免疫學實驗1 實驗動物的抓取、固定和注射方法

免疫學實驗

實驗一

實驗動物的抓取、固定和注射方法

一、實驗目的

1.學習實驗動物的抓取和固定方法。

2.練習對實驗動物的幾種注射方法。二、實驗原理

免疫學實驗離不開實驗動物，如，為了制備抗體或觀察藥物對機體免疫功能的影響，需將抗原或藥物注入動物體內。這就涉及到如何抓取固定動物和怎樣給動物注射的問題。掌握實驗動物的正確的抓取、固定、注射方法是進行免疫學實驗的基礎。三、實驗器材

1.器具注射器及針頭、剪刀、碘酒棉球、酒精棉球、消毒干棉球、酒精燈、紗布、鑷子。

2.材料家兔、小鼠、生理鹽水。四、實驗方法

1.皮下注射法（subcutaneousinjection,sc,以兔或豚鼠為例）（1）助手用左手夾持豚鼠肩部，并用大拇指鉤住下頜部，將動物提起，右手在下方將動物托起，手心向上，用食指、中指及無名指夾住后腿。（2）用酒精棉球消毒兔背部皮膚或豚鼠蹊部。注射者將皮膚提起，以預先準備好的注射器針頭（內裝無菌生理鹽水）刺入皺褶底部，注射0.5ml。注入時阻力不大而放下皮膚后，皮下呈擴散狀隆起者為注射正確。

2.皮內注射法（intracutaneous

injection,ic,以兔為例）（1）助手將兔抓緊。（2）實驗者在其背部任選約2cm2的面積剪毛，消毒皮膚。（3）將5號針頭連接在1ml的注射器上，吸取無菌生理鹽水，針孔向上平刺入皮內，注入0.1～0.2ml，如準確注射在皮內，則注射部位形成堅實的水泡。

3.腹腔注射（intraperitoneal

injection,ip,以小鼠為例）（1）用右手拖鼠尾，使其爬行于較粗糙之臺面上（可用試管簍倒扣于桌面代替），再突然用左手拇、食指抓緊小鼠頸項及其兩耳，翻轉后，用左手無名指及小指夾住鼠尾及后肢。（2）消毒腹壁，以預先準備的材料（無菌生理鹽水）注入腹腔0.3ml。4.靜脈注射（intravenousinjection,iv,以家兔為例）（1）兔的抓取與固定。（2）用棉球或少許紗布沾取45～50℃的溫水于耳翼邊緣的血管上，或用手指輕彈并輕揉兔耳，使靜脈充血，助手以一手將耳根固定。（3）注射者以左手持該耳，右手將預先準備的材料（無菌生理鹽水）由血管注入，針頭刺入時與靜脈幾乎相平行，注入0.5ml。如注射正確，則針下阻力很小，亦可見血管變色；如阻力較大或皮下隆起即停止注射，重新刺入血管，或另選部位；注入液體時應將針頭與耳同時固定，以免針頭退出血管。（4）注射完畢用消毒干棉球壓注注射部位，然后拔出針頭，再壓片刻以防出血。注意事項

1.選擇大小適宜、注射針筒與筒芯號碼一致的注射器，并先吸入清水，試其是否漏水，漏水的注射器不能使用，因其注射量不準確，且易引起污染及傳染。2.視選擇的動物及注射途徑之不同而選用合適大小的針頭，并先試驗是否通氣或漏水。3.消毒時將筒芯從筒中拔出，用脫脂紗布以相同的方向先包針筒后包筒芯，置煮沸消毒器中，選好針頭，包好紗布置煮沸消毒器另一端，同時放入鑷子一把，加入自來水，以覆蓋注射器為度，煮沸10min（從水沸之時算起）。4.消毒完畢后，用鑷子取出注射器，置筒芯于針筒中，針頭牢固地裝在針筒的針嘴上，使其斜面與針筒上的刻度方向一致，吸入注射材料，準備注射。5.若使用一次性注射器，則不必消毒，買來即可使用。6.吸入注射材料后，應將注射器內的空氣排盡，若注射材料具有傳染性，則排氣時應以酒精棉球包住針頭，以免傳染材料流出。7.小鼠腹腔注射時應將小鼠的頭部向下，以避免針頭刺入內臟。針斜刺入皮膚后，轉直，再向下直刺少許即可進入腹腔，其目的是使兩個針眼不在一條直線上，可避免拔出針頭時注射材料流出污染皮膚及造成注射劑量不足，在注射傳染材料時，應特別注意。另外，進針部位不宜太近上腹部或進針過深，以免刺破內臟。8.注射完畢后