肝癌的靶向性介入治療

介入治療對肝癌細胞生物學行為的影響當前第1頁\共有33頁\編于星期五\11點肝癌細胞表現(xiàn)出“耐缺血性”、“耐栓塞性”1.栓塞可以促進腫瘤細胞的血管生成相關因子的表達UFLP栓塞組未栓塞組我們的動物實驗研究表明:鼠肝移植瘤模型TAE后殘肝腫瘤VEGF表達是增強的，微血管密度增加微血管密度當前第2頁\共有33頁\編于星期五\11點

2.栓塞可以促進殘存腫瘤細胞的增殖活性

我們的實驗研究表明：兔VX2肝移植瘤模型TACE術后未栓塞的瘤細胞增殖指數(shù)增加N=15tAI=0.711，P>0.05tPI=5.31，P<0.01tSPF=2.96，P<0.05

AI：凋亡指數(shù)PI：增殖指數(shù)SPF：S期細胞比例當前第3頁\共有33頁\編于星期五\11點腫瘤細胞的生物學行為是在不斷變化的，其對任何治療有一定的適應能力TACE術后殘存腫瘤細胞及正常細胞促生長類因子表達增強，可導致殘存肝癌的復發(fā)和轉移潛能增加，使正常的肝組織具備肝癌發(fā)生的土壤當前第4頁\共有33頁\編于星期五\11點現(xiàn)代藥學的系列研究成果碘化油（lipiodol）血管栓塞微球（microsspheres）、微囊(microcapsules)脂質體（liposomes）納米粒（nanoparticles）磁性微球（magneticmicrosperes）復合乳劑（multipleemulsion）、微乳（microemulsion）、細胞載體（cellularcarriers）免疫納米粒（immunenanoparticles）、免疫脂質體（immuneliposomes）當前第5頁\共有33頁\編于星期五\11點藥物—大分子結合物（drug-macromolecularconjugates）藥物-配體結合物（drug-ligandsconjugates）藥物-單克隆抗體結合物（drug-monoclonalantibodyconjugates）等新型DDS(drugdeliversystems,DDS)和前體藥物，這些DDS和前體藥物可通過介入療法或靜脈注射、口服給藥而使藥物相對地濃集于某些病變器官、組織或細胞。上述這些靶向藥物或制劑分別從器官（組織）、細胞和分子水平實施靶向治療。當前第6頁\共有33頁\編于星期五\11點KonnoT等報道了對330例不能手術切除的原發(fā)性肝癌和110例肝轉移癌經肝動脈使用碘化油和碘化油與化療藥的乳劑治療的研究：330例原發(fā)性肝癌1、2、5年的生存率分別為85%、52%、34%，110例肝轉移癌1、2、5年的生存率分別為61%、32%、22%。一．器官水平的靶向治療當前第7頁\共有33頁\編于星期五\11點李欣等經動物實驗證明5-FU白芨微球栓塞后腫瘤生長受到顯著抑制，腫瘤壞死以重度壞死為主。黎維勇等用5-FU白芨微球對11例原發(fā)性肝癌患者肝動脈栓塞后研究表明，5-FU白芨微球體內過程符合二室模型，曲線下面積（AUC）和表關分布容積（Vc）明顯增大，分布半衰期(T1/2α)和消除半衰期（T1/2β）明顯延長，分別為對照組的3.7倍和9.38倍（P＜0.01），清除率降低。當前第8頁\共有33頁\編于星期五\11點納米粒是利用天然高分子或合成的化學物質為載體制成的載藥微粒直徑1-100nm.依據結構的不同，可分為納米球和納米囊：藥物可包埋或溶解在納米粒的內部，也可吸附或偶合在其表面。血管內注射納米粒后，納米粒主要為網狀內皮系統(tǒng)（RES）吞噬。當前第9頁\共有33頁\編于星期五\11點于波濤等證實氟尿嘧啶類脂納米粒（5-FUELSE）凍干粉劑能明顯改善氟尿嘧啶在體內的分布，約70%藥物濃集于肝。陳江浩等實驗表明阿霉素α-聚氰基丙烯酸正丁脂納米粒（NADM）對肝脾表現(xiàn)明顯的靶向性，而血、心、肺、腎中的藥物分布減少。米托蒽醌聚乳酸緩釋納米粒凍干針劑在肝臟分布明顯高于米托蒽醌水針劑，給藥24小時后藥物在肝臟的分布保持在80%以上，說明藥物不僅具有肝靶向性而且具有緩釋性。當前第10頁\共有33頁\編于星期五\11點Soma等研究表明，經動脈或靜脈注射載柔紅霉素聚氰基丙烯烷脂納米粒，肝臟kupffer細胞吞噬大量納米粒，成為一種重要的儲藥庫，降解納米粒能不斷的釋放出游離的藥物至肝臟腫瘤組織，同時被激活的吞噬細胞釋放出毒性因子，潛在地提高了藥物療效。當前第11頁\共有33頁\編于星期五\11點二．細胞水平的靶向治療利用某些細胞具有靶向腫瘤部位的特性，可直接實施免疫攻擊，也可作為受體細胞攜帶病毒載體和（或）外源基因進行治療。包括一些免疫細胞，如巨噬細胞、體細胞、自然殺傷細胞、樹突狀細胞、腫瘤浸潤淋巴細胞等，也包括目前仍在探索的干細胞，但細胞分離培養(yǎng)困難、靶向腫瘤特性不確切，尚待深入研究。當前第12頁\共有33頁\編于星期五\11點三．分子水平的靶向治療定義：利用具有一定特異性的載體，將藥物或其它殺傷腫瘤細胞的活性物質選擇性地運送到腫瘤部位，把治療作用或藥物效應盡量限定在特定的靶細胞、組織或器官內，而不影響正常細胞、組織器官的功能，從而提高療效、減少毒副作用的一種方法。這種通過受體封閉、活酶抑制、刺激物拮抗等手段，以病變細胞為靶點的治療，相對手術、化療、放療三大傳統(tǒng)治療手段而言，具有最徹底的“治本”功效。當前第13頁\共有33頁\編于星期五\11點優(yōu)點：具有特異性強、療效顯著、基本不損傷正常組織。主要包括：信號轉導抑制劑。新生血管生成抑制劑單克隆抗體和基因治療當前第14頁\共有33頁\編于星期五\11點表皮細胞生因子受體（EGFR）是目前研究最多的信號傳導分子靶點。許多腫瘤細胞表面有EGFR的表達或高表達，而且往往預示侵襲性高、進展迅速、預后不良。EGFR與表皮細胞生長因子（EGF）結合后可促進細胞的分裂增殖，并可使正常細胞惡變，還可影響腫瘤血管與間質的生長，促進腫瘤的轉移與復發(fā)。表皮細胞生因子受體（EGFR）當前第15頁\共有33頁\編于星期五\11點研究表明，肝癌中存在EGFR的高表達，與肝癌的形成、生長和發(fā)展有密切的關系。EGFR是肝癌復發(fā)和轉移的一個重要因素，因此可能成為肝癌治療的靶點，吉非替尼（GefitinibIressa）是選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制劑，用以治療多種EGFR表達的腫瘤均有效。近年的實驗表明，將吉非替尼作用于肝癌細胞可阻止其生長，還可阻止基質金屬蛋白酶-9的生成，提示可抑制肝癌的轉移。

表皮細胞生因子受體（EGFR）當前第16頁\共有33頁\編于星期五\11點惡性腫瘤的生長和轉移與腫瘤區(qū)域的血管生長密切相關。血管靶向治療以腫瘤血管內皮細胞表面存在的組織特異分子為靶標，腫瘤部位新生血管高表達腫瘤特有的血管內皮生長因子受體（VEGFR），因而可以作為血管靶向治療的理想靶點。肝癌組織大多血供豐富，研究表明，肝癌組織血管內皮生長因子（VEGF）呈高表達，并在肝癌的發(fā)展進程中起重要作用腫瘤血管內皮生長因子受體（VEGFR）當前第17頁\共有33頁\編于星期五\11點復旦大學肝癌研究所的干預實驗表明，TNP-740、蘇拉明、內皮抑素、金屬蛋白酶抑制劑BB-94(batimastat)、干擾素ɑ等多種抗血管生成劑均可通過阻斷VEGF與VEGFR的結合而抑制肝癌組織的生長和侵襲轉移。Bevacizumab(Avastin)通過特異性抑制惡性腫瘤中VEGFR阻斷腫瘤的血液供應，使腫瘤不能在體內播散。腫瘤血管內皮生長因子受體（VEGFR）當前第18頁\共有33頁\編于星期五\11點單克隆抗體單克隆抗體（單抗）與靶分子特異性結合殺傷腫瘤細胞，近年取得了突破性進展。目前肝癌靶向治療中常用的MAb載體有抗甲胎蛋白（AFP）抗體，抗鐵蛋白抗體、抗人肝癌單抗HIII、HAb18和HAb25等，常用的效應分子有彈頭、放射性核素（131I和125I）、化療藥物（阿霉素、絲裂霉素及博萊霉素等）毒素及細胞因子等。當前第19頁\共有33頁\編于星期五\11點

Al-IuftiRA等報道了使用131I-碘化油在體外對肝癌和結直腸癌細胞株放射治療的研究：131I-碘化油對肝癌和結直腸癌細胞有顯著的細胞毒性，其細胞毒性隨劑量的增加而增加。單克隆抗體當前第20頁\共有33頁\編于星期五\11點美妥昔單抗注射液是美妥昔單抗與碘化鈉交聯(lián)的放射性標記物，該交聯(lián)物標記抗體將放射性核素碘［131I］靶向并濃聚在肝癌組織，通過碘［131I］發(fā)射β射線直接電離殺傷癌細胞，并通過“交叉火力”效應擴大了腫瘤區(qū)域的殺傷半徑。

單克隆抗體術后6天ECT協(xié)和醫(yī)院2008利卡丁當前第21頁\共有33頁\編于星期五\11點基因治療基因治療定義：通過將人的正?；蚧蛴兄委熥饔玫幕蛞砸欢ǖ姆绞綄肴梭w靶細胞來糾正基因的缺陷或通過藥物手段來逆轉某些基因發(fā)生的改變，從而達到治療疾病的目的。尋找新的更有效的治療基因尋找更好的載體增加轉染效率選擇更合適的導入途徑研究方向當前第22頁\共有33頁\編于星期五\11點基因治療肝癌的基因治療的方式主要有：免疫基因治療（如白細胞介素-2、白細白介素12、α2干擾素、β2干擾素和腫瘤壞死因子α），反義基因治療、抑癌基因治療（如p53基因等）、自殺基因療法（HS-tK等）、耐藥逆轉治療、溶瘤病毒治療、RNA干擾技術等當前第23頁\共有33頁\編于星期五\11點基因治療的載體有病毒載體(腺病毒、逆轉錄病毒等)和非病毒載體兩類。Gerolami等報道，來源于人類免疫缺陷病毒1（HIV-1）的慢病毒載體可以在體內或體外有效地感染人HCC細胞，無論采用何種給藥方式，未發(fā)現(xiàn)體內正常肝細胞被明顯的轉染。基因治療當前第24頁\共有33頁\編于星期五\11點

P53基因被稱為“基因衛(wèi)士”，是與人類腫瘤相關性最高的抑癌基因,一旦細胞基因組DNA遭受損害，P53蛋白將啟動DNA的修復程序；如果修復失敗，P53又能啟動細胞程序性死亡，誘導細胞自殺，阻止具有癌變傾向的基因突變的細胞產生。P53基因的失活與肝癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關?；蛑委煟阂职┗蛑委煯斍暗?5頁\共有33頁\編于星期五\11點國內有研究經肝動脈途徑灌注p53基因治療晚期肝癌的療效，治療組生存期最短14d,最長405d,平均238.1d。對照組生存期最短18d,最長167d,平均80.7d(p＜0.01），證實了p53基因治療晚期肝癌有效。基因治療：抑癌基因治療P53腺病毒注射液（協(xié)和醫(yī)院2006）免疫組化染色P53蛋白當前第26頁\共有33頁\編于星期五\11點基因治療：反義基因治療

反義基因療法是利用反義基因在轉錄和翻譯水平阻斷某些異常基因的表達，以期阻斷瘤細胞內異常信號的傳導，使瘤細胞進入正常分化的軌道或引起瘤細胞凋亡。反義基因包括反義RNA、反義DNA和核酶三類當前第27頁\共有33頁\編于星期五\11點混合組Liver1d3d6dLiverTAI組基因治療：反義VEGF寡核苷酸與碘油混合協(xié)和醫(yī)院2004當前第28頁\共有33頁\編于星期五\11點基因治療：免疫性基因

有研究表明大鼠體內應用TNF-α可引起多種試驗性腫瘤的消退,且已有人臨床使用TNF-α治療腫瘤患者

Ki67染色rmhTNF結合TACE對腫瘤MVD和ki67的影響(協(xié)和醫(yī)院，2004)當前第29頁\共有33頁\編于星期五\11點

自殺基因是某些病毒、細菌等原核生物，具有特殊功能的酶類基因，把此類基因導入哺乳動物細胞后，產生的酶能將無毒或低毒的藥物前體轉化成細胞毒性代謝產物，從而導致細胞自殺基因治療：自殺基因

當前第30頁\共有33頁\編于星期五\11點

RNA干擾是指雙鏈RNA引起的mRNA水平互補序列基因表達的關閉,即序列特異性轉錄后基因沉寂,是生物體進化過程中抵御外來基因和病毒感染的進化保守機制。RNA干擾技術不僅被廣泛地運用于基因功能研究,而且在基因治療中顯示出極大潛力基因治療：

RNA干擾技術的應用

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