紅細(xì)胞檢驗(yàn)的基本方法

紅細(xì)胞檢驗(yàn)的基本方法第一頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

一、SI(serumiron)的測定1.原理SFPH↓+還原劑→Fe2++顯色劑→絡(luò)合物成年男性11.6～31.3μmol／L成年女性9.0～30.4μmol／L降低：見于缺鐵性貧血（IDA）、慢性失血和感染等。增高：見于肝疾病、鐵粒幼細(xì)胞貧血、慢性溶血和反復(fù)輸血等。第二頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一二、SF(serumferritin)的測定（125I標(biāo)記SF+待測血SF）+定量抗體→125I復(fù)合物1+復(fù)合物2125I標(biāo)記SF+定量抗體→125I復(fù)合物32、參考值：成人男性15～200μg／L，女性12～150μg／L,小兒低于成人；3、臨床評(píng)價(jià)：①降低：見于IDA早期、失血、慢性貧血等。②增高：見于肝疾病、血色病、急性感染和惡性腫瘤等。第三頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

三、TIBC測定1.過量鐵標(biāo)準(zhǔn)液+血清→SF2.SFPH↓+還原劑→Fe2++顯色劑→有色絡(luò)合物TIBC：男性50～77μmol／L

女性54～77μmol／LUIBC：25.1～51.9μmol／L①增高：見于IDA和紅細(xì)胞增多癥等。②降低或正常：見于肝疾病、惡性腫瘤、溶血性貧血、慢性感染和腎病綜合征等。第四頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一四、鐵吸收率測定當(dāng)體內(nèi)缺鐵時(shí)，鐵蛋白的利用加快，腸道對(duì)鐵吸收也增加?？诜派湫?9Fe，測定體內(nèi)59Fe放射性量比率的變化，可推算出鐵吸收率。正常值:26.0％～35.0％增加：見于IDA，可高達(dá)50％～80％。降低：見于腸道吸收不良綜合征。正常：見于正常人、再障、巨幼細(xì)胞貧血、急性失血等。第五頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一五、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白測定免疫散射比濁法：利用抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白血清與待檢測的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，其光吸收和散射濁度增加，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，可計(jì)算出轉(zhuǎn)鐵蛋白含量。免疫散射比濁法為28.6～51.9μmol／L。增高：見于IDA和妊娠。降低：常見于腎病綜合征、肝硬化、惡性腫瘤、炎癥等。第六頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一六、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白受體測定雙抗體夾心法。1.血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白受體+抗體2.抗原抗體復(fù)合物+酶抗體；3.加入底物和顯色劑，其顏色的深淺與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的量成正比。以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線查出未知標(biāo)本的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體水平。升高：常見于缺鐵性貧血和溶血性貧血。降低：見于再障、慢性病貧血、腎功能衰竭等。用于臨床觀察骨髓增生狀況和治療反應(yīng)。第七頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一小低貧的初步診斷1.HGB（g/L）男性<120女性<1102.HCT<0.35男性<0.40女性3.RBC（1012/L）男性<4.0女性<3.54.MCV(fl)<80fl=10-15L5.MCH(pg)<27pg=10–12g6.MCHC<0.32第八頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一血清鐵指標(biāo)檢驗(yàn)的應(yīng)用

小細(xì)胞低色素性貧血的鑒別鐵總鐵結(jié)合力鐵飽和度鐵蛋白缺鐵貧減低增高減低減低?地貧正常正常正常正/高慢感貧減低正/低減低增高鐵粒貧增高減低增高增高第九頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一一、血清和紅細(xì)胞葉酸測定葉酸測定（measurementoffolacin）RIA，核素+葉酸→放射碘葉酸化合物。血清葉酸：成年男性8.61～23.8nmol／L葉酸減低：巨幼細(xì)胞貧血，紅細(xì)胞過度增生（如溶貧、骨髓增生性疾病等）。

女性7.93～20.4nmol／L紅細(xì)胞與血清中的葉酸濃度相差幾十倍，當(dāng)未發(fā)生巨幼細(xì)胞貧血時(shí)，紅細(xì)胞葉酸測定對(duì)判斷葉酸缺乏尤其有價(jià)值。紅細(xì)胞葉酸：成人340～1020nmol／L紅細(xì)胞第二節(jié)葉酸和維生素B12的檢驗(yàn)第十頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一二、血清維生素B12測定RIA法，用抗氧化劑和氰化鉀在堿性環(huán)境下（pH＞12）,將人血清中的維生素B12從載體蛋白中釋放出來。加入57Co標(biāo)記的維生素B12,與固定在微晶纖維顆粒上純化的維生素B12結(jié)合物競爭結(jié)合，檢測其放射活性，其量與受檢血清的維生素B12含量成反比，與標(biāo)準(zhǔn)管作對(duì)照，換算出維生素B12含量。成人148～660pmol／L降低：巨幼細(xì)胞貧血。增高：白血病患者\(yùn)真性紅細(xì)胞增多癥\惡性腫瘤和肝細(xì)胞損傷第十一頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一四、血清內(nèi)因子阻斷抗體測定用57Co標(biāo)記的維生素B12與血清中的內(nèi)因子結(jié)合，形成57Co標(biāo)記的維生素B12－內(nèi)因子復(fù)合物；當(dāng)存在內(nèi)因子抗體時(shí),形成的復(fù)合物的量減少。檢測其放射活性，與陽性對(duì)照管進(jìn)行比較，可得知內(nèi)因子抗體的存在。陰性：正常人，比值≤1.00±0.10陽性：比值≥陽性對(duì)照血清比值±0.10內(nèi)因子阻斷抗體陽性：多見于由維生素B12缺乏引起的巨幼細(xì)胞貧血、惡性貧血等。第十二頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一紅細(xì)胞壽命測定（erythrocytelifespandetermination）是將放射性核素（51Cr）標(biāo)記的紅細(xì)胞注入血循環(huán)后，逐日觀察其消失率，記錄成活曲線，計(jì)算出紅細(xì)胞壽命。半壽期為25～32天紅細(xì)胞壽命縮短：（1）溶血性貧血，約為14天。（2）再生障礙性貧血，約為15～29天。第三節(jié)溶血的檢驗(yàn)第十三頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一四、血漿高鐵血紅素白蛋白檢測高鐵血紅素白蛋白+硫化銨銨血色原用光譜儀在綠光區(qū)558nm處有一最佳吸收區(qū)帶。正常人呈陰性血管內(nèi)溶血時(shí)，血漿中游離血紅蛋白大量增加，血漿中可檢測出高鐵血紅素白蛋白。第十四頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一1、原理

五、血清結(jié)合珠蛋白(Hp)測定1.待側(cè)血清+Hb液→Hp-Hb復(fù)合物+未結(jié)合Hb。2.電泳分離出Hp-Hb復(fù)合物。電泳法0.5－1.6g/L1.減低：常見于各種溶血，尤其是血管內(nèi)溶血。排除嚴(yán)重肝病及傳單。2.增高：感染、SLE、創(chuàng)傷、惡腫、妊娠等。第十五頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一六、尿卟啉檢測尿中卟啉類物質(zhì)在酸性條件下，經(jīng)乙醚提取，于405nm處顯紅色熒光，從而可對(duì)尿卟啉進(jìn)行定性檢測。正常人呈陰性①增加：先天性紅細(xì)胞生成性卟啉病、遲發(fā)性皮膚型卟啉病、肝紅細(xì)胞生成型卟啉病等。②對(duì)缺鐵性貧血、鉛中毒、鐵粒幼細(xì)胞貧血和珠蛋白生成障礙性貧血等的診斷有一定價(jià)值。第十六頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

五、尿含鐵血黃素試驗(yàn)又稱Rous試驗(yàn)。當(dāng)血紅蛋白通過腎濾過時(shí)，部分鐵離子以含鐵血黃素的形式沉積于上皮細(xì)胞，并隨尿液排出。尿中含鐵血黃素是不穩(wěn)定的鐵蛋白聚合體，其中的高鐵離子與亞鐵氰化鉀作用，在酸性環(huán)境下產(chǎn)生普魯士藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀。尿沉渣腎小管細(xì)胞內(nèi)外可見直徑1～3μm的藍(lán)色顆粒。正常人呈陰性①陽性提示慢性血管內(nèi)溶血，尿中有鐵排出。無論有無血紅蛋白尿，只要存在慢性血管內(nèi)溶血如PNH，本試驗(yàn)結(jié)果即呈陽性，并可持續(xù)數(shù)周。②溶血初期，雖然有血紅蛋白尿，此時(shí)本試驗(yàn)可呈陰性反應(yīng)。第十七頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

一、紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)滲透脆性試驗(yàn)（osmoticfragilitytest）檢測紅細(xì)胞對(duì)不同濃度低滲鹽溶液的抵抗力。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中，當(dāng)水滲透其內(nèi)部達(dá)一定程度時(shí)，紅細(xì)胞發(fā)生膨脹破裂。開始溶血：75.2～82.1mmol／L（4.4～4.8g／L）NaCl完全溶血：47.9～54.7mmol／L（2.8～3.2g／L）NaCl①脆性增加：遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥、橢圓形紅細(xì)胞增多癥和部分自身免疫性溶血性貧血。②脆性降低：珠蛋白生成障礙性貧血、血紅蛋白C、D、E病，低色素性貧血、肝疾病等。第四節(jié)紅細(xì)胞膜缺陷的檢驗(yàn)第十八頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一二、自身溶血試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)紅細(xì)胞在37℃孵育48小時(shí)，其間由于膜異常引起鈉內(nèi)流傾向明顯增加，ATP消耗過多；或糖酵解途徑酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可導(dǎo)致溶血，稱為自身溶血試驗(yàn)。在孵育時(shí)，加入葡萄糖或ATP作為糾正物，觀察溶血可否有一定的糾正，稱為糾正試驗(yàn)。正常人紅細(xì)胞孵育48小時(shí),不加糾正物的溶血率＜3.5％，加葡萄糖的溶血率＜1.0％，加ATP糾正物的溶血率＜0.8％。①遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥自身溶血率增加，加入葡萄糖或ATP后明顯糾正。②G－6－PD缺乏癥等戊糖旁路代謝缺陷的病人自身溶血率增加，能被葡萄糖糾正。③丙酮酸激酶缺乏癥時(shí)不能利用葡萄糖產(chǎn)生ATP,其自身溶血率明顯增加，加葡萄糖不能糾正，加ATP可糾正。④獲得性溶血性貧血或自身免疫性溶血時(shí)試驗(yàn)結(jié)果常各有不同，對(duì)診斷意義不大。⑤本試驗(yàn)不夠敏感和特異，僅對(duì)遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥有較大診斷價(jià)值.第十九頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

三、紅細(xì)胞膜三磷酸腺苷活性測定Na＋－K＋－ATP酶、Ca2＋－Mg2＋－ATP酶和Mg2＋－ATP酶都是紅細(xì)胞膜上的ATP酶。為測定酶的活性可分別測定酶作用于ATP的水解產(chǎn)物無機(jī)磷含量，若在基質(zhì)中只加入Ca2＋－Mg2＋－ATP酶可測定Ca2＋－Mg2＋－ATP酶的活性，若在基質(zhì)中加入Na＋、K＋、Mg2＋和ATP，測定的為Na＋－K＋－ATP酶和Mg2＋－ATP酶的共同含量，再在基質(zhì)中加入Na＋－K＋－ATP酶的抑制劑，測定結(jié)果僅為Mg2＋－ATP酶活性，兩者的差為Na＋－K＋－ATP酶活性。紅細(xì)胞膜Na＋－K＋－ATP酶：（2.93±0.67）mU／109紅細(xì)胞Ca2＋－Mg2＋－ATP酶：0.4～2.5μmol／L－1.mg膜蛋白.h－1遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥：Na＋－K＋－ATP酶活性增加，Ca2＋－Mg2＋－ATP酶活性減低。蠶豆?。篊a2＋－Mg2＋－ATP酶活性降低。許多藥物作用于紅細(xì)胞時(shí)，Na＋－K＋－ATP酶和Ca2＋－Mg2＋－ATP酶活性改變。第二十頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一四、酸化甘油溶血試驗(yàn)當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時(shí)，可阻止其中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過程緩慢。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺時(shí)，它們在pH6.85的甘油緩沖液中比正常紅細(xì)胞溶解速度快，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50％的時(shí)間（AGLT50）明顯縮短。正常人AGLT50＞290s遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥AGLT50明顯縮短（25～150s）。自身免疫性溶血性貧血、腎功能衰竭、妊娠等AGLT50也可縮短。第二十一頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一五、高滲冷溶血試驗(yàn)在高滲狀態(tài)下，溫度驟然變化影響紅細(xì)胞膜脂質(zhì)的流動(dòng)性，并可能累及膜磷脂與膜骨架蛋白結(jié)合位點(diǎn)，紅細(xì)胞容易破裂而發(fā)生溶血。當(dāng)膜蛋白缺陷致膜表面積與體積比值降低，溶血率明顯增加。而膜表面積與體積比值增加，溶血率降低。高滲冷溶血試驗(yàn)（hyperosmoticcoldhemolysistest）即測定紅細(xì)胞在不同濃度的高滲緩沖液中，從37℃水浴立即置于0℃水浴一定時(shí)間的最大溶血率。9mmol／L或12mmol／L蔗糖最大溶血率66.5％～74.1％7mmol／L蔗糖大溶血率0.1％～16.9％①遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥明顯增加。②珠蛋白生成障礙性貧血和異常血紅蛋白病明顯降低。③自身免疫性溶血性貧血基本正常。2、參考值：第二十二頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

六、紅細(xì)胞膜蛋白電泳分析將制備的紅細(xì)胞膜樣品進(jìn)行SDS－PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝膠)電泳，根據(jù)樣品中各蛋白相對(duì)分子質(zhì)量的不同，分離得到紅細(xì)胞膜蛋白的電泳圖譜，從而可見各膜蛋白組分百分率。各種膜蛋白組分百分率變化較大，多以正常紅細(xì)胞膜蛋白電泳圖譜作比較；或以帶3蛋白為基準(zhǔn)，各膜蛋白含量以與帶3蛋白的比例表示。許多溶血性疾病常見紅細(xì)胞膜蛋白異常。各種膜缺陷疾病如遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥有收縮蛋白等含量減低或結(jié)構(gòu)異常。某些血紅蛋白病骨架蛋白等可明顯異常。第二十三頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一一、高鐵血紅蛋白還原試驗(yàn)在血液中加入亞硝酸鹽使紅細(xì)胞中的亞鐵血紅蛋白變成高鐵血紅蛋白，正常紅細(xì)胞的G－6－PD催化戊糖旁路使NADP變成NADPH，其脫的氫通過亞甲藍(lán)試劑的遞氫作用而使高鐵血紅蛋白（Fe3＋）還原成亞鐵血紅蛋白（Fe2＋），通過比色可觀察還原的多少。當(dāng)G－6－PD缺乏時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率下降。正常人高鐵血紅蛋白還原率≥75％（臍帶血≥77％）G－6－PD缺乏時(shí)，高鐵血紅蛋白還原率下降。中間缺乏（雜合子）為31％～74％，嚴(yán)重缺乏（半合子或純合子）＜30％。第五節(jié)紅細(xì)胞酶缺陷的檢驗(yàn)第二十四頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一二、變性珠蛋白小體生成試驗(yàn)G－6－PD缺乏的病人血樣加入乙酰苯肼于37℃孵2～4小時(shí)，用煌焦油藍(lán)染色觀察紅細(xì)胞中珠蛋白小體的生成情況，計(jì)算含5個(gè)及以上珠蛋白小體的紅細(xì)胞的百分率。正常人含5個(gè)及以上珠蛋白小體的紅細(xì)胞，一般＜30％。G－6－PD缺乏癥常高于45％，故可作為G－6－PD缺乏的篩檢試驗(yàn)。但還原型谷胱甘肽缺乏癥也增高；不穩(wěn)定血紅蛋白病含小體的細(xì)胞百分率為75％～84％，HbH病和化學(xué)物質(zhì)中毒時(shí)也增高。第二十五頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一三、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和活性測定在G-6-PD和NADP＋存在下，G-6-PD能使NADP＋還原成NADPH，后者在紫外線照射下會(huì)發(fā)出熒光。NADPH的吸收峰在波長340nm處，可通過單位時(shí)間生成的NADPH的量來測定G-6-PD活性。正常人有很強(qiáng)的熒光。G-6-PD缺陷者熒光很弱或無熒光；雜合子或某些G-6-PD變異者則可能有輕到中度熒光。正常人酶活性為（12.1±2.09）U/gHb。第二十六頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一四、丙酮酸激酶熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)和活性測定在二磷酸腺苷（ADP）存在的條件下丙酮酸激酶（pyruvatekinase，PK）催化磷酸烯醇丙酮酸（PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸，在輔酶Ⅰ還原型（NADH）存在的情況下丙酮酸被LDH轉(zhuǎn)化為乳酸，若標(biāo)記熒光于NADH上，此時(shí)有熒光的NADH變?yōu)闊o熒光的NAD。正常人丙酮酸激酶活性斑點(diǎn)在25分鐘內(nèi)消失。酶活性（15.0±1.99）U／gHb。熒光斑點(diǎn)不消失或時(shí)間延長說明丙酮酸激酶活性缺乏，中間缺乏（雜合子）時(shí)，熒光25～60分鐘消失，嚴(yán)重缺乏（純合子）時(shí)，熒光60分鐘不消失。第二十七頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

五、谷胱甘肽還原酶缺陷檢測谷胱甘肽還原酶（GR）催化反應(yīng)中NADPH轉(zhuǎn)變?yōu)镹ADP＋，熒光消失，通過在365nm處觀察熒光斑點(diǎn)消失的時(shí)間（GR熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)）反映谷胱甘肽還原酶的活性，或直接測定吸光度的變化（GR活性定量試驗(yàn)）計(jì)算GR的活性。GR熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)：正常人熒光斑點(diǎn)15min內(nèi)消失GR活性定量：（7.17±1.09）U／gHb谷胱甘肽還原酶缺乏時(shí)，GR熒光斑點(diǎn)試驗(yàn)15分鐘以后還有熒光存在，GR活性定量試驗(yàn)活性低于7.17U／gHb。第二十八頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一一、紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)（Heinz－bodyformingtest）是將煌焦油藍(lán)液與新鮮血液一起孵育，不穩(wěn)定血紅蛋白易變性沉淀形成包涵體。正常人＜（1％）①不穩(wěn)定血紅蛋白?。悍跤?～3小時(shí)多數(shù)紅細(xì)胞內(nèi)可出現(xiàn)變性珠蛋白肽鏈沉淀形成的包涵體。G－6－PD缺乏或紅細(xì)胞還原酶缺乏及化學(xué)物質(zhì)中毒等，紅細(xì)胞中也可出現(xiàn)包涵體。②HbH?。悍跤?小時(shí)就可出現(xiàn)包涵體，也叫HbH包涵體。第六節(jié)血紅蛋白異常的檢驗(yàn)第二十九頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一1、原理：

二、血紅蛋白電泳檢測血紅蛋白電泳（hemoglobinelectrophoresis）是根據(jù)不同的血紅蛋白所帶電荷不同、相對(duì)分子質(zhì)量不同，其泳動(dòng)方向和速度不同，經(jīng)一定電壓和時(shí)間的電泳，可分離出各自的區(qū)帶，同時(shí)對(duì)電泳出的各區(qū)帶進(jìn)行電泳掃描，可進(jìn)行各種血紅蛋白的定量分析。第三十頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一2、參考值：（1）pH8.6TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳。正常血紅蛋白電泳區(qū)帶：HbA＞95％、HbF＜2％、HbA2為1.0％～3.1％。①通過與正常人的血紅蛋白電泳圖譜進(jìn)行比較，可發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶。如HbH、HbE、HbBatrs、HbS、HbD和HbC等異常血紅蛋白異常。②HbA2增多，見于β珠蛋白生成障礙性貧血，為雜合子的重要實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)。HbE病時(shí)也在HbA2區(qū)帶位置處增加，但含量很大（在10％以上）。HbA2輕度增加亦可見于肝病、腫瘤和某些血液病。。第三十一頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一三、抗堿血紅蛋白檢測將待檢的溶血液與一定量的NaOH溶液混合，作用1分鐘后加入半飽和硫酸銨中止堿變性反應(yīng)。胎兒血紅蛋白（HbF）抗堿變性作用強(qiáng)，沒有變性存在于上清液中，HbA變性沉淀，取上清液于540nm處測定吸光度，檢測出HbF的濃度。此試驗(yàn)也稱為堿變性試驗(yàn)，成人＜2％；新生兒＜40％①HbF絕對(duì)增多：珠蛋白生成障礙性貧血，重型者達(dá)30％～90％，中間型常為5％～30％，輕型小于5％。遺傳性胎兒血紅蛋白持續(xù)綜合征患者，可高達(dá)100％。②HbF相對(duì)增多可見于骨髓纖維化、白血病、漿細(xì)胞瘤等惡性疾病及再生障礙性貧血、PNH、卟啉病等。③HbF生理性增多見于孕婦和新生兒。第三十二頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一

四、HbF酸洗脫法檢測HbF具有抗堿和抗酸作用，其抗酸能力比HbA強(qiáng)。將血涂片于酸性緩沖液中孵育，含HbF的紅細(xì)胞不被酸洗脫，可被伊紅染成紅色，而含HbA的紅細(xì)胞均被酸洗脫，不能被伊紅著色。正常血片中含HbF的著色紅細(xì)胞：成人＜0.01（1％）新生兒0.55～0.85（55％～85％）以后漸漸下降，2歲后幼兒＜0.02（2％）孕婦可有輕度增加。著色細(xì)胞增加：珠蛋白合成障礙性貧血重型患者大多數(shù)紅細(xì)胞染成紅色；輕型患者可見少數(shù)染成紅色的細(xì)胞；遺傳性胎兒血紅蛋白持續(xù)綜合征紅細(xì)胞均為紅色。第三十三頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一五、異丙醇沉淀試驗(yàn)不穩(wěn)定血紅蛋白較正常血紅蛋白更容易裂解，在異丙醇這種能降低血紅蛋白分子內(nèi)部氫鍵的非極性溶劑中，不穩(wěn)定血紅蛋白更快地沉淀。通過觀察血紅蛋白液在異丙醇中的沉淀現(xiàn)象對(duì)不穩(wěn)定血紅蛋白進(jìn)行篩檢。正常人血紅蛋白液為陰性（30分鐘內(nèi)不沉淀）不穩(wěn)定血紅蛋白存在時(shí)，常于5分鐘時(shí)出現(xiàn)沉淀，20分鐘開始出現(xiàn)絨毛狀沉淀。血液中含有較多HbF、HbH、HbE時(shí)也可出現(xiàn)陽性結(jié)果。第三十四頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一六、熱變性試驗(yàn)熱變性試驗(yàn)（heatinstabilitytest）是根據(jù)不穩(wěn)定血紅蛋白比正常血紅蛋白更容易遇熱變性，觀察血紅蛋白液在50℃時(shí)是否出現(xiàn)沉淀，對(duì)不穩(wěn)定血紅蛋白進(jìn)行篩檢。正常人熱沉淀的血紅蛋白＜1％血紅蛋白沉淀率增加，說明不穩(wěn)定血紅蛋白存在。第三十五頁，共四十頁，編輯于2023年，星期一七、聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測尿素或?qū)β裙郊姿崮芷茐难t蛋白的空間結(jié)構(gòu)，血紅蛋白的珠蛋白可被裂解成肽鏈亞單位，通過聚丙烯酰胺凝