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文檔簡介
信號肽特點(diǎn):10-4010-15個(gè)高度疏水氨基酸組成的肽段;N端至少含一個(gè)帶正電荷基團(tuán)(如Ly、Ar;C端有被酶識別位點(diǎn),其上游常有疏水性強(qiáng)的53多為為Ala。首先是信號肽識別蛋白結(jié)合的核蛋白選擇性的連接到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的SRP信號識別蛋白轉(zhuǎn)移進(jìn)行下一輪循環(huán)。位于分泌蛋白前體的端2)號肽酶切除信號肽的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制:信號肽運(yùn)作的機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜,有關(guān)組分包括信號肽識別顆粒及其受體、信號序列受體(SS、核糖體受體和信號肽酶復(fù)合物。信號肽發(fā)揮作用時(shí),首先SRP(即信號肽與SSRSRP及其受體結(jié)合、核糖體及其受體的結(jié)合引導(dǎo)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)后,在信號肽酶復(fù)合物的作用下,已完成使命的信號肽被切除。工酶?初級同工酶產(chǎn)生的原因是由于酶蛋白的編碼基因不同因相同,但基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA或翻譯產(chǎn)物加工過程不同。1)在遺傳學(xué)和分類學(xué)上,同工酶提供了一種精良的判別遺傳標(biāo)志的工具;育和系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系。3)專一性、酶的變構(gòu)性等性質(zhì)的差異,從而解釋它們代謝功能的差異。4)分化的分子標(biāo)記。法鑒定。生物膜主要有哪些生物學(xué)功能?任舉一例說明膜結(jié)構(gòu)與功能的密切關(guān)系。1)區(qū)域化或房室化2)物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸3)能量轉(zhuǎn)換(氧化磷酸化)4)細(xì)胞識別研究蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)有哪些意義?(N—C端)從而決定其高級結(jié)構(gòu),從而決定其功能。一級結(jié)構(gòu)的種屬差異與分子進(jìn)化(細(xì)胞色素C)一級結(jié)構(gòu)的變異與分子?。ㄧ牭稜罴t細(xì)胞)DNA的變性、復(fù)性和雜交?DNA的雜交在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中的應(yīng)用?試舉例說明。DNA變性是指在一系列物理化學(xué)因素作用下DNA遭到破壞,DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)部分解體,或全部解離成兩條單鏈DNA,叫變性。引起變性的外界條件消除后(如加熱變性后再緩慢降溫雙螺旋,成為復(fù)性。不同來源的DNA分子放在一起熱變性,然后慢慢冷卻,讓其復(fù)性,若這些異源DNADNA與互補(bǔ)的RNA以發(fā)生雜交。核酸的雜交在分子生物學(xué)和生物化學(xué)中應(yīng)用廣泛,如將已知基因的DNA制成具有同位素標(biāo)記的DNA片段---DNA探針,用其去檢測未知DNA分子。蛋白質(zhì)特定構(gòu)象形成的原因是什么?環(huán)境因素對蛋白質(zhì)構(gòu)象形成有無影響?為什么?蛋白質(zhì)特定構(gòu)象形成的驅(qū)動力有R-天然構(gòu)象的形成過程是一個(gè)自發(fā)的過程。試比較光合磷酸化和氧化磷酸化能量轉(zhuǎn)化機(jī)制的異同。線粒體內(nèi)膜、葉綠體類囊體膜和細(xì)菌的質(zhì)膜是能量轉(zhuǎn)換的主要場所,光合磷酸化的能量是來自光能的激發(fā),是儲存能量,氧化磷酸化能量是來自底物的分解,釋放能量。激素受體有哪兩大類?試比較其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。一性受體結(jié)合,結(jié)合后激活膜上的腺苷酸環(huán)化酶系統(tǒng),在mg+存在的情況下腺苷酸環(huán)化酶ATP轉(zhuǎn)化為cAMP,cAMP蛋白激酶PKA,促使細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)發(fā)生磷酸化反應(yīng),從而引起靶細(xì)胞各種生理生化反應(yīng)。入細(xì)胞。在進(jìn)入細(xì)胞之后,先于細(xì)胞內(nèi)的胞漿受體結(jié)合,形成激素胞漿受體結(jié)合物而進(jìn)入核內(nèi)受體復(fù)合物從而激發(fā)DNAmRNA,誘導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,引起相應(yīng)的生物效應(yīng)。分子篩層析和SDS-各自特點(diǎn)和適用范圍。分離物質(zhì)的分子大?。ㄖ睆剑疵摃r(shí),大分子物質(zhì)由于直徑大于凝膠網(wǎng)孔而不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理是當(dāng)SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合后,蛋白質(zhì)分子即帶乃至消除了,與此同時(shí)蛋白質(zhì)在SDS,所以各種SDS-就反映了分子量的大小??捎糜跍yPH值和蛋白質(zhì)的亞基數(shù)(Gly-的混合物先在PH5.6緩沖系統(tǒng)中進(jìn)行電泳(I),再轉(zhuǎn)90。在PH7.2(II)該試驗(yàn)電泳圖譜,并簡述理由。什么是抗體?試以IgG的結(jié)構(gòu)為例,分析抗體的重要功能,并簡要說明抗體的多樣性。抗體分子的多樣性和獨(dú)特的生物學(xué)功能都能從其分子結(jié)構(gòu)上找出依據(jù),以下以IgG簡單說明:IgGY4條重鏈的N-末端和相鄰輕鏈協(xié)作形成一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn),所以IgG22個(gè)抗原分子結(jié)合并交叉連接從而使抗原沉淀。IgG每條鏈在N末端有一可變區(qū),在C末端有一不變區(qū),由于重輕鏈N結(jié)合不同抗原的不同專一性結(jié)合位點(diǎn)??贵w的結(jié)構(gòu)域。輕鏈折疊形成24個(gè)結(jié)構(gòu)域,一個(gè)可變區(qū)和三個(gè)不可變區(qū)。FabFcIgG釋放出YFab片段,因?yàn)镕ab只有一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn),所以不能與抗原交叉連接。釋放出的Y型分子的柄部稱為FcCFc有觸發(fā)破壞抗原的作用。例如觸發(fā)補(bǔ)體系統(tǒng)和誘導(dǎo)白細(xì)胞吞噬病原。什么是受體?有何特征和類別?簡述一種分離提純受體的方法、原理。受體是細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞表面的一種天然分子,可以識別并特異地與有生物活性的化學(xué)信號分子(配體效應(yīng)。絕大多數(shù)受體為蛋白質(zhì),極少數(shù)是非蛋白受體。受體與配體結(jié)合具有特異性、親和性、飽和性受體分為細(xì)胞內(nèi)受體(甾醇類激素)和細(xì)胞外受體(G具有酶活性的受體。分子克隆技術(shù)提取微量受體:從細(xì)胞中提取所有微量mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,將其重組入cDNA,并表達(dá)成表面受體。有一種七肽具有神經(jīng)傳導(dǎo)抑制劑的作用AlaPheLysFDNB反應(yīng)后經(jīng)酸水解,釋放出DNP—Ala。用胰蛋白酶處理產(chǎn)生組成為Ala3Phe1的四肽和組成為Ala2、Lys1的三肽。與胰凝乳蛋白酶作用則生成游離的Ala七肽的氨基酸序列。1)FDNBDNP—Ala:N末端是Ala-2)酶作用則生成游離的Ala-Phe–Ala3)Ala3Phe1Ala2、Lys1的三肽:Ala-Ala-Phe–Ala和Ala-Ala-Lys所以推除Ala-Ala-Lys-Ala-Ala-胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)法:水解芳香族氨基酸的羧基側(cè)肽鍵(色Trp、酪Tyr、苯丙Phe)胰蛋白酶法:水解賴氨酸、精氨酸Arg的羧基側(cè)肽鍵 溴化脯法:水解蛋氨酸Met羧基側(cè)的肽鍵畫出肌紅蛋白和血紅蛋白的氧合曲線,并討論各自氧合曲線與其功能相關(guān)性。什么是雙信使信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),試述胞外信息通過該系統(tǒng)在胞內(nèi)得以傳遞的機(jī)制。激素通過結(jié)合到細(xì)胞表面的膜受體上,激活G蛋白,G蛋白開啟磷酯酶從而使磷酸酰肌醇PIP)分解為肌醇三磷酸IP)和二酰甘油D。DGPKCThrSer性,引起生理生化反應(yīng)。IP3則作用于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜受體,打開Ca+Ca+Ca+的釋放改變CaM白的生物活性,從而完成激素的聯(lián)級放大作用,在多種細(xì)胞內(nèi)引起廣泛的生理效應(yīng)。Ca+的釋放也活化了PKC,從而改變一系列酶的活性,引起生理生化反應(yīng)。試述三種直接或間接的方法,以證明某種外源基因已在轉(zhuǎn)基因生物中存在或表達(dá)。記和顯色標(biāo)記。對噬菌體而言,噬菌斑的形成則是其自我選擇的結(jié)果。差別雜交或扣除雜交法分離克隆基因:扣除雜交就是用一般細(xì)胞的cDNA與特殊細(xì)胞的cDNA雜交先扣除一般共有的cDNA,再將剩余的特異的cDNA進(jìn)行克隆。表達(dá)。細(xì)菌菌落或噬菌斑的原位雜交使菌體裂解,DNADNA結(jié)合到膜上——32P-cDNA放射性cDNA雜交的菌斑。2.什么是核酶和抗體酶?它們和酶有什么不同?核酶,把對RNA具有催化活性的RNA叫做核酶,化學(xué)本質(zhì)為RNA,一般酶化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。之上還具有相應(yīng)免疫學(xué)性質(zhì)。C結(jié)構(gòu)的種屬差異和保守性,闡明其結(jié)構(gòu)和功能的統(tǒng)一性。對比不同有機(jī)體中表現(xiàn)同一功能的蛋白質(zhì)的氨基酸序列細(xì)胞色素C35個(gè)不變的AAC的生物功能所不可缺結(jié)合細(xì)胞色素C還原酶和氧化酶。細(xì)胞表面受體主要有哪些類型?各具有什么特點(diǎn),作用機(jī)理有何區(qū)別離子通道性蛋白(配體閘門通道:配體結(jié)合 通道打開G-蛋白偶聯(lián)型受體:配體結(jié)受體構(gòu)象發(fā)生改--------G蛋白激活 靶酶激活具有酶活性的受體:配體結(jié)合 酶激活1.敘述血紅蛋白的結(jié)構(gòu)特征。這種結(jié)構(gòu)和它的功能有什么關(guān)系?血紅蛋白和氧的結(jié)合受哪些因素的影響?人體內(nèi)的血紅蛋白由四個(gè)亞基組成,分別為兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基,自動組裝成α2β2形構(gòu)的小分子,在其中心有一個(gè)亞鐵離子。氧分子更容易尋找到血紅蛋白的另一個(gè)亞基結(jié)合3.什么是遺傳信息傳遞的中心法則?你認(rèn)為用中心法則描述的遺傳信息傳遞規(guī)律還有哪些問題有待補(bǔ)充?為什么說朊病毒的發(fā)現(xiàn)是對此法則的挑戰(zhàn)?目前普騙認(rèn)為遺傳信息不能從蛋白質(zhì)流向核酸,但是DNA是否可以不經(jīng)過RNA直接作為指令蛋白質(zhì)合成的模板,尚待實(shí)驗(yàn)證明。PrionPrPs,PrPsc可引起包括瘋牛病在內(nèi)的一系列致死性神經(jīng)變性疾?。ńy(tǒng)稱prion病。以α的對蛋白酶敏感的不具有感染能力的PrPCβ為主的對蛋白酶抵抗的具有感染能力的不溶性PrPScPrPsc與細(xì)胞PrPC,以PrPscPrPCPrPscPrPsc,PrPC成不溶性的PrPsc,腦組織形成淀粉樣斑塊直至死亡則。而PrPsc不含核酸,它是通過與PrPc相互作用,誘導(dǎo)其變構(gòu)而轉(zhuǎn)變成PrPsc,從而實(shí)現(xiàn)其增殖過程不涉及核酸復(fù)制,可見這與中心法則明顯相左。2.試舉一例,簡要說明在生命活動的一些重要過程中是如何通過蛋白質(zhì)(或酶)與核酸的相互作用而實(shí)現(xiàn)某一功能的。DNA雙,DNA聚合酶以親代DNA,復(fù)制出子代DNARNA合體,根據(jù)mRNA控制也是通過生物大分子的相互作用而實(shí)現(xiàn)的2~15%基因被表達(dá)。闡述核酸、蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)研究和大規(guī)模測序的必要性及其對生命科學(xué)發(fā)展的重要影響物學(xué)功能多樣性的基礎(chǔ),而蛋白質(zhì)和核酸獨(dú)特的性質(zhì)和功能則是其結(jié)構(gòu)的反映因?yàn)樯锏倪z傳信息儲存于DNA的核苷酸序列中,生物界物種的多樣性寓于DNA種核苷酸千變?nèi)f化的不同排列之中DNA分子上四種核苷酸的排列順序即DNAAA環(huán)境的影響,因此研究蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系具有十分重要的意義。4.分離純化得到一種蛋白質(zhì),至少設(shè)計(jì)兩條路線,來克隆出該蛋白質(zhì)的基因或1)測出氨基酸的序列——合成cDNA探針——用So
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