血涂片復(fù)檢規(guī)則及應(yīng)用

血涂片復(fù)檢規(guī)則及應(yīng)用第一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二全血細胞分析檢測標本接收及拒收標本前處理血細胞分析儀檢測操作外周血涂片及染色顯微鏡鏡檢第二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/62血細胞發(fā)育成熟過程細胞內(nèi)容物復(fù)雜度、細胞核密度增加細胞內(nèi)DNA/RNA量減少巨核細胞系第三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/63細胞形態(tài)學鏡檢是判斷血細胞形態(tài)病理變化的金標準質(zhì)量高的“鏡檢”包括觀察炎癥引起的白細胞毒性變化；白血病細胞病理變化；貧血紅細胞形態(tài)變化；血小板形態(tài)特點，以及血液內(nèi)寄生蟲檢查。血細胞分析儀不可取代！理想的血液檢查：儀器計數(shù)細胞；鏡檢觀察形態(tài)。鏡檢費人費時，必須制定篩選標準。第四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/64分析儀白細胞分類結(jié)果可為鏡檢提供篩選手段,提高鏡檢效率,保證醫(yī)療質(zhì)量鏡檢是細胞形態(tài)分析的最終手段具有特異診斷意義的形態(tài)變化必須鏡檢

第五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/65三分類血球計數(shù)儀的血常規(guī)

復(fù)檢標準中華醫(yī)學會檢驗分會《三分群血細胞分析儀應(yīng)用指南》：儀器結(jié)果只有同時出現(xiàn)WBC、HGB、PLT及3個直方圖均正常且儀器無報警才可向臨床報告“分群”結(jié)果而不需要鏡檢。白細胞三分群的結(jié)果只適合在正常血象。第六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/66應(yīng)用五分類血細胞分析儀的復(fù)檢規(guī)則2005年，“國際血液學復(fù)檢協(xié)作組”提出41條規(guī)則。15個實驗室，使用CD-4000、LH-750、XE-2100、ADVIA-120，對13298份樣品檢測并同時進行鏡檢。整理驗證得出41條規(guī)則如此高檔儀器在常規(guī)檢查中需涂片復(fù)查的樣本仍有20-25%之多。第七頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/67ISLH復(fù)檢專家組的41條復(fù)檢規(guī)則關(guān)于血細胞計數(shù)—15條規(guī)則關(guān)于白細胞分類參數(shù)—7條規(guī)則關(guān)于網(wǎng)織紅細胞—1條規(guī)則關(guān)于可疑報警—18條規(guī)則第八頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/68ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（1）①新生兒：首次檢測標本；涂片鏡檢。②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti：超出線性范圍；稀釋標本后重新測定。③WBC、PLT：低于實驗室確認的儀器線性范圍；按SOP文件進行。④WBC、RBC、Hb、PLT：無結(jié)果；①檢查標本是否有凝塊，②重測標本，③如果維持不變，用替代方法計數(shù)。

第九頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/69ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（2）⑤WBC：首次結(jié)果<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。⑥WBC：3天內(nèi)Delta值超限，并<4.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。⑦PLT：首次結(jié)果<100×109/L或>1000×109/L；涂片鏡檢(計數(shù))。⑧PLT：Delta值超限的任何結(jié)果；涂片鏡檢(計數(shù))。

第十頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/610ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（3）⑨Hb：首次結(jié)果<70g/L或>其年齡和性別參考范圍上限20g/L；①涂片鏡檢，②確認標本是否符合要求。

⑩MCV：24h內(nèi)標本的首次結(jié)果<75fl或>105fl（成人）；涂片鏡檢。⑾MCV：24h以上的成人標本>105fl；①涂片鏡檢觀察大紅細胞相關(guān)變化，②如無大紅細胞相關(guān)變化，要求重送新鮮血標本，③如無新鮮血標本，報告中注明。第十一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/611ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（4）⑿MCV：24h內(nèi)標本的Delta值超限的任何結(jié)果；：確認標本是否符合要求。⒀MCHC：≥參考范圍上限20g/L；檢查標本是否有脂血、溶血、RBC凝集及球形紅細胞。⒁MCHC：<300g/L，同時，MCV正?；蛟龈撸粚ふ铱赡芤蜢o脈輸液污染或其他標本原因⒂RDW：首次結(jié)果>22%；涂片鏡檢。第十二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/612ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（5）⒃無DC結(jié)果或DC結(jié)果不全：無條件復(fù)檢；人工分類和涂片鏡檢。

⒄Neut＃：首次結(jié)果<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片鏡檢。

⒅Lym＃：首次結(jié)果>5.0×109/L（成人）或>7.0×109/L（<12歲）；涂片鏡檢。

⒆Mono＃：首次結(jié)果>1.5×109/L（成人）或>3.0×109/L（<12歲）；涂片鏡檢。

第十三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/613ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（6）(20)Eos＃：首次結(jié)果>2.0×109/L；涂片鏡檢。(21)Baso＃：首次結(jié)果>0.5×109/L；涂片鏡檢。(22)NRBC＃：首次出現(xiàn)任何結(jié)果；涂片鏡檢。(23)Ret＃：首次結(jié)果>0.10×109/L；涂片鏡檢。

第十四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/614ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（7）24.懷疑性報警[不成熟粒細胞(IG)/桿狀核中性粒細胞（Band）報警提示除外]：首次成人結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。25.懷疑性報警：首次兒童結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。26.WBC結(jié)果不可信報警：陽性報警；①確認標本是否符合要求并重測標本，②如出現(xiàn)同樣報警提示，檢查儀器，③如需要，進行人工分類。第十五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/615ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（8）27.RBC碎片：陽性報警；涂片鏡檢。28.雙形RBC：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。29.難溶性RBC：陽性報警；①檢查WBC直方/散點圖，②根據(jù)實驗室SOP證實Ret計數(shù)是否正確，③涂片鏡檢是否有異常形態(tài)的紅細胞。30.PLT聚集報警：任何計數(shù)結(jié)果；①檢查標本是否有凝塊，②涂片鏡檢估計PLT數(shù)，③如PLT仍聚集，按實驗室SOP進行。31.PLT報警：除PLT聚集外的PLT和MPV報警；涂片鏡檢。第十六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/616ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（9）32.IG報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。33.IG報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。34.左移報警：陽性報警；按實驗室SOP進行。35.不典型和（或）變異Lym：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。36.不典型和（或）變異Lym：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。37.原始細胞報警：首次結(jié)果出現(xiàn)陽性報警；涂片鏡檢。第十七頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/617ISLH推薦的41條復(fù)檢規(guī)則（10）38.原始細胞報警：3～7天內(nèi)WBC的Detal值通過，有以前確認的陽性報警結(jié)果；按實驗室SOP進行。39.原始細胞報警：WBC的Detal值超上限，有以前確認的陽性報警結(jié)果；涂片鏡檢。40.NRBC報警：陽性報警；①涂片鏡檢，②如發(fā)現(xiàn)NRBC，計數(shù)NRBC，重新計算WBC結(jié)果。41.Ret：散點/直方圖異常；①檢查儀器狀態(tài)是否正常，②如吸樣有問題，重測標本，③如結(jié)果維持不變，涂片鏡檢。第十八頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/618國內(nèi)的篩選標準2007年，中華醫(yī)學會檢驗分會成立“五分類血細胞分析儀復(fù)檢標準制定協(xié)作組”，擬制定復(fù)檢標準規(guī)則。國內(nèi)朱忠勇等提出7條復(fù)檢規(guī)則目前國內(nèi)五分類血細胞分析儀沒有統(tǒng)一的復(fù)檢規(guī)則標準，41條是較為公認的規(guī)則。第十九頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/619朱忠勇教授提出的7條復(fù)檢規(guī)則①儀器出現(xiàn)血細胞計數(shù)、分類計數(shù)及相關(guān)指數(shù)的提示信號（flags）②直方圖或散點圖出現(xiàn)異常③儀器檢測結(jié)果各參數(shù)之間出現(xiàn)矛盾④儀器檢測結(jié)果與臨床表現(xiàn)和初診、擬診明顯不符⑤臨床初診或提示有白血病等血液?、夼R床醫(yī)生指定要鏡檢，如重度感染病人，要求查中性粒細胞左移程度和毒性改變，不典型淋巴細胞，找寄生蟲等。⑦新生兒的血樣第二十頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/620目前我科還未制定適合于本室的復(fù)檢規(guī)則過程復(fù)雜：復(fù)檢規(guī)則的制定→應(yīng)用顯微鏡鏡檢對復(fù)檢規(guī)則進行評估→復(fù)檢規(guī)則的驗證（重復(fù)）。制定復(fù)檢規(guī)則的必要性。第二十一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/621血涂片復(fù)檢的必要性（1）實驗室認可的要求ISO15189：血液學檢查部門應(yīng)制定如下標準/程序并形成文件1血細胞分析的顯微鏡復(fù)檢標準（檢測結(jié)果出現(xiàn)異常計數(shù)，警示標志，異常散點圖等情況時結(jié)果的確認方法和程序）2血涂片制備和檢驗的書面程序/過程3對患者血液檢查和凝固試驗的標本進行重復(fù)檢驗的標準及程序CAP認可：HEM34200實驗室要建立標準以確保當分類計數(shù)儀標記出臨床異常結(jié)果時，必須對白細胞分類數(shù)據(jù)、直方圖、和/或血涂片進行檢查和復(fù)檢。HEM34350所有的血涂片必須有唯一的標識號，如病人的序列號，姓名等。HEM34450所有的血涂片至少保存一周，以便復(fù)查或參考。第二十二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/622血涂片復(fù)檢的必要性（2）1過分依賴儀器，弱化人的能力及責任。2無或較少進行顯微鏡下形態(tài)學檢查。3無或較少進行手工白細胞分類檢查。4漏診：白血病、傳單、寄生蟲感染等。5誤診：貧血、血小板減少性紫癜、白血病6丟失部分重要病理改變的信息。第二十三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/623復(fù)檢規(guī)則制定的原則1根據(jù)儀器對細胞形態(tài)識別能力，決定篩選標準的寬嚴程度。識別越差，標準越嚴。2篩選范圍要涵蓋所有人工鏡檢范圍。3在保證篩選質(zhì)量基礎(chǔ)上，盡量使復(fù)檢率低。4假陰性率是關(guān)鍵參數(shù)，具有診斷意義的重要參數(shù)不能出現(xiàn)假陰性。其它參數(shù)假陰性率也要盡可能最低。5在低假陰性率前提下,調(diào)整標準降低假陽性率第二十四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/624復(fù)檢規(guī)則制定的原則6白血病患者(不管初診還是復(fù)診)不能篩選。7臨床醫(yī)生提出閱片者,必須鏡檢。8篩選標準涉及的參數(shù),應(yīng)用的儀器能夠提供。9不同型號儀器篩選標準不同，同一型號儀器實驗室要求不同，標準也不同。第二十五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/625XE-2100復(fù)檢規(guī)則2008（1）①WBC：<3.0×109/L或>30.0×109/L；涂片鏡檢。②PLT：<80×109/L或>1000×109/L；涂片鏡檢。③Hb：<70g/L或>180g/L；涂片鏡檢。④MCV：<75fL或>105fL；涂片鏡檢。⑤MCHC：>380g/L；涂片鏡檢有無球形紅細胞。⑥RDW：首次結(jié)果>22%；涂片鏡檢。⑦DC：無結(jié)果或結(jié)果不全；涂片鏡檢和人工分類。第二十六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/626XE-2100復(fù)檢規(guī)則2008（2）⑧Neut＃：<1.0×109/L或>20.0×109/L；涂片鏡檢。

⑨Lym＃：>5.0×109/L；涂片鏡檢。

⑩Mono＃：>1.5×109/L；涂片鏡檢。

⑾Eos＃：>2.0×109/L；涂片鏡檢。⑿Baso＃：>0.5×109/L；涂片鏡檢。第二十七頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/627XE-2100復(fù)檢規(guī)則2008（3）⒀WBCIPMessage：白細胞異常散點圖；涂片鏡檢。⒁WBCIPMessage：未成熟粒細胞；涂片鏡檢。⒂WBCIPMessage：核左移；涂片鏡檢。⒃WBCIPMessage：異形淋巴細胞或原始細胞；涂片鏡檢。⒄WBCIPMessage：原始細胞；涂片鏡檢。第二十八頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/628XE-2100復(fù)檢規(guī)則2008（4）⒅WBCIPMessage：有核紅細胞；涂片鏡檢。⒆CBC+DC：新生兒標本；涂片鏡檢。⒇CBC+DC：血液病標本；涂片鏡檢。第二十九頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/629復(fù)檢內(nèi)容，內(nèi)涵豐富標本的復(fù)查人工對儀器報告的審核涂片鏡檢人工分類標本的確認和鑒定儀器運行狀態(tài)的檢查復(fù)檢≠人工分類第三十頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/630復(fù)檢內(nèi)容—細胞數(shù)量的驗證白細胞數(shù)量血小板數(shù)量在細胞分布適中部位瀏覽血片，根據(jù)其與紅細胞的比例估計白細胞數(shù)、血小板數(shù)。Ex:正常情況下，每10-40個紅細胞會見到1個血小板。第三十一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/631復(fù)檢內(nèi)容—白細胞分類計數(shù)和形態(tài)觀察白細胞分類計數(shù)粒細胞核象：核左移，核右移中毒性改變：中毒性顆粒、空泡變性、核固縮、核溶解。原幼細胞異形淋巴細胞其他第三十二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/632異形淋巴細胞？第三十三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/633異形淋巴細胞第三十四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/634嗜酸性粒細胞（成熟）第三十五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/635嗜堿性粒細胞（成熟）第三十六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/636單核細胞第三十七頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/637中毒顆粒第三十八頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/638MonocytosisImmatureGran?LeftShift?DIFF:單核散點較多。中性上方幼稚細胞區(qū)域出現(xiàn)少量散點IMI:幼稚細胞區(qū)域出現(xiàn)相應(yīng)的散點IG%：儀器：3.5%鏡檢：中幼粒0.5%晚幼粒3.5%單核：儀器：18.7%鏡檢：17.5%第三十九頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/639AbnLympho/L-Blasts?鏡下見到分葉的異常淋巴細胞達15%DIFF散點圖上，正常淋巴和單核的區(qū)域有較多的散點40第四十頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二Acutemyeloidleukemia(AML)-M1DIFF:白細胞分化不良IMI:顯示大量原始細胞鏡檢:77.5%的原始細胞第四十一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/641Acutelymphocyticleukemia(ALL)-L1DIFF:淋巴至OTHER區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點，中性粒細胞上方有少量散點IMI:幼稚細胞和原始細胞區(qū)域也出現(xiàn)少量紅色散點，因此儀器提示原始細胞和幼稚粒細胞。鏡檢:93%原始細胞。第四十二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/642復(fù)檢內(nèi)容—紅細胞形態(tài)觀察大小形狀血紅蛋白含量細胞內(nèi)包涵體紅細胞異形性第四十三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/643正常紅細胞第四十四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/644靶形紅細胞第四十五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/645橢圓形紅細胞第四十六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/646緡錢狀紅細胞第四十七頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/647豪-周氏小體（Howell-Jollybody）第四十八頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/648嗜堿性點彩紅細胞第四十九頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/649Hypochromia/Anemia/IronDeficiency?/Fragments?

/PLTAbnDistributionRET：大量紅細胞碎片血小板直方圖異常，阻抗法將部分紅細胞碎片當成血小板計數(shù)，而核酸熒光染色法排除了紅細胞碎片：PLT-I>PLT-O，PLT-O與鏡檢結(jié)果接近，儀器以PLT-O作為最終報告第五十頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/650復(fù)檢內(nèi)容—血小板形態(tài)觀察大小血小板聚集血小板數(shù)量評估第五十一頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/651大血小板第五十二頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/652復(fù)檢內(nèi)容—其他病理成分寄生蟲真菌第五十三頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/653真菌第五十四頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/654瘧原蟲(左：環(huán)狀體右：裂殖體)第五十五頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/655錐蟲第五十六頁，共六十二頁，編輯于2023年，星期二2023/6/656血涂片復(fù)檢的報告方式描述性報告異常病理成分的分級報告