血栓與止血檢驗的臨床應(yīng)用詳解演示文稿

血栓與止血檢驗的臨床應(yīng)用詳解演示文稿當(dāng)前第1頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)（優(yōu)選）血栓與止血檢驗的臨床應(yīng)用當(dāng)前第2頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)（一）血管壁檢測圖1血管壁促凝和抗凝功能示意圖抑制過程激活過程當(dāng)前第3頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義BTvWF:AgvWF:ATM:AET-16-K-PGF1αDM-6-K-PGF1α延長示血管壁異常,PLT量/質(zhì)異常釋放增多示血管壁/血小板損傷同上內(nèi)皮細(xì)胞損傷,抗凝作用內(nèi)皮細(xì)胞損傷,縮血管作用內(nèi)皮細(xì)胞損傷,抗凝作用同上人工法ELISA膠乳法發(fā)色底物法ELISAELISAELISA2.5~9.5min107.5±29.6%50%~150%100%±13%<5ng/L17.9±7.2pg/mL尿50±11pg/mgCr血管壁、血小板異?！ú　齰WD同上↓血栓病↑血栓病↓血栓病↓血栓病表1血管壁檢測注：BT，出血時間；vWF:Ag，血管性血友病因子抗原；vWF:A，血管性血友病因子活性；TM：A，凝血酶調(diào)節(jié)蛋白活性；ET-1，內(nèi)皮素-1；6-K-PGF1α，6-酮-前列腺素F1α；DM-6-K-PGF1α，去甲基-6-酮-前列腺素F1α當(dāng)前第4頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)圖2血小板功能示意圖ADP:二磷酸腺苷;PAF:血小板活化因子;TXA2:血栓素A2;vWF:血管性血友病因子;GPⅠb,GPⅡb/Ⅲa:膜糖蛋白Ⅰb,Ⅱb/Ⅲa;R:受體;TS:血栓素合成酶;PGG2:前列腺素G2;PGH2:前列腺素H2;CO:環(huán)氧化酶;PLA2:磷脂酶A2;PL:磷脂;ATP:三磷酸腺苷;5-HT:5-羥色胺;β-TG:β-血小板球蛋白;PF4:血小板第4因子;PDGF:血小板源性生長因子;TSP:凝血酶敏感蛋白;Fg:纖維蛋白原;FⅤ:因子Ⅴ（二）血小板檢測當(dāng)前第5頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義PLTPAIgPAdTPAgTPLT量的異常血小板破壞增多血小板粘附功能的改變血小板聚集功能的改變血液分析儀法顯微鏡計數(shù)法ELISA玻珠柱法比濁法（100~300）×109/L（0~78.8）ng/107血小板（62.5±8.6)%ADP11.2μmol/L:70%±17%;腎上腺素5.4μmol/L:65%±20%;花生四烯酸20g/L:69%±13%;瑞斯托霉素1.5g/L:67%±9%↓AA,ITP,脾亢↑原發(fā)性/繼發(fā)性↑免疫相關(guān)性血小板減少↓vWD,血小板無力癥↑血栓前狀態(tài),血栓病↓血小板無力癥,抗血小板藥↑血栓前狀態(tài),血栓病表2血小板檢測注：PLT，血小板計數(shù)；PAIg，血小板相關(guān)抗體；PAdT，血小板粘附試驗；PAgT，血小板聚集試驗當(dāng)前第6頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義P-選擇素PPACRTTXB2DM-TXB211-DH-TXB2血小板活化PLT凝血異常PLT量/質(zhì)異常血小板活化同上同上放射免疫法流式細(xì)胞術(shù)定量法ELISA酶標(biāo)法酶標(biāo)法(1.61%±0.72)×1010分子數(shù)/ml正常人血小板表面上的磷酸酰絲氨酸陽性率為30%血塊收縮率為48%~64%76.3±48.1ng/L尿206±19ng/L肌酐尿299±20ng/L肌酐↑血栓病↓血小板無力癥,抗血小板藥;↑血栓前狀態(tài),血栓病↓ITP,低纖維蛋白原血癥↑因子ⅩⅢ缺乏癥↓環(huán)氧酶或血栓烷合成酶缺乏或受抑制；↑血栓病同上同上表2血小板檢測注：PPA，血小板促凝活性；CRT，血塊收縮試驗；TXB2，血栓烷B2；DM-TXB2，去二甲基-血栓素B2；11-DH-TXB2，11-去氫-血栓素B2當(dāng)前第7頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)轉(zhuǎn)化激活抑制抗凝血酶抑制位點(diǎn)纖維蛋白肽A/BCa2+fibrinⅩⅢaⅩⅢ可溶性纖維蛋白單體FMFbgTM-Ⅱa蛋白C活化蛋白（蛋白S）凝血酶VaⅩⅩa組織因子途徑抑制物Ⅹa凝血酶原蛋白C抑制物Ⅶ/Ⅶa-組織因子-Ca2+ⅪaⅨaⅨⅧa圖3凝血機(jī)制示意圖Ⅺ（三）凝血系統(tǒng)檢測當(dāng)前第8頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義CTAPTTPTFg內(nèi)源凝血系統(tǒng)活性內(nèi)源凝血系統(tǒng)活性外源凝血系統(tǒng)活性反映纖溶活性玻璃試管法塑料試管法凝固法凝固法凝血酶法5~12min10~20min比正常對照值延長10s比正常對照值延長3s2~4g/L↑凝血因子缺乏同上,監(jiān)測肝素同上，監(jiān)測口服抗凝劑↓纖溶亢進(jìn)↑血栓病表3凝血系統(tǒng)檢測注：CT，全血凝固時間；APTT，活化部分凝血活酶時間；PT，血漿凝血酶原時間；Fg，血漿纖維蛋白原當(dāng)前第9頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義FⅧ:CFⅨ:CFPAF1+2TFsFMC內(nèi)源凝血活性內(nèi)源凝血活性反映凝血酶生成反映凝血酶原酶活性組織、內(nèi)皮細(xì)胞損傷,外源凝血激活反映凝血酶活性一期法一期法ELISAELISAELISAELISA103.0±25.7%91.8±30.4%1.83±0.61μg/L0.4~1.1nmol/L<10pg/ml48.5±15.6mg/l↑血栓病;↓血友病A,vWD↑血栓病;↓血友病B↑凝血酶生成增多,血栓病↑血栓病↑引起組織或內(nèi)皮損傷,血栓病↑血栓病,凝血功能增強(qiáng)表3凝血系統(tǒng)檢測注：FⅧ:C，凝血因子Ⅷ活性；FⅨ:C，凝血因子Ⅸ活性；FPA，纖維蛋白肽A；F1+2，凝血酶原片段1+2；TF，組織因子；sFMC，可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物當(dāng)前第10頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)SCATⅡa凝血酶調(diào)節(jié)蛋白Ⅱa硫酸乙酰肝素ATⅡaAPC蛋白C肽

ⅤaⅧaⅨaⅧaCa2+磷脂F(xiàn)gFPA纖維蛋白PAI-1抑制滅活ⅩaF1.2Ⅹa肽ⅩⅤaⅡⅩaCa2+圖4抗凝血系統(tǒng)示意圖（四）抗凝血系統(tǒng)檢測當(dāng)前第11頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義TT甲苯胺藍(lán)糾正試驗ACLALEA反映FDP生成和抗凝作用糾正類肝素影響依賴磷脂的凝血因子或抗凝蛋白同上凝固法ELISALupo試驗Lucor試驗Lupo/Lucor16~18sTT縮短>5sIgG≤26%IgM≤21%IgA≤25%33~44s30~38s1.0~1.2↑纖溶亢進(jìn),存在抗凝物質(zhì),監(jiān)測溶栓治療類肝素物質(zhì)↑動/靜脈血栓,自發(fā)性流產(chǎn),血小板減少等同上表4抗凝血系統(tǒng)檢測注：TT，凝血酶時間；ACLA，抗心磷脂抗體；LEA，狼瘡抗凝物質(zhì)當(dāng)前第12頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義AT:AgAT:APC:ATPS/FPSTFPI:ATAT滅活凝血酶同上生成APC滅活FⅤa、FⅧaPC輔因子抑制外源凝血途徑凝血酶大量生成ELISA發(fā)色底物法發(fā)色底物法免疫火箭電泳法發(fā)色底物法ELISA0.29±0.03g/L108.5±5.3%64%~147%TPS（96.6±9.8)%FPS(100.9±11.6)%1.16±0.19U/ml1.45±0.4μg/L↓血栓病,DIC,肝腎疾病同上↓先天性/獲得性PC缺陷癥↓血栓病↓先天性/獲得性PS缺陷癥↓血栓病多為獲得性缺乏↑血栓病表4抗凝血系統(tǒng)檢測注：AT:Ag，抗凝血酶抗原；AT:A，抗凝血酶活性；PC:A，蛋白C活性；TPS/FPS，總蛋白S/游離蛋白S；TFPI:A，組織因子途徑抑制物活性；TAT，凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物當(dāng)前第13頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)（五）纖溶血系統(tǒng)檢測圖5纖溶系統(tǒng)示意圖scu-PA:單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑;tcu-PA:雙鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑;PAI-1:纖溶酶原激活抑制劑-1;PAI-2:纖溶酶原激活抑制劑-2;PK:激肽釋放酶原;K:激肽釋放酶;HMWK:高分子量激肽原纖溶酶sct-PAscu-PAPKFⅫa,HMWKKPAI-1PAI-2tcu-PAtct-PA纖溶酶原α2-抗纖溶酶,α2-巨球蛋白鏈激酶,尿激酶纖維蛋白原降解產(chǎn)物X、Y、D、E、Bβ1-42,A,B,C,H凝血酶纖維蛋白肽A/纖維蛋白肽B因子ⅩⅢa可溶性纖維蛋白單體纖維蛋白X’、Y’、D、E’、Bβ15-42,A,B,C,H纖溶酶纖溶酶X’、Y’、D、E’、D-D,DDE,DXD,DY,YY活化補(bǔ)體-1抑制物當(dāng)前第14頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)試驗名稱病理生理檢測方法參考范圍臨床意義ELTt-PA:APLG:APAI-1:Aα2-AP:AFDPD-DPAPTAFI纖溶總活性增多纖溶活化t-PA/u-PA激活底物抑制t-PA/u-PA活性纖溶抑制劑纖溶激活纖溶激活隨PL增加而增多PL抑制物生化法發(fā)色底物法發(fā)色底物法發(fā)色底物法發(fā)色底物法ELISAELISAELISAELISA>120min0.3~0.6U/ml85.55%~27.83%0.1~1AU/ml95.6±12.8%血FDP≤5μg/L0~0.256mg/L0~150μg/L14~34μg/L<70min纖溶亢進(jìn)↑原發(fā)性/繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↓原發(fā)性/繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↓原發(fā)性/繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↓纖溶亢進(jìn)↑原發(fā)性/繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↑原發(fā)性纖溶亢進(jìn)↑纖溶亢進(jìn)↓纖溶亢進(jìn)表5纖溶系統(tǒng)檢測注：ELT,優(yōu)球蛋白溶解試驗;t-PA:A,組織型纖溶酶原激活劑活性;PLG:A,纖溶酶原活性;PAI-1:A,血漿纖溶酶原激活物抑制劑活性;α2-AP:A,α2-抗纖溶酶抑制物活性;FDP,纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物;D-D,D-二聚體;PAP,纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物;TAFI，凝血酶激活纖溶抑制物當(dāng)前第15頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)二、血栓與止血檢測的應(yīng)用當(dāng)前第16頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)（一）出血病中的應(yīng)用圖6一期止血缺陷的篩檢試驗的應(yīng)用正常出血時間延長血小板計數(shù)減少增多血小板減少血小板增多某些凝血因子缺乏血小板功能缺陷原發(fā)性繼發(fā)性遺傳性獲得性原發(fā)性反應(yīng)性血管性血友病低（無）纖維蛋白原血癥遺傳性獲得性遺傳性獲得性一期止血缺陷當(dāng)前第17頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)

BT↑PLT減少周圍血涂片血小板增多正常α-顆粒缺乏GTFⅧ:C↓VWF:Ag↓VWF:Rco↓

APTT↓

PAgT↓CD62p↓服藥史釋放反應(yīng)↓vWD多聚體異常骨髓圖片/活檢抗血小板藥物

PAgT↓

PAdT↓CD41或CD61↓BSSITP脾功能亢進(jìn)癥血小板增多癥AA或放、化療后低增生,RBC、WBC、PLT減少巨核細(xì)胞系增生/正常伴成熟障礙CD42b或CD42a↓脾臟檢查正常脾腫大脾腫大或正常巨核細(xì)胞系增生,血小板聚集不聚集分散大小各異，數(shù)量減少大小不同，明顯聚集大小正?；蜉p度增大圖7一期止血缺陷的診斷步驟注：AA：再生障礙性貧血；ITP：特發(fā)性血小板減少性紫癜；PAdT：血小板粘附試驗；PAgT：血小板聚集試驗；BSS：巨血小板綜合征；GT：血小板無力癥；FⅧ：C：凝血因子Ⅷ促凝活性；vWF：Ag：血管性血友病因子抗原；vWF：Rco：血管性血友病因子相關(guān)輔因子；vWD：血管性血友病當(dāng)前第18頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)圖8二期止血缺陷篩檢試驗的應(yīng)用因子Ⅶ缺陷癥（遺傳性、獲得性）外源途徑缺陷APTT（N）PT（A）APTT（N）PT（N）APTT（A）PT（N）APTT（A）PT（A）共同途徑缺陷因子Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ缺陷癥（遺傳性、獲得性）N：正常；A：異常；PK：激肽釋放酶原；HMWK：高分子量激肽原因子ⅩⅢ定性試驗陽性因子ⅩⅢ缺陷癥（遺傳性、獲得性）因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺陷癥（遺傳性、獲得性）有出血癥狀內(nèi)源途徑缺陷無出血癥狀因子Ⅻ、PK、HMWK缺陷癥（遺傳性、獲得性）二期止血缺陷當(dāng)前第19頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)APTT、PTAPTT異常PT異常APTT、PT異常APTT、PT正常FⅦ:C懷疑FⅩ、FⅤ、FⅡ、Fg缺陷異常出血史懷疑血友病A、B;FⅪ缺陷或嚴(yán)重vWDFⅧ:CTT懷疑FⅩⅢ缺陷單碘醋酸定性試驗正常延長FⅧ:C缺陷正常,考慮FⅨ缺陷降低正常vWDvWF功能試驗血友病AFⅧ抗體FⅪ:C正常,考慮FⅪ缺陷FⅩ:CFⅡ:CFⅤ:CFg免疫法測定低纖維蛋白原血癥異常纖維蛋白原血癥FⅨ:CvWF:Ag圖9二期止血缺陷的診斷步驟注：APTT：活化部分凝血活酶時間；PT：凝血酶原時間；TT：凝血酶時間；Fg：纖維蛋白原含量；FⅩⅢA:Ag/FⅩⅢB:Ag：凝血因子ⅩⅢA/ⅩⅢB亞基抗原降低正常FⅩⅢA:AgFⅩⅢB:AgFⅩⅢ缺陷癥陽性陰性當(dāng)前第20頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)嚴(yán)重肝病依K因子缺乏循環(huán)抗凝物原發(fā)性纖溶繼發(fā)性纖溶PLT↓NNN↓血小板功能↓NNN↑/↓APTT↑N/↑N/↑N↑PT↑↑N/↑N↑Fg↓NN↓↓↓TT↑NN/↑N↑F:C除FⅧ外，余↓FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ均↓N/↓N↓AT↓NNN↓PC↓↓NN↓PS↓↓NN↓t-PAN/↑N↑/NN/↑N/↑ELTN/↓NN↓↓↓D-D↑NNN↑FDP↑NN↑↑注：↓：減少；↑：增加或延長；N：正常；↓↓：明顯減少；N/↓：正常或減少；N/↑：正常或增多表6獲得性凝血障礙項目的選擇和應(yīng)用當(dāng)前第21頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)表7血栓前狀態(tài)檢測的結(jié)果1、篩檢試驗

①活化的部分凝血活酶時間（APTT）和（或）血漿凝血酶原時間（PT）可能縮短；②纖維蛋白原（Fg）含量可能增高；③血小板聚集試驗（PAgT)的聚集率可能增高；④血液粘度測定一般增高。然而這些試驗的靈敏度較差。

（二）血栓病中的應(yīng)用當(dāng)前第22頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)表7血栓前狀態(tài)檢測的結(jié)果2、常用試驗①血管性血友病因子抗原（vWF:Ag)增高：反映血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷；②β-血小板球蛋白（β-TG）增高：反映血小板被激活；③可溶性纖維蛋白單體復(fù)合物（sFMC)增高：反映凝血酶生成增多；④抗凝血酶活性（AT：A）減低：反映凝血酶的活性增強(qiáng)；⑤纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDPs)和D-二聚體減少：反映纖溶酶活性減低。

（二）血栓病中的應(yīng)用當(dāng)前第23頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)表7血栓前狀態(tài)檢測的結(jié)果3、特異試驗①凝血酶調(diào)節(jié)蛋白（TM）和（或）內(nèi)皮素-1（ET-1）增高：反映血管內(nèi)皮細(xì)胞受損；②P-選擇素（P-selectin)的（或）11-去氫-血栓素B（11-DH-TXB2）增高：反映血小板被激活；③凝血酶原片段1+2（F1+2）和（或）纖維蛋白肽A（FPA）增高：反映凝血酶的活性增強(qiáng)；④凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物（TAT）增高：反映凝血酶活性增強(qiáng)；⑤組織因子（TF）活性增高：反映外源凝血系統(tǒng)的凝血活性增強(qiáng)；⑥纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）減少：反映纖溶酶活性減低。（二）血栓病中的應(yīng)用當(dāng)前第24頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)疑PC系統(tǒng)疾病疑AT疾病AT:A(凝固法)APC-R(凝固法)PC:A(凝固法)PS:A(凝固法)AT:Ag(免疫法)臨床疑易栓癥PC:Ag(免疫法)TPS:Ag(免疫法)因子VLeiden突變FPS:Ag基因分析排除獲得性缺乏PC、PS、AT、FⅫ和狼瘡抗新物質(zhì)等陽性陽性陽性陽性陽性正常AT缺陷癥AT缺乏正常陽性正常PC缺陷癥PC缺乏PS缺陷癥正常陽性陽性PC缺乏C4b-Bp↑圖10易栓癥檢驗診斷步驟注：APC-R，活化蛋白C抵抗；PC：A，蛋白C活性；PC：Ag，蛋白C抗原；PA：A。蛋白S活性；TPS：Ag，總蛋白S抗原；FPS：Ag，游離蛋白S抗原；AT：A，抗凝血酶活性；AT：Ag，抗凝血酶抗原當(dāng)前第25頁\共有27頁\編于星期四\11點(diǎn)易栓癥病理生理檢驗結(jié)果與分型AT缺乏癥Ⅰ型Ⅱ型蛋白C缺陷癥Ⅰ型Ⅱ型蛋白S缺陷癥Ⅰ型Ⅱ型ⅠaⅠbⅡaⅡbⅡcⅡaⅡbⅡaⅡbAT：A↓↓↓↓↓NPC:A↓↓↓PS:A↓↓↓AT：Ag↓↓NNNPC:Ag↓NNTPS:Ag↓NN肝素結(jié)合活性NN/aN↓NAnPC:A/PC:Ag比率>0.75>0.75<0.75FPS:Ag↓N↓表8易栓癥的檢驗結(jié)果注：↓，減低；↓↓，明顯減低；↑，增高；↑↑，