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有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)從牛奶中分離酪蛋白實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解等電點(diǎn)概念2.掌握通過調(diào)節(jié)pH值實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)分離的方法3.了解縮二脲反應(yīng)鑒定蛋白質(zhì)（多肽）實(shí)驗(yàn)背景酪蛋白等電點(diǎn)是一個(gè)分子或者表面不帶電荷時(shí)的pH值pI=4.8實(shí)驗(yàn)原理1.酪蛋白是含磷蛋白質(zhì)的復(fù)雜混合物，為兩性化合物，溶液的酸堿性直接影響蛋白質(zhì)分子所帶的電荷。當(dāng)調(diào)節(jié)牛奶的pH值達(dá)到酪蛋白的等電點(diǎn)（pI）4.8左右時(shí)，蛋白質(zhì)所帶正負(fù)電荷相等，呈電中性，此時(shí)酪蛋白的溶解度最小，以沉淀形式從牛奶中析出。通過離心的方法將酪蛋白和乳糖分離。鹽

（溶解度高）溶解度低沉淀析出鹽

（溶解度高）實(shí)驗(yàn)原理2.縮二脲反應(yīng)原理：具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應(yīng),生成紅紫色的絡(luò)合物。蛋白質(zhì)或多肽紫紅色絡(luò)合物實(shí)驗(yàn)藥品去脂牛奶稀醋酸（1:9）溶液乙醇乙醚1%硫酸銅溶液0.4

M氫氧化鈉生理鹽水溶液實(shí)驗(yàn)藥品M.w.m.p.b.p.d.乙醚乙醇74.12-116350.71346.07-114780.789實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.

50

mL去脂牛奶

100mL燒杯

40oC稀醋酸（

1:9

）

2mL2.

冷卻10

min，

3000r/min離心15

min3.

傾析取沉淀，

95%乙醇

20mL攪勻，布氏漏斗抽濾4.

10

mL乙醇：乙醚

=1:1洗滌兩次，

5mL乙醚洗滌，抽濾5.

烘干，稱重6.

去0.5

g產(chǎn)物于5mL

0.4MNaOH溶液，

顏色反應(yīng)注意事項(xiàng)1.

牛奶在實(shí)驗(yàn)前不能放置很久，時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使其中的乳糖變?yōu)槿樗嵊绊懛蛛x。

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