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微生物與外界環(huán)境第一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六教學(xué)目標(biāo)1、熟悉細(xì)菌在正常微生物群和條件致病微生物的概念2、掌握消毒、滅菌、防腐、無菌操作的概念以及區(qū)別3、掌握常用消毒滅菌方法第二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第一節(jié)消毒與滅菌1、消毒:殺死物體上病原微生物的方法。(不包括細(xì)菌芽胞)消毒劑:用以消毒的化學(xué)藥物。一般常用濃度,只對繁殖體有效。2、滅菌:殺滅物體上所有微生物的方法。(包括細(xì)菌的芽孢)第三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六3、無菌:物體上沒有活的微生物存在。無菌操作:防止微生物進(jìn)入機(jī)體或物體的操作技術(shù)。-外科手術(shù)、醫(yī)療技術(shù)操作及微生物實(shí)驗(yàn)過程等均需嚴(yán)格的無菌操作。4、抑菌:抑制人體內(nèi)部或外部微生物生長繁殖的方法,第四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六5、防腐:防止或抑制微生物生長繁殖的方法。防腐劑:用于防腐的化學(xué)藥物。用于延長生物制品及口服制品的保存期。許多化學(xué)制劑在低濃度時(shí)防腐劑,在高濃度時(shí)則為消毒劑。第五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六消毒、滅菌的方法一般可分為:物理學(xué)方法熱力滅菌法紫外線與電離輻射滅菌法濾過除菌法化學(xué)方法第六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六一、物理消毒滅菌法(一)熱力滅菌法濕熱滅菌法1)高壓蒸氣法2)煮沸法3)流通蒸氣法4)5)干熱滅菌法6)焚燒法7)燒灼法8)干烤法巴氏消毒法間歇滅菌法第七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六分濕熱和干熱同一溫度下,濕熱滅菌效果比干熱好。原因:①穿透力強(qiáng),較快提高滅菌物品內(nèi)部溫度;②易吸收水分,使菌體蛋白質(zhì)易于凝固變性。③熱蒸汽接觸被滅菌物品時(shí)變?yōu)橐簯B(tài),可放出大量潛熱,能迅速提高滅菌物品的溫度。第八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六1、濕熱滅菌法:(1)高壓蒸汽滅菌法:最常用、最有效密閉的蒸汽鍋技術(shù)參術(shù):壓力103.4kPa(1.05kg/c㎡),溫度可達(dá)121.3℃經(jīng)15-30分鐘,殺死所有細(xì)菌繁殖體和芽胞。用途:耐高溫、不怕潮濕的物品--手術(shù)器械、敷料、一般培養(yǎng)基等。要求:須將鍋內(nèi)冷空氣排盡,物品不宜放置緊密。第九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(2)煮沸法:水溫100℃5分鐘殺死細(xì)菌繁殖體。殺滅芽胞需煮沸1-3小時(shí)。若在水中加入2%碳酸氫鈉,可提高沸點(diǎn)105℃,優(yōu)點(diǎn):促進(jìn)殺滅芽胞,防止金屬器械生銹。高原每海拔增加300m,應(yīng)延長2分鐘。用途:食具、刀剪、注射器、生理鹽水等消毒。第十頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(3)流通蒸汽法:蒸籠或阿諾蒸鍋溫度≦100℃,15-20分鐘可殺死細(xì)菌繁殖體。間歇滅菌法:把流通蒸汽加熱的物品放置37℃孵箱過夜,芽胞→繁殖體,次日再經(jīng)流通蒸汽加熱,如此重復(fù)3次,達(dá)到滅菌目的。用途:不耐高溫的營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基滅菌、外科器械、注射器、食具等。第十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(4)巴氏消毒法:用較低溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物,延長食品的貯存時(shí)間,不影響營養(yǎng)成分及香味。溫度:61.1-62.8℃30分鐘或71.7℃15-30秒.用途:不耐高溫食品---牛奶、酒類、飲料等。第十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六2、干熱滅菌法:通過脫水干燥和使大分子變性的作用進(jìn)行滅菌。(1)焚燒與燒灼:廢棄的物品或尸體實(shí)驗(yàn)用的接種環(huán)、試管口、瓶口等可通過火焰燒酌滅菌。(2)干烤:用電熱干烤箱滅菌,通常加熱至160-170℃維持2小時(shí),可達(dá)到滅菌的目的。用途:高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品--玻璃、瓷器。第十四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第十五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第十六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(二)紫外線與電離輻射滅菌法1、日光與紫外線:日曬是有效的殺菌方法,殺菌作用主要靠紫外線。波長在200-300nm時(shí),具有殺菌作用,其中以265-266nm殺菌力量最強(qiáng)。(此波長與DNA吸收波峰一致,易被細(xì)菌DNA吸收,干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致細(xì)菌的死亡或變異。)第十七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六缺點(diǎn):穿透力弱,玻璃、紙張、塵埃等均能阻擋紫外線。用途:手術(shù)室、病房、實(shí)驗(yàn)室等的空氣消毒及物品的表面消毒。人工紫外線燈,2-3米,1-2小時(shí)。注意:對人體皮膚、眼睛有損傷作用。第十八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六2、電離輻射:包括高速電子、X射線和γ射線等。機(jī)理:足夠劑量時(shí),輻射粒子與某些分子撞擊后,可激發(fā)這些分子產(chǎn)生離子或其他活性分子和游離基,破壞DNA。用途:一次性醫(yī)用塑料制品。也可用于食品的消毒,而不破壞營養(yǎng)成分。3、微波:波長為1mm-1m左右多用于非金屬器械、食品用具及其他用品的消毒。第十九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(三)濾過除菌法是用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌去除,達(dá)到無菌的目的。用途:不耐高溫的血清、毒素、抗生素、藥液等的除菌?,F(xiàn)代醫(yī)院的手術(shù)室、燒傷病房及無菌制劑室,已逐步采用高效顆??諝鉃V器以除去空氣中直徑小于0.3μm的微粒,保持室內(nèi)無菌環(huán)境。第二十頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(四)超聲波殺菌法不被人耳感受的高于20000Hz的聲波稱為超聲波。G-更為敏感主要用于粉碎細(xì)胞,制備抗原第二十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(五)干燥與低溫滅菌法有些細(xì)菌的繁殖體在空氣干燥時(shí)會很快死亡,如腦膜炎奈瑟菌等。干燥法通常用于保存食物,如濃鹽或糖漬食品。低溫可以使細(xì)菌的新陳代謝減慢,常用作報(bào)存細(xì)菌菌種。在低溫狀態(tài)下真空抽去水分,此法稱為冷凍真空干燥法。第二十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六二、化學(xué)消毒滅菌法(一)化學(xué)消毒劑的種類、性質(zhì)與用途消毒劑對細(xì)菌和人體細(xì)胞都有毒性作用用途:人體體表和醫(yī)療器械、周圍環(huán)境的消毒。常用化學(xué)藥物的種類有:第二十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第二十四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六第二十五頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六常用消毒劑的選用:第二十六頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(二)常用消毒劑的作用機(jī)制第二十七頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(三)影響消毒滅菌效果的因素1、消毒劑的性質(zhì)、濃度、和作用時(shí)間理化性質(zhì)不同,對微生物的作用大小也不同。表面活性劑對G+菌的殺菌效果要比對G-菌強(qiáng)。一般:濃度越高,作用時(shí)間越長,消毒效果愈強(qiáng)(醇類例外)。第二十八頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六2、細(xì)菌的種類、數(shù)量、與狀態(tài)芽胞比繁殖體抵抗力強(qiáng);有莢膜的細(xì)菌抵抗力強(qiáng);幼齡菌比老齡菌對消毒劑敏感;數(shù)量越大,所需消毒時(shí)間越長。第二十九頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六3、環(huán)境因素的影響:病原菌隨同排泄物、分泌物一起存在,對細(xì)菌有保護(hù)作用,并與消毒劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng),影響消毒效果。4、溫度和酸堿度升高溫度可提高消毒劑的殺菌效果,如2%戊二醛殺滅104個(gè)/炭疽芽胞桿菌,20℃時(shí)需15分鐘;40℃時(shí)需要2分鐘。。第三十頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六PH影響:戊二醛本身呈中性,其水溶液呈弱酸性,不具有殺芽胞的作用,只有在加入碳酸氫鈉后才能發(fā)揮殺菌作用。其他影響因素:濕度、穿透力及拮抗物質(zhì)等第三十一頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(四)防腐劑低濃度的消毒劑可作防腐劑。在生物制品中,如疫苗、類毒素等常加入防腐劑,以防雜菌生長。常用:0.01%硫柳汞、0.5%苯酚、0.1-0.2%甲醛等。第三十二頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六一、正常微生物群及生理作用(一)正常微生物群正常人體的體表及與外界相通的腔道粘膜上存在著不同種類和一定數(shù)量的細(xì)菌,通常對人體是無害的,稱為正常菌群。第二節(jié)正常微生物群與微生態(tài)平衡第三十三頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六(二)正常菌群的生理意義1、生物拮抗作用:競爭營養(yǎng)、產(chǎn)生細(xì)菌素等方式拮抗病原菌,構(gòu)成防止外來細(xì)菌侵入與定居的生物屏障。2、營養(yǎng)作用:參與物質(zhì)代謝、營養(yǎng)轉(zhuǎn)化和合成。有的能合成宿主所必須的維生素。第三十四頁,共三十六頁,編輯于2023年,星期六3、免疫作用:有免疫原性、促免疫細(xì)胞分裂作用,刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體,促進(jìn)機(jī)體免疫系統(tǒng)的發(fā)育和成熟
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