生物安全柜的選擇、使用及維護演示文稿

生物安全柜的選擇、使用及維護演示文稿當前第1頁\共有43頁\編于星期四\19點（優(yōu)選）生物安全柜的選擇、使用及維護當前第2頁\共有43頁\編于星期四\19點目的掌握生物安全柜的選擇、放置、使用和維護熟悉生物安全柜的檢測方法當前第3頁\共有43頁\編于星期四\19點需要解決的六個問題為什么選擇生物安全柜？選擇什么樣的生物安全柜？怎樣放置生物安全柜？怎樣使用生物安全柜？怎樣維護生物安全柜？怎樣檢測生物安全柜？當前第4頁\共有43頁\編于星期四\19點選擇生物安全柜的理由工作對象具有生物危害原代培養(yǎng)物、菌毒種以及診斷性標本等-------具有潛在感染性的實驗材料屬于《人間傳染的病原微生物名錄》中第一、二、三和四類微生物當前第5頁\共有43頁\編于星期四\19點人間傳染的病原微生物名錄當前第6頁\共有43頁\編于星期四\19點類與級對應(yīng)表------GB19489-2004《實驗室生物安全通用要求》第一類第二類第三類第四類當前第7頁\共有43頁\編于星期四\19點選擇生物安全柜的理由容易產(chǎn)生氣溶膠的工作行為對液體或半流體進行搖動、傾注或攪拌操作時，將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時，在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細胞培養(yǎng)瓶，采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中，對感染性物質(zhì)進行勻漿及渦旋振蕩，對感染性液體進行離心，進行動物操作時。當前第8頁\共有43頁\編于星期四\19點選擇生物安全柜的理由生物安全柜能夠阻止工作中所產(chǎn)生的氣溶膠對外環(huán)境或者操作者本身產(chǎn)生危害，還可以減少樣本之間由于氣溶膠產(chǎn)生的交叉污染。當前第9頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜基本工作原理定向氣流：風(fēng)幕HEPA濾器：

一種一次性使用，框架內(nèi)有多重褶迭的干性過濾材料的過濾器，對0.3微米氣溶膠的過濾效能達到99.97%。保證排出氣體和內(nèi)循環(huán)氣體的無菌狀態(tài)。當前第10頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的選擇要素：樣品的生物危害第一、二、三和四類病原微生物保護樣品I級生物安全柜不保護樣品其他是否涉及到揮發(fā)性、放射性核素或化學(xué)品當前第11頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的選擇（一）生物安全柜進風(fēng)面速率（m/s）氣流百分數(shù)排風(fēng)系統(tǒng)重新循環(huán)部分排出部分I級0.360100硬管Ⅱ級A1型0.38～0.517030排到房間或套管連接處外排風(fēng)型Ⅱ級A2型0.517030套管連接處Ⅱ級B1型0.513070硬管Ⅱ級B2型0.510100硬管III級不適用0100硬管當前第12頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的選擇（二）生物安全柜保護類型保護對象I級第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境Ⅱ級A1型第二、三和四類病原微生物操作者，環(huán)境和樣品外排風(fēng)型Ⅱ級A2型第二、三和四類病原微生物；痕量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級B1型第二、三和四類病原微生物；少量揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品Ⅱ級B2型第二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品III級第一、二、三和四類病原微生物；揮發(fā)放射性核素/化學(xué)品操作者，環(huán)境和樣品當前第13頁\共有43頁\編于星期四\19點II級A2型生物安全柜室內(nèi)空氣污染的空氣HEPA濾過的空氣正壓污染空氣當前第14頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的選擇（三）生物安全柜的寬度：工作需要；空間費用：安全柜本身；運輸費用；附件費用（支架，紫外燈，椅子等）；排風(fēng)和送風(fēng)系統(tǒng)：風(fēng)機和管道（II級B2）認證：

NSF49美國EN12469歐洲YY0569－2005中國當前第15頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜放置五個遠離點（氣流）門風(fēng)扇空調(diào)開著的窗戶人員活動頻繁的區(qū)域擺放要求穩(wěn)固的平臺或支架兩側(cè)、后面和上端留30cmAirRegister設(shè)備首選位置候選位置工作臺設(shè)備視頻當前第16頁\共有43頁\編于星期四\19點反面教材當前第17頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用要求個人防護要求柜內(nèi)物品的擺放紫外燈明火工作前準備工作中操作及溢出處理工作結(jié)束后處理當前第18頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用個人防護要求：在使用生物安全柜時必須穿個人防護服，戴手套（手套應(yīng)套在隔離衣的外面）最好帶口罩和帽子，根據(jù)需要帶防護眼罩或者面罩。視頻當前第19頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用生物安全柜內(nèi)物品擺放原則按照從潔凈區(qū)到污染區(qū)的方向擺放所有物品盡可能放在工作臺后部將廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品放在柜內(nèi)某一側(cè)前進氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或者其他物品阻擋當前第20頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)當前第21頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用對紫外燈的三點要求：每周進行清潔，除去可能影響殺菌效果的灰塵和污垢每次生物安全柜的認證，要檢查紫外線強度，以確保有適當?shù)墓獍l(fā)射量房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，以保護眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害當前第22頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用避免使用明火，原因有三：明火可造成生物安全柜的氣流紊亂，干擾氣流模式可損壞HEPA過濾器處理揮發(fā)性物品和易燃物品時易造成危險當前第23頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用工作前需要準備的內(nèi)容：

首先紫外燈照射30分鐘關(guān)紫外燈，打開安全柜的日光燈和風(fēng)機，用消毒劑對生物安全柜的內(nèi)表面進行消毒擦拭將實驗中需要用到的物品集中用消毒劑擦拭后放在臺面相應(yīng)位置上（切記勿阻擋風(fēng)口！）等待5min，凈化工作區(qū)的空氣污染物視頻當前第24頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用工作時操作規(guī)范：雙臂垂直緩慢進入前面的開口，在生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢后才可對物品進行處理。所有操作應(yīng)在離前窗10cm以外的工作區(qū)進行。廢棄物應(yīng)丟棄在生物安全柜內(nèi)的處理容器中視頻當前第25頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用操作時注意事項：避免胳膊在前開口處快速移動和頻繁進出。盡量避免污染的物品進入潔凈區(qū)。在生物安全柜內(nèi)進行操作時，不能進行文字工作。盡量減少操作者身后的人員活動。視頻當前第26頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用溢出處理：

GB19489—2007《實驗室生物安全通用要求》中生物安全柜內(nèi)溢出時的處理方法滴狀溢出或體積不足1mL的，可簡單地用消毒劑擦洗。當前第27頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用大量溢出，則要做特殊的處理：1、使生物安全柜保持開啟狀態(tài)。2、在溢出物上覆蓋浸有消毒劑的吸水材料，作用大約10分鐘以發(fā)揮消毒作用。3、在安全柜內(nèi)對污染的手套消毒后，脫下手套。如果衣服已經(jīng)污染，也要先脫下消毒。穿戴干凈的手套和衣服作如下進一步的清潔工作。當前第28頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用4、用消毒劑噴灑或擦拭安全柜內(nèi)壁、工作表面以及前視窗的內(nèi)側(cè)。作用20min后，擦干消毒劑并將擦拭物置于生物危害袋中。5、如果溢出情況需要浸泡接液槽，則不得現(xiàn)場清理接液槽。應(yīng)報告實驗室主管后采用適當?shù)臍怏w消毒方式。當前第29頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用6、將所有清理用物品以及防護服進行高壓消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮膚。7、立即通知實驗室主管。如果溢出物流入安全柜內(nèi)，可能需要對安全柜進行更為廣泛的消毒處理。視頻當前第30頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用工作結(jié)束后的要求：將安全柜繼續(xù)運行至少3min來完成“凈化”過程。將柜內(nèi)物品移出前，應(yīng)使用有效的消毒劑擦拭每天實驗結(jié)束后，對生物安全柜的內(nèi)壁和臺面進行擦拭。等待5分鐘后，關(guān)閉前窗，關(guān)燈，關(guān)風(fēng)機，紫外燈照射30分鐘。視頻當前第31頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的維護保持生物安全柜表面清潔和無污染狀態(tài)用70%酒精或者合適的消毒劑擦拭內(nèi)壁和工作臺面；如果使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，需要用無菌水再次進行擦拭除去殘余的消毒劑；定期抬起工作臺面對其下面的區(qū)域進行清潔；消毒后，用玻璃清潔器對前窗玻璃和紫外燈進行清潔。當前第32頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的維護定期保養(yǎng)：用濕布擦拭內(nèi)壁和工作臺面；每年按需要更換紫外燈和日光燈；每年至少認證一次

——《醫(yī)學(xué)實驗室—安全要求》——YY0569-2005生物安全柜——《實驗室生物安全手冊》（第三版，2004）視頻當前第33頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的維護生物安全柜的污染清除甲醛、過氧化氫熏蒸等方法應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進行在以下情況下需要進行熏蒸：①在檢查和維修之前②在更換HEPA濾器之前③在移動安全柜之前④安全柜被嚴重地污染⑤變換使用目的⑥長時間未用⑦需要熏蒸的其它時間當前第34頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的維護甲醛熏蒸步驟之一----準備電爐兩個；福爾馬林；氨水；100mL燒杯4個；膠帶；透明塑料薄膜、75%酒精等。使用75%酒精對生物安全柜內(nèi)、外表面進行消毒清潔；將生物安全柜和放置在同一房間內(nèi)的冰箱、CO2培養(yǎng)箱等儀器用膠帶紙進行密封處理。視頻當前第35頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用甲醛熏蒸步驟之二----熏蒸將電爐放在生物安全柜中，連接電源用兩個燒杯分取福爾馬林20mL、水50mL，置電爐上關(guān)閉視窗，用膠帶封嚴窗門開啟電源，水和福爾馬林同時被加熱，待福爾馬林揮發(fā)完畢時，關(guān)閉電源,保持密閉狀態(tài)，過夜視頻當前第36頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的使用甲醛熏蒸步驟之三----中和取氨水36mL、水50mL，分放于2個燒杯中，置電爐上再次將生物安全柜門密封開啟電源，待氨水揮發(fā)完后，關(guān)閉電源密閉過夜視頻當前第37頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的熏蒸當前第38頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的熏蒸當前第39頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的檢測什么情況下需要檢測？應(yīng)該由什么人來進行檢測？需要進行哪些內(nèi)容的檢測？當前第40頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測的情況發(fā)生在：最初的購買安裝完畢年檢移動修理當前第41頁\共有43頁\編于星期四\19點生物安全柜的檢測生物安全柜的檢測應(yīng)由有資質(zhì)的單位檢測在美國必須有美國NSF授權(quán)的單位；沒有NSF授權(quán)，也得有以下經(jīng)歷的：有過檢測經(jīng)驗；參加過技術(shù)課程或者廠商培訓(xùn)會；參加過象CETA水平的商業(yè)會議；檢測設(shè)備擁有的校準證書在我國有檢測資質(zhì)的單位：國家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心和軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院當前第42頁\共有43頁\編于星期