性地采取環(huán)境保護措施,使各項環(huán)境指標符合<藥品(飲片)生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)>和<中藥飲片GMP認證檢查評定標準>。(2)秦艽飲片規(guī)范化浸潤技術(shù)研究?！櫼蛩赜绊懺囼灐２捎门P式滾動噴霧潤藥機完成秦艽藥材浸潤。試驗因素為浸潤水量、浸潤時間,每個因素3個水平。其中浸潤水量分別選取0.15倍、0.20倍、0.25倍3個水平,浸潤時間分別選取30分鐘、40分鐘、50分鐘3個水平。共構(gòu)成(2×9=)18個試驗組合,分別測定浸潤后每1個試驗組合的秦艽飲片性狀和藥理成分含量,探討不同浸潤水量、浸潤時間對秦艽飲片性狀和藥理成分含量的影響。每個試驗組合重復(fù)3次,獲取54組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。(3)秦艽飲片規(guī)范化烘干技術(shù)研究?！诮櫼蛩赜绊懺囼灥幕A(chǔ)上,進行烘干因素影響試驗。采用立式翻轉(zhuǎn)自控烘干機完成秦艽飲片烘干。試驗因素為烘干溫度、烘干時間,每個因素3個水平。其中烘干溫度分別選取50度、60度、70度3個水平,烘干時間分別選取20分鐘、30分鐘、40分鐘3個水平。共構(gòu)成(2×9×9=)162個試驗組合,分別測定烘干后每1個試驗組合的秦艽飲片性狀和藥理成分含量,探討不同烘干溫度、烘干時間對秦艽飲片性狀和藥理成分含量的影響。每個試驗組合重復(fù)3次,獲取486組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。(4)秦艽飲片規(guī)范化包裝貯運技術(shù)研究?！诮櫼蛩赜绊懺囼灪秃娓梢蛩赜绊懺囼灥幕A(chǔ)上,進行包裝貯運因素影響試驗。采用中藥飲片標準包裝材料,運用普通包裝機、真空包裝機完成秦艽飲片包裝。試驗因素為包裝方式、貯運時間、貯運溫度,包裝方式因素設(shè)真空包裝、非真空包裝2個水平,貯運溫度因素設(shè)常溫庫、陰涼庫2個水平,貯運時間因素設(shè)3個月、6個月、12個月3個水平。共構(gòu)成(2×81×12=)1944個試驗組合,分別測定到期后每1個試驗組合的秦艽飲片性狀和藥理成分含量,探討不同包裝方式、貯運時間、貯運溫度對秦艽飲片性狀和藥理成分含量的影響。每個試驗組合重復(fù)3次,獲取5832組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。(5)秦艽飲片規(guī)范化炮制技術(shù)集成研究?！?浸潤+烘干+包裝貯運)因素影響組合試驗。在進行”烘干因素影響試驗”時,以”浸潤因素影響試驗”各試驗組合、各重復(fù)浸潤的中間產(chǎn)品為參試材料,按照二階級完成試驗組合;在進行”包裝貯運因素影響試驗”時,以”烘干因素影響試驗”各試驗組合、各重復(fù)烘干的中間產(chǎn)品為參試材料,按照三階級完成2124個試驗組合,分別測定每組合試驗后秦艽飲片性狀和藥理成分含量,每個試驗組合重復(fù)3次,獲取6372組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。運用正交旋轉(zhuǎn)回歸統(tǒng)計分析,探討不同環(huán)境因素,不同浸潤水量、浸潤時間,不同烘干溫度、烘干時間,不同包裝方式、貯運時間、貯運溫度對秦艽飲片性狀和藥理成分含量的影響。篩選、組裝配套和驗證秦艽飲片炮制最佳工藝方案,開發(fā)秦艽飲片規(guī)范化炮制技術(shù)體系。炮制工藝流程環(huán)節(jié)浸潤環(huán)節(jié)含量測定樣本個數(shù)烘干環(huán)節(jié)含量測定樣本個數(shù)包裝貯運環(huán)節(jié)含量測定樣本個數(shù)合計炮制工藝條件因素水量時間溫度時間包裝方式貯藏溫度貯藏時間炮制工藝因素水平0.15倍30分鐘150度20分鐘1真空包裝陰涼庫3個月136個月1312個月13常溫庫……35非真空包裝…………6830分鐘1………………121440分鐘1………………121460度……3………………363870度……3………………363840分鐘1…………9………………10811850分鐘1…………9………………1081180.20倍……3…………27………………3243540.25倍……3…………27………………324354單次試驗組合數(shù)9819721062單次試驗測樣本數(shù)98197210623次重復(fù)組合數(shù)27243291631863次重復(fù)樣本數(shù)2724329163186(1)標準依據(jù)(2)生產(chǎn)工藝(3)操作規(guī)程(含領(lǐng)料、凈選、浸潤、切制、烘干、篩選、包裝、入庫規(guī)程)(4)生產(chǎn)設(shè)備(5)勞動定員(6)物料平衡(7)技術(shù)安全(8)包材質(zhì)量標準(9)原藥材、中間產(chǎn)品、成品質(zhì)量標準=1\*GB3①原藥材質(zhì)量標準(含標準依據(jù)、性狀、鑒別、浸出物、含量測定)=2\*GB3②中間產(chǎn)品質(zhì)量標準(含標準依據(jù)、性狀、鑒別、浸出物、含量測定)=3\*GB3③成品質(zhì)量標準(含標準依據(jù)、性狀、鑒別、浸出物、含量測定)(1)藥品名稱(2)藥材來源(3)炮制工藝(4)產(chǎn)品性狀(5)產(chǎn)品鑒別(6)產(chǎn)品檢查(7)浸出物(8)含量測定(9)性味與歸經(jīng)(10)功能與主治(11)用法與用量(12)包裝與規(guī)格(13)貯藏條件(14)有效期二、項目實施進度1．12月～3月,完成秦艽規(guī)范化炮制環(huán)境構(gòu)建技術(shù)研究。按照<藥品(飲片)生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)>的要求,健全管理制度體系,對監(jiān)測車間、設(shè)備、空氣、水質(zhì)并進行安全性評價,針對性地采取環(huán)境保護措施,使各項環(huán)境指標符合<藥品(飲片)生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)>和<中藥飲片GMP認證檢查評定標準>。2．4月～9月,完成秦艽飲片規(guī)范化炮制技術(shù)研究第1輪(第1個重復(fù))試驗。按照”浸潤因素影響試驗”→”烘干因素影響試驗”→”包裝貯運因素影響試驗”的順序組合1062個試驗,測定每個試驗后秦艽飲片性狀和藥理成分含量,獲取1062組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。3．10月～3月,完成秦艽飲片規(guī)范化炮制技術(shù)研究第2輪(第2個重復(fù))試驗。按照”浸潤因素影響試驗”→”烘干因素影響試驗”→”包裝貯運因素影響試驗”的順序組合1062個試驗,測定每個試驗后秦艽飲片性狀和藥理成分含量,獲取1062組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。制定<寧夏秦艽飲片規(guī)范化炮制操作規(guī)程(SOP)>、<寧夏秦艽飲片質(zhì)量標準>。4．4月～9月,完成秦艽飲片規(guī)范化炮制技術(shù)研究第3輪(第3個重復(fù))試驗。按照”浸潤因素影響試驗”→”烘干因素影響試驗”→”包裝貯運因素影響試驗”的順序組合1062個試驗,測定每個試驗后秦艽飲片性狀和藥理成分含量,獲取1062組產(chǎn)品性狀和藥理成分含量數(shù)據(jù)。驗證<寧夏秦艽飲片規(guī)范化炮制操作規(guī)程(SOP)>、<寧夏秦艽飲片質(zhì)量標準>。5．10月～12月,完成<秦艽規(guī)范化炮制技術(shù)研究報告>及相關(guān)資料,申請項目組織單位組織評審、鑒定、驗收、登記成果。發(fā)表論文3篇論文。三、項目技術(shù)規(guī)程(一)試驗研究規(guī)程【工藝依據(jù)】:<中華人民共和國藥典>一部及其附錄<中藥材炮制通則>;***<中藥飲片炮制技術(shù)規(guī)程總則>、<秦艽規(guī)范化炮制試驗設(shè)計與實施方案>。【試驗操作】:依照***<試驗研究管理文件(SMP)>、<試驗研究崗位標準操作規(guī)程(SOP)>、<秦艽規(guī)范化炮制試驗設(shè)計與實施方案>及本技術(shù)規(guī)程進行。【試驗材料】:龍膽科植物秦艽(Gentianamacrophyllapall.)的烘干根(同產(chǎn)地同一批)?！竟δ苤髦巍?祛風濕,清濕熱,止痹痛。用于風濕痹痛,筋脈拘攣,骨節(jié)酸痛,日晡潮熱,小兒疳積發(fā)熱?！举A存】:基本條件——置通風烘干處;具體條件——見試驗研究技術(shù)設(shè)計。1、試驗工藝流程圖:領(lǐng)領(lǐng)料篩選包裝入庫烘干切制洗藥凈選浸潤厚度溫度、時間包裝材料2、操作過程及工藝條件2.1試驗材料:栽培于寧夏六盤山區(qū)農(nóng)耕地,生長年限為4年的龍膽科植物秦艽(Gentianamacrophyllapall.)的烘干根,其質(zhì)量性狀符合<中華人民共和國藥典>一部規(guī)定。2.1領(lǐng)料:由凈選工序的領(lǐng)料員按批實驗指令領(lǐng)取規(guī)定的數(shù)量,填寫領(lǐng)料單,核對原料檢驗報告單號。重復(fù)批次浸潤水量(倍)110.15共354個測定樣品,每個測定樣品投料250克,共需88.5公斤,領(lǐng)料90公斤。每批次樣本數(shù):(浸潤水量1×浸潤時間3(+3)×烘干溫度3×烘干時間3(+27)×包裝方式2×貯藏溫度2×貯藏時間3=[324(+30)]=354個樣)。20.20共354個測定樣品,每個測定樣品投料250克,共需88.5公斤,領(lǐng)料90公斤。30.25共354個測定樣品,每個測定樣品投料250克,共需88.5公斤,領(lǐng)料90公斤。2同13同12.2凈選:將秦艽原藥材置操作間內(nèi)揀選臺上,去凈雜質(zhì)、霉變等不符合要求的部分,按大小分開,分別置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。2.3噴洗:將凈選后的秦艽放入洗藥箱,將洗藥箱放在洗藥池內(nèi)墊板上,使用飲用水噴淋洗滌,直至沖洗干凈。以見本色、無塵土雜質(zhì)為標準,噴洗時間控制在5-10分鐘。取出分別置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。2.4浸潤:按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計>浸潤。2.4.1．分別噴淋常溫清水0.15倍、0.20倍、0.25倍。2.4.2．浸潤時間分別為30分鐘、40分鐘、50分鐘。浸潤后監(jiān)測剩余水量、藥材重量,檢測性狀質(zhì)量。置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。浸潤試驗每次重復(fù)試驗因素水平浸潤水量浸潤時間水量監(jiān)測性狀質(zhì)量檢測剩余水量浸潤后藥材重量性狀鑒別浸出物測定含量測定生物堿試驗熒光反應(yīng)0.15倍30分鐘40分鐘50分鐘0.20倍30分鐘40分鐘50分鐘0.25倍30分鐘40分鐘50分鐘2.5切制:取浸潤后的秦艽,用轉(zhuǎn)盤式切藥機切制,本品的厚片為2-4mm,調(diào)整刀與刀口的距離3mm,試切,合格后開始操作,片形應(yīng)勻稱,片厚應(yīng)均勻。置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。本工序收率93-100%。2.6烘干:按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計>,將切制后的秦艽飲片用翻板式烘干機烘干,鋪藥厚度不超過3cm。溫度分別為50℃、60℃、烘干時間為20分鐘、30分鐘、40分鐘。烘干后監(jiān)測藥材重量,檢測性狀質(zhì)量。置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。烘干溫度烘干時間烘干后藥材重量性狀鑒別浸出物測定含量測定生物堿試驗熒光反應(yīng)5020分鐘20分鐘40分鐘6020分鐘20分鐘40分鐘7020分鐘20分鐘40分鐘2.7篩選:用自動篩選機選擇適合的篩網(wǎng)篩去藥屑,揀去不合格的飲片,置周轉(zhuǎn)箱內(nèi),轉(zhuǎn)入下道工序。本工序收率90-100%。2.8包裝:按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計>包裝。2.8.1內(nèi)包.按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計在試驗標簽上印好相應(yīng)內(nèi)容,按規(guī)定分裝、封口;監(jiān)測統(tǒng)計重量;轉(zhuǎn)入下道工序。2.8.2外包.按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計>,內(nèi)包袋規(guī)格:35×25cm;外包袋規(guī)格:120×90cm包裝規(guī)格:1Kg×32袋/袋2.9貯藏:按照<秦艽規(guī)范化炮制試驗研究設(shè)計>,將經(jīng)過外包后的秦艽飲片送入成品待驗區(qū),接到合格報告單后轉(zhuǎn)入合格區(qū)入庫。貯藏條件:分別為陰涼庫、常溫庫。貯存時間:分別為3個月、6個月、12個月。包裝貯藏包裝后藥材重量性狀鑒別浸出物測定含量測定貯藏條件貯藏時間生物堿試驗熒光反應(yīng)真空包裝陰涼庫3個月6個月9個月常溫庫3個月6個月9個月普通包裝陰涼庫3個月6個月9個月常溫庫3個月6個月9個月完成貯藏時間后監(jiān)測藥材重量,檢測性狀質(zhì)量。3、參考依據(jù):<中華人民共和國藥典>一部190頁。4、設(shè)備一覽表:設(shè)備名稱規(guī)格型號設(shè)備制造企業(yè)生產(chǎn)能力洗藥池、潤藥池100-300Kg/h轉(zhuǎn)盤式切藥機QYJ-100型上海南崛中藥機械公司200-500Kg/h翻板烘干機CJGD-20型新昌縣暖通設(shè)備廠100-300Kg/h篩藥機SYJ-B上海南崛中藥機械公司180-650Kg/h5、技術(shù)安全、工藝衛(wèi)生條件及勞動保護:5.1生產(chǎn)操作前,仔細檢查電路及動力設(shè)施,排除不安全隱患。5.2不得用手觸摸機器的傳動及轉(zhuǎn)動部位,發(fā)生故障時,立即切斷電源,經(jīng)過維修人員修理。5.3壓力設(shè)備嚴禁撞擊、敲打,不準超壓、超溫。5.4車間設(shè)消火栓,滅火器定點存放,并有專人負責,操作人員都會使用滅火器。5.5各崗位職工按炮制規(guī)定穿戴好工作服、鞋、帽、口罩、手套等。5.6工藝衛(wèi)生按<炮制過程管理規(guī)程>執(zhí)行。6、物料平衡統(tǒng)計:6.1凈選工序的物料平衡值(實際值/理論值)應(yīng)為97-99%。6.2切制工序的物料平衡值(實際值/理論值)應(yīng)為98-100%。6.3篩選工序的物料平衡值(實際值/理論值)應(yīng)為93-99%。6.4內(nèi)包工序的物料平衡值(實際值/理論值)應(yīng)為99-100%。6.5產(chǎn)品物料平衡值(實際值/理論值)應(yīng)為88-100%。6.6計算公式:實際值(炮制后數(shù)量＋雜質(zhì)＋藥屑)物料平衡值%=×100%理論值(炮制前)7、包材質(zhì)量標準:(1)包裝用塑料袋質(zhì)量標準【標準依據(jù)】公司內(nèi)部規(guī)定?！静馁|(zhì)】為白色或透明的聚乙烯塑料制品;無毒\無味?！就庥^】周正平整,無漏氣、潔凈無污染?！酒茡p率】≤3%?！居∷ⅰ课淖帧D案、標志應(yīng)正確、清晰、深淺色澤一致?！疽?guī)格尺寸】長35cm,寬27cm,厚雙面0.3絲(2)包裝箱質(zhì)量標準【標準依據(jù)】中華人民共和國國家標準GB6543-86?！静馁|(zhì)】面紙應(yīng)為300g/m2瓦楞紙?！就庥^】箱體方正,表面不允許有明顯的損壞和污跡,切邊表面裂損寬度不超過8mm,破損率小于1%。【紙箱接頭】紙箱接縫的黏合劑涂布應(yīng)均勻充分,無多余的黏合劑溢出。當棉紙分離時,接縫依然粘合不分?！緣汉劬€】紙箱的壓痕線寬度,不大于17mm。折線居中,不得有破裂斷線,箱壁不允許有多余的壓痕線?！緭u蓋】紙箱搖蓋經(jīng)開、合1800往復(fù)5次以上,外面層不得有裂縫,內(nèi)面層裂縫長度總和不得大于70mm。(3)外包袋質(zhì)量標準為白色塑料編織袋,應(yīng)方正、整齊,無皺折,無污染,潔凈。規(guī)格為120×90cm。秦艽規(guī)范化炮制試驗研究包裝標簽項目編碼項目編碼與處理水平技術(shù)負責人工藝操作員完成時間成品質(zhì)量檢測處理單位水平浸潤水量性狀描述浸潤水量烘干溫度烘干時間生物堿試驗包裝方式熒光反應(yīng)貯藏溫度浸出物貯藏時間含量測定8、試驗研究崗位定員:崗位技術(shù)負責人工藝操作員定員姓名采購2凈選2浸潤2切制2烘干2篩選1包裝2貯藏1檢驗29、成品、半成品、原輔料的質(zhì)量標準及檢查方法9.1成品內(nèi)控質(zhì)量標準:【標準依據(jù)】<中國藥典>一部?！拘誀睢款悎A形薄片。表面黃棕色或灰黃色,有縱向或扭曲的縱皺紋。質(zhì)硬而脆,易折斷,切面略顯油性,皮部黃色或棕黃色,木部黃色。氣特異,味苦、微澀?！捐b別】(1)生物堿試驗:取本品粗粉2g,加三氯甲烷-甲醇-濃氨試液(75:25:5)混合液30ml,浸泡2小時,濾過,濾液置水浴上濃縮至約1ml,加1mol/L鹽酸溶液2ml,繼續(xù)蒸去三氯甲烷,放冷,濾過。取濾液分置二支試管中,一管加碘化汞鉀試液,即生成淡黃白色沉淀;另一管加碘化鉍鉀試液,即生成棕紅色沉淀。(2)熒光反應(yīng):取本品橫斷面,置紫外光燈(365nm)下觀察,顯黃白色或金黃色熒光。【浸出物】照醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法(附錄XA)測定,用乙醇作溶劑,不得少于24.2%?！竞繙y定】照高效液相色譜法(附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(1:4)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取龍膽苦苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.5g,精密稱定,加甲醇20ml,加熱回流30分鐘,放冷,濾過,濾液減壓加回收至干,殘渣用適量甲醇溶解,濾過,轉(zhuǎn)移至50ml,量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。本品按烘干品計算,含龍膽苦苷(C16H20O9)不得少于2.02%?！举A藏】置通風烘干處。9.2中間產(chǎn)品質(zhì)量參照<中間產(chǎn)品質(zhì)量標準通則>:凈選:去凈非藥用部分,無碎屑、無雜質(zhì),無泥沙。洗制:見本色,以徹底洗凈藥材表面及隱藏部位的泥沙雜質(zhì)為標準。潤制:外觀應(yīng)藥透水盡,質(zhì)地松軟適中。便于保持有效成分和利于切制。切制:應(yīng)切面整齊,外形勻稱。飲片切制規(guī)格在規(guī)定的范圍之內(nèi)。烘干:干濕度均勻,保持固有色澤。篩選:篩選后的飲片應(yīng)無異形片及藥屑。9.3原藥材質(zhì)量標準【標準依據(jù)】<中華人民共和國藥典>一部190頁。本品為龍膽科植物秦艽(GentianamacrophyllaPall.)的烘干根。春、秋二季采挖,除去泥沙;秦艽及麻花艽曬軟,堆置”發(fā)汗”至表面呈紅黃色或灰黃色時,攤開曬干,或不經(jīng)”發(fā)汗”直接曬干;小秦艽趁鮮時搓去黑皮,曬干?！拘誀睢壳剀?Gentianamacrophyllapall.)呈類圓柱形,上粗下細,扭曲不直,長10～30cm,直徑1～3cm。表面黃棕色或灰黃色,有縱向或扭曲的縱皺紋。頂端有殘存莖基及纖維狀葉鞘。質(zhì)硬而脆,易折斷,斷面柔潤,皮部黃色或棕黃色,木部黃色。氣特異,味苦、微澀?！捐b別】(1)取本品粗粉2g,加三氯甲烷－甲醇－濃氨試液(75∶25∶5)混合液30ml,浸泡2小時,濾過,濾液置水浴上濃縮至約1ml,加1mol/L鹽酸溶液2ml,繼續(xù)蒸去三氯甲烷,放冷,濾過。取濾液分置二支試管中,一管加碘化汞鉀試液,即生成淡黃白色沉淀;另一管加碘化鉍鉀試液,即生成棕紅色沉淀。(2)取本品橫斷面,置紫外光燈(365nm)下觀察,顯黃白色或金黃色熒光?！窘鑫铩空沾冀鑫餃y定法項下的熱浸法(附錄ⅩA)測定,用乙醇作溶劑,不得少于24.0%?！竞繙y定】按照高效液相色譜法(附錄ⅥD)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇－水(1∶4)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取龍膽苦苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.5g,精密稱定,加甲醇20ml,加熱回流30分鐘,放冷,濾過,濾液減壓回收至干,殘渣用適量甲醇溶解,濾過,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。本品按烘干品計算,含龍膽苦苷(C16H20O9)不得少于2.0%。【炮制】除去雜質(zhì),洗凈,潤透,切厚片,曬干?！拘晕杜c歸經(jīng)】辛、苦,平。歸胃、肝、膽經(jīng)。【功能與主治】祛風濕,清濕熱,止痹痛。用于風濕痹痛,筋脈拘攣,骨節(jié)煩痛,日晡潮熱,小兒疳積發(fā)熱。【用法與用量】3～9g?！举A藏】置通風烘干處。

(二)原料檢驗技術(shù)規(guī)程1.目的:建立秦艽(Gentianamacrophyllapall.)檢驗標準操作規(guī)程,為操作過程規(guī)范化提供依據(jù)。2.職責:化驗員。3.范圍:適用于秦艽原藥材檢驗。4.內(nèi)容:4.1．性狀及其判定4.1.1．性狀:秦艽呈類圓柱形,上粗下細,扭曲不直,長10～30cm,直徑1～3cm。表面黃棕色或灰黃色,有縱向或扭曲的縱皺紋,頂端有殘存莖基及纖維狀葉鞘。質(zhì)硬而脆,易折斷,斷面柔潤,皮部黃色或棕黃色,木部黃色。氣特異,味苦、微澀。4.1.2．4.2．理化鑒別4.2.1．儀器、器皿、設(shè)備:4.2.2.試劑及配制:4.2.3.操作方法及結(jié)果判定4.2.3.1.生物堿試驗:取本品粗粉2g4.2.3.2.熒光反應(yīng):4.3．浸出物4.3.1．操作方法:按<浸出物測定標準操作規(guī)程>項下的醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法測定,用乙醇作溶劑。4.3.2．判定:若浸出物不少于24.0％,則判符合規(guī)定;若少于24.0%,則判不符合規(guī)定。4.4．含量測定4.4.1．原理:高效液相色譜法4.4.2．龍膽苦苷含量測定4.4.2.1．儀器、器皿、設(shè)備:電光分析天平電子天平高壓恒流泵紫外可變波長檢測器數(shù)據(jù)處理器三號篩量筒50ml長柄漏斗蒸發(fā)皿減壓烘干器量瓶5ml、50ml移液管1ml試劑瓶微量進樣器5μl微孔濾膜0.45μm電子恒溫水浴鍋電動粉碎機恒溫烘干箱。4.4.2.2．試劑及配制:甲醇4.4.2.3．色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(1:4)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。4.4.2.4．操作方法4.4.2.4.1．對照品溶液的制備:精密稱取龍膽苦苷對照品適量,加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液,即得。4.4.2.4.2．供試品溶液的制備:取本品粉末［過三號篩］約0.5g精密稱定,加甲醇20ml,加熱回流30分鐘,放冷,濾過,濾液減壓回收至干,殘渣用適量甲醇溶解,濾過,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取lml,置5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。4.4.2.4.3測定:按<高效液相色譜標準操作規(guī)程>分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1,注入液相色譜儀,測定,即得。4.4.2.5．計算公式A1×C(mg/ml)B2龍膽苦苷含量(%)=W(g)VA1:樣品峰面積;A2:對照品峰面積;C:對照品濃度;W:取樣量;V:定容量。4.4.2.6．判定:若本品按烘干品計算,含龍膽苦苷(C16H20O9)不得少于2.0％,則判符合規(guī)定;若少于2.0%,則判不符合規(guī)定。

(三)(半)成品檢驗規(guī)程1.目的:建立秦艽(Gentianamacrophyllapall.)片檢驗標準操作規(guī)程,使操作過程規(guī)范化。2.職責:化驗員。3.范圍:適用于秦艽片成品檢驗。4.內(nèi)容:4.1．性狀及其判定4.1.1.性狀:4.1.2.4.2．理化鑒別4.2.1.儀器、器皿、設(shè)備:紫外燈刀片扭力天平量筒50ml具塞錐形瓶漏斗吸管2ml試管水浴鍋電阻爐4.2.2.試劑及配制:三氯甲烷甲醇濃氨試液lmol/L鹽酸溶液2ml碘化汞鉀試液碘化鉍鉀試液4.2.3.操作方法及結(jié)果判定4.2.3.1.生物堿試驗:取本品粗粉2g4.2.3.2.熒光反應(yīng):4.3浸出物4.3.1操作方法:按<浸出物測定標準操作規(guī)程>項下的醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法測定,用乙醇作溶劑。4.3.2判定:若浸出物不少于24.0％,則判符合規(guī)定;若少于24.0%,則判不符合規(guī)定。4.4含量測定4.4.1原理:高效液相色譜法4.4.2內(nèi)容:龍膽苦苷含量測定4.4.2.1儀器、器皿、設(shè)備:電光分析天平電子天平高壓恒流泵紫外可變波長檢測器數(shù)據(jù)處理器三號篩量筒50ml長柄漏斗蒸發(fā)皿減壓烘干器量瓶5ml、50ml移液管1ml試劑瓶微量進樣器5μl微孔濾膜0.45μm電子恒溫水浴鍋電動粉碎機恒溫烘干箱4.4.2.2試劑及配制:甲醇4.4.2.3色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(1:4)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。4.4.2.4操作方法4.4.2.4.1對照品溶液的制備:精密稱取龍膽苦苷對照品適量,加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液,即得。4.4.2.4.2供試品溶液的制備:取本品粉末［過三號篩］約0.5g精密稱定,加甲醇20ml,加熱回流30分鐘,放冷,濾過,濾液減壓回收至干,殘渣用適量甲醇溶解,濾過,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取lml,置5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。4.4.2.4.3．龍膽苦苷含量測定:按<高效液相色譜標準操作規(guī)程>分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1,注入液相色譜儀,測定,即得。4.4.2.5計算公式1A1×C(mg/ml)B2龍膽苦苷含量(%)=W(g)VA1:樣品峰面積;A2:對照品峰面積;C:對照品濃度;W:取樣量;V:定容量。4.4.2.6判定:若本品按烘干品計算,含龍膽苦苷(C16H20O9)不得少于2.0％,則判符合規(guī)定;若少于2.0%,則判不符合規(guī)定。

四、項目實施(工藝)記錄科技創(chuàng)新基金項目秦艽規(guī)范化炮制試驗研究工藝記錄(1)樣本編碼重復(fù)浸潤烘干包裝方式貯藏時間負責人水量時間溫度時間次(倍)(分)(度)(分)凈選操作要點:挑揀、沖洗干凈。操作人:復(fù)核人:年月日開始時間:時分凈選前數(shù)量kg件結(jié)束時間:時分凈選后數(shù)量kg件浸潤操作要點:按<試驗方案>控制浸潤水量與時間。操作人:復(fù)核人:年月日開始時間:時分加水量:kg(倍)結(jié)束時間:時分余水量:kg(倍)浸潤前數(shù)量:kg件浸潤后數(shù)量:kg件性狀質(zhì)量性狀生物堿試驗熒光反應(yīng)浸出物含量測定檢驗記錄編號()/檢驗報告編號()QA質(zhì)檢員:年月日切制切制設(shè)備:運行情況:切制規(guī)格:mm操作人:復(fù)核人:年月日切制前數(shù)量:kg件切制后數(shù)量:kg件切制始時間:時分切制終時間:時分藥屑量:kg收率%烘干操作要點:裝料厚度3--5cm;按<試驗方案>控制烘干溫度與時間。操作人:復(fù)核人:年月日烘干設(shè)備:運行情況:烘干前數(shù)量:kg件烘干后數(shù)量:kg件預(yù)熱時間:時分溫度顯示范圍:℃至℃生產(chǎn)后數(shù)量:kg生產(chǎn)后件數(shù):件烘干開始:時分烘干結(jié)束:時分性狀質(zhì)量性狀生物堿試驗熒光反應(yīng)浸出物含量測定檢驗記錄編號()/檢驗報告編號()QA質(zhì)檢員:年月日科技創(chuàng)新基金項目秦艽規(guī)范化炮制試驗研究工藝記錄(2)樣本編碼重復(fù)浸潤烘干包裝方式貯藏時間負責人水量時間溫度時間次(倍)(分)(度)(分)內(nèi)包裝操作要點:按<試驗方案>控制包裝方式與規(guī)格。操作人:復(fù)核人:年月日領(lǐng)取包裝袋:個實用包裝袋:個開始時間:時分包裝方式:(真空、普通)結(jié)束時間:時分包裝規(guī)格:(克)包裝前數(shù)量:kg件包裝后數(shù)量:kg件檢驗記錄編號()/檢驗報告編號()QA質(zhì)檢員:年月日外包裝操作要點:按<試驗方案>控制包裝方式與規(guī)格。操作人:復(fù)核人:年月日領(lǐng)取包裝袋:個實用包裝袋:個開始時間:時分包裝方式:(真空、普通)結(jié)束時間:時分包裝規(guī)格:(克)包裝前數(shù)量:kg件包裝后數(shù)量:kg件檢驗記錄編號()/檢驗報告編號()QA質(zhì)檢員:年月日第頁/共頁

五、項目實施(檢驗)記錄(原料)檢驗原始記錄(編號:)()樣本編碼________重復(fù)次數(shù)________________________代表量________取樣日期______________取樣量__________檢驗項目________檢驗依據(jù)______________檢驗日期__________項目操作結(jié)果性狀呈類圓柱形,上粗下細,扭曲不直,長10～30cm,直徑1～3cm。表面黃棕色或灰黃色,有縱向或扭曲的縱皺紋。頂端有殘存莖基及纖維狀葉鞘。質(zhì)硬而脆,易折斷,斷面柔潤,皮部黃色或棕黃色,木部黃色。氣特異,味苦、微澀。鑒別生物堿試驗取本品粗粉2g,加三氯甲烷－甲醇－濃氨試液(75∶25∶5)混合液30ml,浸泡2小時,濾過,濾液置水浴上濃縮至約1ml,加1mol/L鹽酸溶液2ml,繼續(xù)蒸去三氯甲烷,放冷,濾過。取濾液分置二支試管中,一管加碘化汞鉀試液,即生成淡黃白色沉淀;另一管加碘化鉍鉀試液,即生成棕紅色沉淀。熒光反應(yīng)取本品橫斷面,置紫外光燈(365nm)下觀察,顯黃白色或金黃色熒光。浸出物照醇浸出物測定法項下的熱浸法(附錄ⅩA)測定,用乙醇作溶劑,不得少于24.0%。含量測定按照高效液相色譜法(附錄ⅥD)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇－水(1∶4)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按龍膽苦苷峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取龍膽苦苷對照品適量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.5g,精密稱定,加甲醇20ml,加熱回流30分鐘,放冷,濾過,濾液減壓回收至干,殘渣用適量甲醇溶解,濾過,轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取1ml,置5ml量瓶中,加甲