醫(yī)學(xué)專題-卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)

§3.2體外受精和早期(zǎoqī)胚胎培養(yǎng)一、教學(xué)目標(biāo)：1.簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。2.簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法。3.認(rèn)同體外受精在家畜(jiāchù)快速繁殖中的重要意義。二、教學(xué)重點(diǎn)：1.體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。2.哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。三、教學(xué)難點(diǎn)：1.

卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。2.

精子的采集和獲能。第一頁，共三十二頁。編輯ppt1978年7月25日世界(shìjiè)首例試管嬰兒第二頁，共三十二頁。編輯ppt1988年3月10日我國首例試管嬰兒(shìɡuǎnyīnɡér)第三頁，共三十二頁。編輯ppt1992年我國首例三胞胎試管嬰兒(shìɡuǎnyīnɡér)第四頁，共三十二頁。編輯ppt根據(jù)資料回答下列問題：1.資料上用到了什么生物技術(shù)？

試管嬰兒技術(shù)（包括體外受精、胚胎體外培養(yǎng)）和胚胎移植技術(shù)。2.試管嬰兒和母親正常懷孕(huáiyùn)，生產(chǎn)的過程有何異同？相同之處：都通過有性生殖產(chǎn)生，在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植。第五頁，共三十二頁。編輯ppt試管動物技術(shù)：通過

使卵子和精子在

下成熟和受精，并通過培養(yǎng)(péiyǎng)發(fā)育成

后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。體外條件(tiáojiàn)人工(réngōng)操作早期胚胎第六頁，共三十二頁。編輯ppt國產(chǎn)奶牛：年均產(chǎn)奶量3000公斤左右國際良種奶牛：年均產(chǎn)奶量10000公斤左右引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬－5萬元；牛的生育率低，一頭牛一胎只生一只，一生(yīshēng)只能生育四五次。牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?，其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右；公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了。一、從試管(shìguǎn)牛說起第七頁，共三十二頁。編輯ppt試管動物技術(shù)(jìshù)過程：第一步：體外受精(tǐwàishòujīnɡ)第二步：胚胎的早期(zǎoqī)培養(yǎng)第三步：胚胎移植第八頁，共三十二頁。編輯ppt胚胎(pēitāi)移植采集(cǎijí)良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)(péiyǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖第九頁，共三十二頁。編輯ppt1982年世界(shìjiè)首例試管牛犢問世實(shí)現(xiàn)良種?？焖俅罅糠敝?fánzhí)首先要做的是

和

的培養(yǎng)。體外受精(tǐwàishòujīnɡ)早期胚胎第十頁，共三十二頁。編輯ppt主要包括

、

和

等幾個(jǐɡè)主要步驟。概念：采取(cǎiqǔ)雌性動物的

和雄性動物的

，使其在

中受精。二、體外受精(tǐwàishòujīnɡ)卵母細(xì)胞精子試管卵母細(xì)胞的采集精子的獲取受精第十一頁，共三十二頁。編輯ppt1.卵母細(xì)胞的采集(cǎijí)和培養(yǎng)對不同動物,采集卵母細(xì)胞的方法不同。實(shí)驗(yàn)動物如小鼠、兔，以及家畜豬、羊等卵細(xì)胞的采集：

最常用的方法是卵巢(luǎncháo)經(jīng)過

處理，具體做法是給供體注射

，使一頭母畜一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子，之后從

中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。超數(shù)排卵促性腺激素輸卵管第十二頁，共三十二頁。編輯ppt大家畜或大型(dàxíng)動物，如牛，卵細(xì)胞的采集：

從屠宰場已屠宰母畜的

中采集卵母細(xì)胞，也可以借助

、

或

等工具確定卵泡位置，直接從活體動物中吸取泡卵液（連同卵母細(xì)胞）取出，在體外進(jìn)行人工培養(yǎng)，使其成熟。卵巢(luǎncháo)超聲波(B超)探測儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡第十三頁，共三十二頁。編輯ppt牛卵巢(luǎncháo)第十四頁，共三十二頁。編輯pptB超活采儀第十五頁，共三十二頁。編輯ppt第十六頁，共三十二頁。編輯pptB超引導(dǎo)法：借助超聲波探頭和屏幕的引導(dǎo)，從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和采卵針的采卵器通過陰道插入子宮(zǐgōng)，同時通過將卵巢貼在探頭上。根據(jù)B超屏幕所顯示的卵泡位置，利用采卵針穿刺卵泡并同時抽吸卵母細(xì)胞。第十七頁，共三十二頁。編輯ppt第十八頁，共三十二頁。編輯ppt第十九頁，共三十二頁。編輯ppt活體(huótǐ)采集的牛卵母細(xì)胞第二十頁，共三十二頁。編輯ppt第二十一頁，共三十二頁。編輯ppt卵母細(xì)胞的成熟(chéngshú)培養(yǎng)：CO2培養(yǎng)箱第二十二頁，共三十二頁。編輯ppt培養(yǎng)箱第二十三頁，共三十二頁。編輯ppt培養(yǎng)箱第二十四頁，共三十二頁。編輯ppt2.精子(jīngzǐ)的收集和獲能收集精子的方法有：假陰道(yīndào)法手握法電刺激法第二十五頁，共三十二頁。編輯ppt在體外受精前，要對精子進(jìn)行(jìnxíng)獲能處理。通常采用的體外獲能方法有

和

兩種。對于

、

和

的精子，一般采用培養(yǎng)法；對于

、

等家畜的精子常用化學(xué)法。培養(yǎng)法：精子在獲能液中獲能?；瘜W(xué)誘導(dǎo)法：精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用化學(xué)藥物誘導(dǎo)獲能。培養(yǎng)(péiyǎng)法化學(xué)(huàxué)誘導(dǎo)法嚙齒動物家兔豬牛羊第二十六頁，共三十二頁。編輯ppt3.受精(shòujīng)獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下在或中完成受精(shòujīng)過程。獲能溶液(róngyè)專用受精溶液第二十七頁，共三十二頁。編輯ppt三、胚胎的早期(zǎoqī)培養(yǎng)概念：是應(yīng)用人工(réngōng)創(chuàng)造條件，對獲取的進(jìn)行體外培養(yǎng)。培養(yǎng)液成分：水、無機(jī)鹽、糖類、維生素、氨基酸、激素、核苷酸、血清等早期(zǎoqī)胚胎第二十八頁，共三十二頁。編輯ppt不同動物胚胎移植時間不同牛、羊：桑椹胚或囊胚階段小鼠、家兔：卵裂(luǎnliè)期或囊胚階段試管嬰兒：8個或16個細(xì)胞階段胚胎(pēitāi)培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時，可將其取出向受體移植或冷凍保存。第二十九頁，共三十二頁。編輯ppt第三十頁，共三十二頁。編輯ppt試管動物與克隆動物相比生殖方式：技術(shù)手段：遺傳(yíchuán)規(guī)律：有性生殖(yǒuxìngshēngzhí)無性生殖核移植技術(shù)(jìshù)、胚胎移植遵循無體外受精胚胎移植第三十一頁，共三十二頁。編輯ppt內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)§3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)。1.卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。2.精子的采集和獲能。試管嬰兒技術(shù)（