無菌生產(chǎn)概念及非最終滅菌注射劑生產(chǎn)和質(zhì)量控制張華

無菌生產(chǎn)概念及非最終滅菌注射劑

生產(chǎn)和質(zhì)量控制無菌藥品的高風險分析廠房設計、潔凈度級別和環(huán)境控制設備生產(chǎn)工藝配制過濾無菌灌裝無菌檢查從“齊二藥”事件談物料和中間體質(zhì)量控制人員監(jiān)控凍干從“欣弗”事件談滅菌工藝當前第1頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌藥品的高風險分析當前第2頁\共有127頁\編于星期四\18點注射劑的特點藥效迅速、作用可靠可用于不宜口服給藥的患者可用于不宜口服的藥物發(fā)揮局部定位作用注射給藥不方便且注射時疼痛

直接入血制劑，質(zhì)量要求比其他劑型更嚴格，使用不當更易發(fā)生危險制造過程復雜，生產(chǎn)費用較大，價格較高當前第3頁\共有127頁\編于星期四\18點注射劑的一般質(zhì)量要求無菌

成品中不得含有任何活的微生物無熱原

特別是供靜脈及脊椎注射的制劑澄明度

不得有肉眼可見的渾濁或異物安全性

不能引起對組織的刺激性或發(fā)生毒性反應，特別是一些非水溶劑及一些附加劑，必須經(jīng)過必要的動物實驗，以確保安全當前第4頁\共有127頁\編于星期四\18點注射劑的一般質(zhì)量要求滲透壓

與血漿的滲透壓相等或接近pH

要求與血液相等或接近（血液pH7.4）必要的物理和化學穩(wěn)定性，以確保產(chǎn)品在儲存期內(nèi)安全有效降壓物質(zhì)

有些注射液，如復方氨基酸注射液，其降壓物質(zhì)必須符合規(guī)定，確保安全當前第5頁\共有127頁\編于星期四\18點注射劑生產(chǎn)的風險分析內(nèi)源性的影響因素系統(tǒng)設備工藝過程物料和中間體的質(zhì)量外源性的影響因素人員當前第6頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌藥品生產(chǎn)的管理要點防止微生物污染防止熱原或細菌內(nèi)毒素的污染防止產(chǎn)品中有異物裝量準確當前第7頁\共有127頁\編于星期四\18點廠房設計、潔凈度級別和環(huán)境監(jiān)控當前第8頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)常見缺陷采用無菌工藝制造的潔凈區(qū)內(nèi)，無菌的操作區(qū)與有菌的操作區(qū)未完全分開凍干灌裝區(qū)所用工器具滅菌后，經(jīng)事實上的非無菌區(qū)進入無菌區(qū)，帶來微生物污染風險無菌區(qū)設水池及潔具間，或設地漏無菌區(qū)設單獨的廢物區(qū)潔凈區(qū)壓差監(jiān)控不到位采用最終滅菌工藝生產(chǎn)的灌裝間倒壓差廠房有重大變更，不做確認和驗證當前第9頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌操作區(qū)布局示例圖一當前第10頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌操作區(qū)布局示例圖二當前第11頁\共有127頁\編于星期四\18點潔凈度級別比較WHO（GMP）美國（209E）美國（習慣分類）ISO/TC（209）EEC（GMP）AM3.5100ISO5ABM3.5100ISO5BCM4.510000ISO7CDM6.5100000ISO8D當前第12頁\共有127頁\編于星期四\18點WHOGMP2002標準

級別靜態(tài)動態(tài)最大允許粒子數(shù)/立方米最大允許粒子數(shù)/立方米0.5-5.0μm>5.0μm0.5-5.0μm>5.0μmA3500035000B350003500002000C3500002000350000020000D350000020000不作規(guī)定不作規(guī)定注：新標準分為動態(tài)及靜態(tài)，差一個級別；A級沒有要求連續(xù)微粒測試引自WHO技術(shù)報告902，2002當前第13頁\共有127頁\編于星期四\18點WHOGMP2002微生物指標級別空氣樣CFU/m3沉降碟(90mm)CFU/4小時接觸碟(55mm)CFU/碟5指手套CFU/手套A＜3＜3＜3＜3B10555C1005025－D20010050－注：沉降碟的暴露時間，一般4小時，我國為0.5小時

引自WHO技術(shù)報告902，2002當前第14頁\共有127頁\編于星期四\18點浮游菌采樣儀MERCKMAS-100Millipore當前第15頁\共有127頁\編于星期四\18點FDA對潔凈區(qū)劃分的標準－2004潔凈區(qū)級別(0.5μm塵粒數(shù)/立方英尺)ISO名稱0.5μm塵粒數(shù)/立方米浮游菌糾偏限度(cfu/m3)沉降菌糾偏限度

(φ90mm;cfu/4h)10053,520111000635,2007310,0007352,000105100,00083,520,00010050所有級別均依據(jù)生產(chǎn)活動時在鄰近暴露物料/物品處測試的數(shù)據(jù)浮游菌、沉降菌糾偏限度表示建議的環(huán)境質(zhì)量水平。企業(yè)也可根據(jù)作業(yè)或分析方法的類型確定微生物糾偏措施標準引自GuidanceforIndustrySterileDrugProductsProducedbyAsepticProcessing—CurrentGoodManufacturingPractice,FDA當前第16頁\共有127頁\編于星期四\18點中國GMP（1998修訂）潔凈級別塵粒數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)≥0.5μm≥5μm浮游菌CFU/立方米沉降菌CFU/皿(Ф90mm半小時)10035000511000035000020001003100000350000020000500103000001050000060000100015我國百級標準采用了國際標準中B級（亂流百級）的限度標準標準沒有闡明對氣流組織的要求當前第17頁\共有127頁\編于星期四\18點關(guān)鍵操作區(qū)空氣流向控制要求比較潔凈度級別WHO美國歐盟中國A100A100空氣流向單向流單向流單向流無要求風速0.45m/s±20%0.45m/s±20%產(chǎn)粉塵的操作區(qū)風速應更高0.36-0.54m/s無要求當前第18頁\共有127頁\編于星期四\18點潔凈區(qū)壓差控制要求比較WHO美國歐盟中國不同級別相鄰房間的壓差10-15Pa10-15Pa10-15Pa

>5Pa其它壓差潔凈區(qū)過濾空氣的送風應能確保在任何運行狀態(tài)下對周圍低級別區(qū)保持正壓及氣流方向，并有足夠的自凈能力無菌操作間對相鄰非潔凈區(qū)操作間應始終保持正壓（如至少12.5Pa）潔凈區(qū)過濾空氣的送風應能確保在任何運行狀態(tài)下對周圍低級別區(qū)保持正壓及氣流方向，并有足夠的自凈能力潔凈區(qū)與室外大氣的靜壓差>10Pa當前第19頁\共有127頁\編于星期四\18點潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控要求比較WHO美國歐盟中國關(guān)鍵操作區(qū)的塵粒為控制各級別的潔凈區(qū)操作時的塵粒數(shù)，應對塵粒進行監(jiān)測每一生產(chǎn)班次應定期進行監(jiān)控；粒子計數(shù)探頭的安放位置應能取到有代表性的樣品

應對A級區(qū)的空氣粒子進行連續(xù)測定，并建議對B級區(qū)也連續(xù)進行測定

潔凈室(區(qū))內(nèi)空氣的微生物數(shù)和塵粒數(shù)應定期監(jiān)測，監(jiān)測結(jié)果應記錄存檔。潔凈室(區(qū))在靜態(tài)條件下檢測的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)或沉降菌數(shù)必須符合規(guī)定，應定期監(jiān)控動態(tài)條件下的潔凈狀況。關(guān)鍵操作區(qū)的微生物無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態(tài)監(jiān)測；關(guān)鍵操作結(jié)束后，應對表面和人員的微生物進行監(jiān)測；應制定微生物監(jiān)控的警戒和糾偏標準，以監(jiān)控空氣質(zhì)量的趨勢關(guān)鍵區(qū)出現(xiàn)微生物污染時，要進行必要的調(diào)查無菌操作時，應頻繁對微生物進行動態(tài)監(jiān)測；除在生產(chǎn)過程中需進行微生物監(jiān)控外，系統(tǒng)驗證、清潔和消毒等操作后，也應進行微生物監(jiān)控；應對塵粒和微生物監(jiān)控制定適當?shù)木浜图m偏標準關(guān)鍵操作區(qū)的壓差應設送風故障報警系統(tǒng)；壓差十分重要的毗鄰級別區(qū)之間應安裝壓差表并定期記錄壓差每一班操作過程中，房間的壓差應連續(xù)監(jiān)控并經(jīng)常記錄。所有報警應有記錄，超過設定限度的各種偏差應進行調(diào)查?？闪腥肱涗浿袘O送風故障報警系統(tǒng)；壓差十分重要的毗鄰級別區(qū)之間應安裝壓差表；壓差數(shù)據(jù)應定期記錄或者歸入有關(guān)文檔中無要求當前第20頁\共有127頁\編于星期四\18點關(guān)鍵操作區(qū)氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100級10000級當前第21頁\共有127頁\編于星期四\18點關(guān)鍵操作區(qū)氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關(guān)鍵點操作者不能進入Grade”A”區(qū)域。當前第22頁\共有127頁\編于星期四\18點廠房的檢查要點廠房布局和建造潔凈度級別的標準關(guān)鍵操作區(qū)的空氣流向潔凈區(qū)的壓差潔凈區(qū)的清潔和消毒環(huán)境監(jiān)控HVAC系統(tǒng)的維護和監(jiān)控當前第23頁\共有127頁\編于星期四\18點設備當前第24頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)常見缺陷儲存除菌過濾后藥液的高位槽呼吸口未安裝呼吸器與藥品直接接觸的壓縮空氣、惰性氣體未確認是否符合生產(chǎn)要求滅菌和凍干設備管理不到位溫度探頭或控制儀未校準溫度探頭損壞維修不及時（干熱、濕熱）滅菌、凍干設備無自動記錄裝置（干熱、濕熱）滅菌、凍干設備的自動記錄未歸檔未使用聯(lián)動生產(chǎn)線，采用單機灌封當前第25頁\共有127頁\編于星期四\18點滅菌設備自動記錄曲線圖示例當前第26頁\共有127頁\編于星期四\18點設備的檢查要點適用于產(chǎn)品的生產(chǎn)、清潔、消毒或滅菌盡可能采用密閉系統(tǒng)合理布置和安裝關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準設備的確認、維護和維修設備的清潔、消毒或滅菌共用設備應有防止交叉污染的措施設備應在確認的范圍內(nèi)使用當前第27頁\共有127頁\編于星期四\18點密閉系統(tǒng)示例當前第28頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)用隔離器示例一當前第29頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)用隔離器示例二當前第30頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)用隔離器示例三當前第31頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)常見缺陷注射用水和純化水標準不符合藥典標準工藝用水未做微生物限度的檢測注射用水和純化水的微生物限度檢查未采用薄膜過濾法注射用水循環(huán)系統(tǒng)溫度檢測點安裝位置不合理，不能反映系統(tǒng)保持65℃以上循環(huán)未監(jiān)測注射用水關(guān)鍵使用點的細菌內(nèi)毒素當前第32頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)用水的檢查要點水處理設施及其分配系統(tǒng)的設計、安裝和維護應能確保供水達到適當?shù)馁|(zhì)量標準。水系統(tǒng)的運行不應超越其設計能力。注射用水的生產(chǎn)、貯存和分配方式應能防止微生物生長，例如，在70℃以上保持循環(huán)水源、水處理設施及水的化學和生物學污染狀況應定期監(jiān)測，必要時還應監(jiān)測細菌內(nèi)毒素。監(jiān)測結(jié)果以及所采取糾偏措施的記錄應予歸檔當前第33頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)工藝當前第34頁\共有127頁\編于星期四\18點生產(chǎn)工藝配制過濾無菌灌裝凍干從“欣弗”事件談滅菌工藝當前第35頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌藥品生產(chǎn)管理的要點生產(chǎn)加工的每個階段（包括滅菌前的各階段）都必須采取預防措施，以盡可能降低污染當前第36頁\共有127頁\編于星期四\18點配制國內(nèi)企業(yè)常見缺陷提高稱量配制區(qū)域的潔凈度級別，使其與灌裝區(qū)域一致，共用同一潔凈區(qū)的更衣設施、走廊和HVAC系統(tǒng)稱量操作位置的正上方安裝高效空氣層流不注意物料稱量的先后順序整包裝的物料不稱量即投料不按照規(guī)定的處方配制稱量記錄不完整操作區(qū)域受到活性炭污染當前第37頁\共有127頁\編于星期四\18點配制區(qū)域的潔凈度級別應單獨設置，注意稱量區(qū)的空氣流向，防止粉塵擴散應根據(jù)產(chǎn)品的特性設定相應的潔凈度級別

歐盟無菌藥品的GMP附錄規(guī)定：原輔料和大多數(shù)產(chǎn)品的準備/配制應至少在D級區(qū)進行，以降低塵粒和微生物污染的風險，適于過濾及滅菌操作微生物污染風險比較高時，如容易長菌的產(chǎn)品、配制后要等相當長時間方可滅菌的產(chǎn)品或因故主要不在密閉容器內(nèi)進行配制操作的產(chǎn)品，配制必須在C級環(huán)境中進行當前第38頁\共有127頁\編于星期四\18點稱量必須按照注冊批準的處方配料稱量中應特別注意防止交叉污染一次稱量一種物料通常先稱量輔料，后稱量原料藥活性炭應在單獨區(qū)域中稱量，稱量后放在水溶液中衡器使用前應檢查校準稱量記錄最好采用客觀的記錄如實記錄衡器的讀數(shù)復核當前第39頁\共有127頁\編于星期四\18點配制工序的檢查要點操作區(qū)的設置和潔凈度級別配料處方稱量操作稱量記錄防止污染和交叉污染的措施當前第40頁\共有127頁\編于星期四\18點過濾國內(nèi)企業(yè)常見缺陷過濾器的安裝位置遠離灌裝點采用無菌制造工藝時，除菌過濾的有菌操作區(qū)與無菌操作區(qū)未分隔未記錄所用過濾器的型號、來源、批號不做過濾器的完整性試驗過濾器完整性試驗的合格標準設定不正確過濾后的溶液存放在開口的容器中當前第41頁\共有127頁\編于星期四\18點過濾器的安裝除菌過濾用過濾器通常使用2只串聯(lián)方式，確保過濾的可靠性可能情況下，應在緊挨灌裝點的位置，用除菌過濾器將所有藥液，特別是大容量注射劑進行除菌過濾采用無菌制造工藝時，除菌過濾操作區(qū)域不得設在無菌操作區(qū)內(nèi)，可通過管道傳送濾液當前第42頁\共有127頁\編于星期四\18點過濾器的完整性試驗過濾器的相關(guān)信息應具有可追溯性完整性試驗的合格標準應參照供應商的說明書設定應在過濾前、過濾后分別測試測試方法起泡點試驗前進流試驗微生物挑戰(zhàn)性試驗由供應商做，以避免污染產(chǎn)品當前第43頁\共有127頁\編于星期四\18點起泡點試驗示意圖壓縮空氣或氮氣壓力表閥門壓力表濾芯外殼排污閥閥門親水濾器起泡點試驗水劑產(chǎn)品以產(chǎn)品或水濕潤濾膜0.2μ參考壓力>0.31MPa0.45μ參考壓力>0.23MPa詳見供貨商說明書疏水性濾器起泡點60％(v/v)異丙醇水溶液60-70％(v/v)乙醇水溶液當前第44頁\共有127頁\編于星期四\18點前進流試驗示意圖壓縮空氣或氮氣閥門壓力表濾芯外殼閥門前進流測試儀排污閥前進流試驗在~80％起泡點壓力下進行詳見供貨商說明書當前第45頁\共有127頁\編于星期四\18點過濾工序的檢查要點過濾器的安裝位置過濾器的相關(guān)信息過濾器完整性試驗的方法過濾前后的完整性試驗和記錄過濾器的更換、消毒或滅菌發(fā)現(xiàn)過濾器出問題后的處理當前第46頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌灌裝國內(nèi)企業(yè)常見缺陷關(guān)鍵操作區(qū)空氣流向為亂流，而不是層流關(guān)鍵操作區(qū)不便于在潔凈區(qū)外進行監(jiān)控人員的無菌操作不規(guī)范不做或未定期做培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)模擬灌裝驗證的合格標準設定不正確培養(yǎng)基模擬灌裝未模擬最差生產(chǎn)條件未對培養(yǎng)基模擬灌裝陽性樣品進行調(diào)查培養(yǎng)模擬灌裝驗證數(shù)據(jù)作假當前第47頁\共有127頁\編于星期四\18點培養(yǎng)基模擬灌裝驗證目的確定實際生產(chǎn)中（如開機前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的概率基本思路應綜合考慮生產(chǎn)線可能造成污染的各種因素，并能對工藝受控的狀態(tài)做出準確的評估應盡可能模擬實際生產(chǎn)的無菌操作，可能時，應包括最差條件的相關(guān)活動，以挑戰(zhàn)無菌操作當前第48頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌灌裝檢查要點關(guān)鍵操作區(qū)和生產(chǎn)設備清潔、消毒或滅菌無菌灌裝用各類物料、器具的準備或滅菌處理生產(chǎn)用氣體人員的無菌操作裝量控制培養(yǎng)基模擬灌裝驗證無菌檢驗樣品的取樣檢查時應不能影響正常的生產(chǎn)當前第49頁\共有127頁\編于星期四\18點凍干國內(nèi)企業(yè)常見缺陷不測共晶點批量不固定不同裝量的產(chǎn)品同時凍干凍干操作人員需在凍干過程中隨時調(diào)整參數(shù)設置未對不同裝量、不同批量的產(chǎn)品分別進行凍干工藝驗證凍干工藝未經(jīng)驗證當前第50頁\共有127頁\編于星期四\18點影響凍干產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素凍結(jié)產(chǎn)品溶液處方冷凍速率冷凍方式產(chǎn)品裝量和數(shù)量干燥擱板溫度產(chǎn)品溫度冷凝器溫度和真空度冷凍干燥室的真空度產(chǎn)品裝量和數(shù)量當前第51頁\共有127頁\編于星期四\18點凍干工藝的關(guān)鍵控制參數(shù)冷凍速率擱板溫度產(chǎn)品溫度冷凝器溫度和真空度冷凍干燥室的真空度當前第52頁\共有127頁\編于星期四\18點凍干機的滅菌乙醇只能起到消毒的作用，不能做到滅菌普遍認可的方法為濕熱滅菌法氮氣、空氣過濾器和進氣口管道應滅菌完全冷凍干燥室的滅菌應使蒸汽在擱板間自由流通冷凍干燥室在各批次間應進行滅菌滅菌程序的驗證應采用生物指示劑冷凝器應滅菌滅菌應有完整的記錄當前第53頁\共有127頁\編于星期四\18點凍干檢查要點凍干產(chǎn)品的包裝形式、裝量凍干產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量凍干工藝和曲線凍干工藝的驗證凍干產(chǎn)品進出冷凍干燥室的操作凍干機的滅菌凍干機關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準管路的連接凍干的記錄當前第54頁\共有127頁\編于星期四\18點從“欣弗”事件談滅菌工藝欣弗事件的發(fā)生2006年7月安徽華源克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液不良事件報告81例，涉及10個省份當前第55頁\共有127頁\編于星期四\18點欣弗到底怎么了？當前第56頁\共有127頁\編于星期四\18點克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g）采用半無菌工藝生產(chǎn)滅菌條件 100℃、7分鐘貯存條件 陰涼有效期 1年有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇穩(wěn)定性考察 有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為7.9％有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過8.0％ 單雜不得過5.0％當前第57頁\共有127頁\編于星期四\18點克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯注射液（2ml:0.3g）滅菌條件 100℃、3～10分鐘貯存條件 遮光、密閉保存有效期 2年處方中含有苯甲醇有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過6.0％（2004年底改為8.0％） 單雜不得過4.0％當前第58頁\共有127頁\編于星期四\18點克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品的調(diào)查注射用克林霉素磷酸酯（0.3g或0.6g）凍干粉針貯存條件 遮光、密閉，在陰涼處保存有效期 2年有的處方中含有苯甲醇有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過4.0％ 單雜不得過2.5％當前第59頁\共有127頁\編于星期四\18點克林霉素磷酸酯注射劑產(chǎn)品

質(zhì)量標準中有關(guān)物質(zhì)項比較有關(guān)物質(zhì)LVP（100ml）SVP(2ml)粉針劑原料藥總雜≤8.0%≤8.0%≤4.0%≤4.0%單雜≤5.0%≤4.0%≤2.5%≤2.5%當前第60頁\共有127頁\編于星期四\18點克林霉素磷酸酯水溶液

熱穩(wěn)定性研究江蘇省的一家藥廠經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，克林霉素磷酸酯水溶液加熱到60℃，含量下降86%因無法采用滅菌工藝生產(chǎn)，該企業(yè)最終申報了克林霉素磷酸酯的凍干粉針劑當前第61頁\共有127頁\編于星期四\18點從上述調(diào)查

看國內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷對滅菌的認識不正確產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性忽視工藝的可行性，盲目跟風報批注射劑用原料藥的雜質(zhì)控制不嚴忽視產(chǎn)品的安全性當前第62頁\共有127頁\編于星期四\18點《中國醫(yī)藥報》2007年1月4日A6版當前第63頁\共有127頁\編于星期四\18點滅菌工藝的選擇濕熱滅菌法干熱滅菌法除菌過濾法環(huán)氧乙烷滅菌法輻射滅菌法當前第64頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌藥品常用滅菌工藝的比較類別Fo值微生物存活概率要點說明過度殺滅法Fo≥12≤10-6熱穩(wěn)定性產(chǎn)品以殺滅微生物作為實現(xiàn)無菌的手段殘存概率法8<Fo<12≤10-6熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品工藝過程將防止產(chǎn)品被耐熱菌污染放在首位而不是依賴最終滅菌去消除污染流通蒸汽法不計算Fo≤10-3熱不穩(wěn)定產(chǎn)品加熱是除菌過濾的補充手段除菌過濾法LRV>7≤10-3不能加熱的產(chǎn)品不能除去病毒、支原體等微生物LRV=logreductionvalue過濾對數(shù)下降值一般上游為107下游為1，則LRV=7由于操作較多，最終產(chǎn)品達到的無菌保證水平遠低于除菌過濾的水平當前第65頁\共有127頁\編于星期四\18點影響濕熱滅菌效果的因素待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設備當前第66頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌保證水平SAL無菌保證水平（SterilityAssuranceLevel）表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)按國際標準，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。當前第67頁\共有127頁\編于星期四\18點滅菌工藝驗證的必要性滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴格的GMP管理和良好的無菌保證體系滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件滅菌工藝經(jīng)過驗證后，方可正式用于生產(chǎn)當前第68頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷無包裝規(guī)格無裝載方式未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進行驗證采用留點溫度計監(jiān)測溫度無溫度探頭校準記錄驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致未驗證最差滅菌條件設定的驗證合格標準達不到無菌保證水平（SAL）10-6生物指示劑使用不規(guī)范當前第69頁\共有127頁\編于星期四\18點滅菌工藝檢查要點生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量滅菌工藝條件滅菌設備關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準設備維護和維修滅菌的記錄滅菌工藝的驗證選用的生物指示劑熱分布試驗，找出最冷點位置無菌檢驗樣品的取樣當前第70頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢查當前第71頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)常見缺陷未對無菌檢驗方法進行驗證未測試培養(yǎng)基的靈敏度未對每柜滅菌產(chǎn)品進行取樣并進行無菌檢驗未考慮產(chǎn)品本身的抑菌作用無菌種分離鑒別的條件出現(xiàn)陽性結(jié)果時的調(diào)查不完整當前第72頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢查的局限性無菌的定義理論上：無菌＝?jīng)]有任何活的微生物實際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在無法對整批產(chǎn)品進行100%檢驗無菌檢驗的結(jié)果只是一個基于“可能性”的判斷無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性只進行細菌和真菌的檢驗對實驗結(jié)果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長”培養(yǎng)條件（如溫度和時間）是有限的我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài)當前第73頁\共有127頁\編于星期四\18點美國非腸道藥物學會注射劑無菌測試結(jié)果試驗目的：不合格的可能性(%)試驗批量：60,000支試驗方法：按美國藥典無菌測試方法真實的不合格率測試20支樣品不合格的可能性測試40支樣品不合格的可能性1％18.2%33.1%5％64.2%87.2%15％96.1%99.8%30％99.9%100.0%當前第74頁\共有127頁\編于星期四\18點上述無菌測試結(jié)果的啟示含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能“通過”無菌檢驗一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無菌檢驗的結(jié)果來判定整批產(chǎn)品的無菌，其風險就越大當前第75頁\共有127頁\編于星期四\18點如何用無菌檢驗來證明整批產(chǎn)品無菌要求有一個取樣計劃來涵蓋整個批號有足夠的取樣量和檢驗量選擇適用的培養(yǎng)基采用經(jīng)驗證的無菌檢驗方法良好的環(huán)境監(jiān)控當前第76頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗的取樣計劃何時取?如何取?何處??？無菌灌裝產(chǎn)品批開始、結(jié)束及重大故障和調(diào)整后最多24小時為一批USP<1211>每天灌裝的產(chǎn)品應分別做無菌檢驗最終滅菌產(chǎn)品從滅菌柜中最冷點取樣對經(jīng)不同滅菌柜滅菌的產(chǎn)品應分別進行無菌檢驗當前第77頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗的取樣計劃取多少樣品（檢驗數(shù)量）？取決于產(chǎn)品的批量

CP2005年版大于500：取2%或20支（取少），用于每個培養(yǎng)基檢驗小于等于100：取10%或4個（取多），用于每個培養(yǎng)基檢驗取決于產(chǎn)品的數(shù)量CP2005年版劑量小于1毫升，就要取40支同時要考慮檢驗耗損和復試的需要當前第78頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗的取樣計劃每個樣品測試多少數(shù)量（檢驗量）？藥典上規(guī)定了每次檢驗的供試品總量裝量小于1ml

CP2005年版每支樣接入每個培養(yǎng)基為全量裝量大于等于1ml Ph.Eur半量，但不超過20ml CP2005年版半量，2-500ml當前第79頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類用于真菌培養(yǎng)的改良馬丁培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度23-28℃用于厭氧和需氧細菌培養(yǎng)的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30-35℃培養(yǎng)基的適用性檢查要有足夠的靈敏度能夠支持代表性菌種的生長培養(yǎng)基的儲存和控制儲存條件和有效期當前第80頁\共有127頁\編于星期四\18點USP29無菌檢驗陽性對照菌的選擇名稱英名備注白色念珠菌CandidaalbicansATCC10231真菌/酵母①黑曲霉菌AspergillusnigerATCC16404真菌/霉菌①枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis

ATCC6633需氧，條件致病菌，除炭疽熱類芽孢桿菌會引起大部分動物生病以外，本屬內(nèi)其它種都不會引起動物生病，但是Bacillussubtilis卻會引起眼睛傷害，G+.銅綠假單胞菌Pseudomonasaeruginosa

ATCC9027需氧，G-,致病菌

②又叫綠膿桿菌金黃色葡萄球菌StaphylococcusaureusATCC6538需氧，G+,是致病菌

③梭狀芽孢桿菌ClostridiumsporogenesATCC7955厭氧，G+,非致病菌④產(chǎn)品中常見污染菌從日常監(jiān)控污染菌中分離企業(yè)自己分離當前第81頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗方法主要有兩種方法直接接種法薄膜過濾法注意事項采用直接接種法時應考慮產(chǎn)品是否有抑菌性當前第82頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢驗的環(huán)境控制應在無菌環(huán)境下進行潔凈度（塵粒和微生物）應與無菌生產(chǎn)廠房一致控制要求與生產(chǎn)區(qū)域一致，如：空調(diào)、更衣、清潔、緩沖、定期驗證應有環(huán)境監(jiān)控程序并根據(jù)實際情況設定糾偏限度當前第83頁\共有127頁\編于星期四\18點隔離器當前第84頁\共有127頁\編于星期四\18點樣品表面的消毒處理在樣品進入無菌區(qū)前應進行消毒處理在進行樣品外表面消毒時，應確保樣品的完整性

考慮所用消毒液滲透過樣品容器的可能性，如：透過塑料容器消毒液應無菌當前第85頁\共有127頁\編于星期四\18點陽性檢驗結(jié)果的調(diào)查和處理無菌檢驗所用的設備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查法要求回顧無菌檢驗過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素陰性對照有菌生長供試品中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌試驗中所用的物品和（或）無菌操作技術(shù)不當引起要有調(diào)查程序和記錄當前第86頁\共有127頁\編于星期四\18點無菌檢查的要點取樣計劃取樣量和檢驗量培養(yǎng)基和菌種管理無菌檢驗方法環(huán)境監(jiān)控樣品表面消毒處理陽性檢驗結(jié)果的調(diào)查和處理當前第87頁\共有127頁\編于星期四\18點從“齊二藥”事件談物料和中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制當前第88頁\共有127頁\編于星期四\18點“齊二藥”事件事件回顧2006年4月齊齊哈爾第二制藥有限公司亮菌甲素注射液將工業(yè)用二甘醇（乙二醇）作為藥用丙二醇投入注射劑的生產(chǎn)造成11人嚴重腎衰竭，4人死亡當前第89頁\共有127頁\編于星期四\18點“齊二藥”事件當前第90頁\共有127頁\編于星期四\18點“齊二藥”事件事件發(fā)生的原因企業(yè)改制，有實際工作經(jīng)驗的員工嚴重流失檢驗人員未經(jīng)培訓，鑒別試驗出錯物料供應商審計流于形式、疏于管理假丙二醇是由江蘇省中國地質(zhì)礦業(yè)公司泰興化工總廠生產(chǎn)事件的教訓不合格的物料會威脅到用戶或病人的安全（嚴重傷害、嚴重疾病或死亡）當前第91頁\共有127頁\編于星期四\18點“齊二藥”事件對“齊二藥”的處理沒收查封扣押的假藥沒收其違法所得238萬元，并處貨值金額5倍罰款1682萬元，罰沒款合計1920萬元吊銷其《藥品生產(chǎn)許可證》撤銷其129個藥品批準文號收回GMP認證證書涉嫌將工業(yè)用二甘醇當作藥用丙二醇供應給“齊二藥”)的王桂平被江蘇省泰興市檢察院以涉嫌銷售假藥罪和虛報注冊資本罪批準逮捕。當前第92頁\共有127頁\編于星期四\18點國內(nèi)企業(yè)常見缺陷未根據(jù)產(chǎn)品特性、用途、工藝設定質(zhì)量標準物料質(zhì)量標準缺少鑒別和安全性指標砷鹽、重金屬、細菌內(nèi)毒素重成品檢驗，輕物料檢驗未經(jīng)取樣的物料貼有取樣證取樣方法不規(guī)范含量等檢驗未做平行試驗供應商審計流于形式，隨意變更供應商無經(jīng)質(zhì)量部門批準的合格供應商清單當前第93頁\共有127頁\編于星期四\18點物料的質(zhì)量控制應根據(jù)產(chǎn)品的特性、用途和工藝設定物料的質(zhì)量標準用于無菌藥品的物料應特別考慮安全性的指標任何物料的質(zhì)量標準中一定要有鑒別WHO的GMP中要求對每一包裝的物料進行鑒別試驗物料的質(zhì)量標準和（或）來源應符合注冊批準的要求物料的取樣應有代表性物料的檢驗應嚴謹、規(guī)范當前第94頁\共有127頁\編于星期四\18點物料供應商管理對供應商進行識別、評估、驗證、確認和管理是供應鏈管理中最關(guān)鍵的任務是最基本的質(zhì)量工作之一應重點管理物料的生產(chǎn)商當前第95頁\共有127頁\編于星期四\18點物料供應商管理批準供應商清單業(yè)績評估供應商批準流程供應商選擇供應商嘉獎當前第96頁\共有127頁\編于星期四\18點供應商需求供應商分類成品服務物料確定風險等級確定批準條件發(fā)給供應商問詢表和供應商質(zhì)量要求現(xiàn)場審核（如有要求）評估是否批準否決批準加入批準供應商清單文件存檔確定批準分級供應商批準流程示例當前第97頁\共有127頁\編于星期四\18點供應商變更物料供應商應保持相對穩(wěn)定改變原料藥的生產(chǎn)商應補充申報，經(jīng)藥監(jiān)部門批準不同物料的生產(chǎn)商可能采用不同的生產(chǎn)工藝，導致物料的質(zhì)量標準不完全相同應評估對產(chǎn)品質(zhì)量的影響至少檢驗三批樣品必要時，還應進行小試和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察應按供應商批準的流程執(zhí)行及時變更合格供應商清單當前第98頁\共有127頁\編于星期四\18點物料檢查的要點物料的質(zhì)量標準物料的來源物料的取樣和檢驗物料的供應商審計物料供應商的變更當前第99頁\共有127頁\編于星期四\18點中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制無菌藥品應特別注意監(jiān)控中間產(chǎn)品微生物和細菌內(nèi)毒素