血漿循環(huán)MicroRNA提取檢測及其在冠心病的表達(dá)課件

血漿循環(huán)MicroRNA提取檢測及其在冠心病的表達(dá)血漿循環(huán)MicroRNA提取檢測及其在冠心病的表達(dá)血漿循環(huán)MicroRNA提取檢測及其在冠心病的表達(dá)血漿循環(huán)MicroRNA提取檢測及其在冠心病的表達(dá)鄭志偉勞海燕余細(xì)勇林秋雄朱杰寧王玲孫碩陳紀(jì)言鐘詩龍△廣東省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究中心，廣東省心血管病研究所講述目錄簡述血漿循環(huán)miRNA提取檢測的方法采用前述建立的方法，在25例冠心病患者和30例健康對照中檢測miRNA的表達(dá)情況。在細(xì)胞實驗進(jìn)一步探討miRNA的作用機制學(xué)習(xí)興趣是學(xué)生對學(xué)習(xí)活動所抱的一種穩(wěn)定而積極的心理傾向，是學(xué)生學(xué)好每一個學(xué)科的關(guān)鍵。愛因斯坦有句名言：“興趣是最好的老師?！惫糯蠼逃铱鬃诱f：“知之者不如好之者，好之者不如樂之者。”這都說明了興趣的作用。因此，在物理教學(xué)中，我們要講究激趣方法，點燃學(xué)生學(xué)習(xí)物理的興趣之火，充分調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)物理的積極性和主動性，從而變“要我學(xué)”為“我要學(xué)”，變“被動接受”為“主動探究”，提高物理教學(xué)的實效性。一、導(dǎo)入激趣“好的開端是成功的一半。”好的導(dǎo)語可以在上課之初就激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，使學(xué)生產(chǎn)生學(xué)習(xí)的興趣和動力，進(jìn)而以集中的精力、良好的心理狀態(tài)投入到新課的學(xué)習(xí)當(dāng)中。所以教師在設(shè)計導(dǎo)語時，要精心推敲、細(xì)心安排、聯(lián)系實際和新課內(nèi)容，尋找激起學(xué)生需要心理的素材，讓需要來啟動學(xué)生的興趣，讓興趣牽引著學(xué)生走進(jìn)新課。一個生動具體的事例、一段準(zhǔn)確優(yōu)美的語言、一個耐人尋味的懸念等都能一下子抓住學(xué)生的心，吸引學(xué)生的注意力，調(diào)動學(xué)生的情感，為課堂教學(xué)提供一個良好的開端。二、設(shè)疑激趣古人云：“學(xué)起于思，思源于疑。”“學(xué)貴有疑，小疑則小進(jìn)，大疑則大進(jìn)。”愛因斯坦說過：“提出一個問題往往比解決一個問題更重要。”真理誕生于100個問號之后。學(xué)生思維的良好情境源于疑難。提問對思維的影響可以比喻為撥火對火的助燃，它擾亂了原有知識在頭腦中的固有安排，帶來了新的配合，產(chǎn)生了新的概念和理論，可見“解決問題”是思維活動的動力。在物理教學(xué)中，我們可以根據(jù)某一知識點設(shè)置恰當(dāng)?shù)膯栴}情境，使學(xué)生處于最佳的心理狀態(tài)，并在解決問題的過程中，加深對知識的理解。這樣一方面使學(xué)生掌握了知識，另一方面也鍛煉了學(xué)生的思維能力。例如在教學(xué)《自感》時，教師可以設(shè)疑：“什么是自感現(xiàn)象呢？自感現(xiàn)象區(qū)別于一般的電磁感應(yīng)現(xiàn)象的特點是什么呢？”結(jié)合教材內(nèi)容設(shè)置具有思維價值的問題，啟發(fā)學(xué)生思考，可以順利引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)入角色，誘發(fā)學(xué)生的問題意識，激活學(xué)生的思維興趣，調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，促進(jìn)學(xué)生對一些科學(xué)現(xiàn)象作深入的思考探究，從而提高學(xué)生探究的能力。三、好奇激趣好奇是研究某一事物的第一驅(qū)動力。學(xué)習(xí)過程中的好奇心理能誘發(fā)濃厚的學(xué)習(xí)興趣。在物理教學(xué)過程中，充分利用學(xué)生的好奇心理，引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行探究學(xué)習(xí)，從探究中獲得新鮮的感受，是促使學(xué)生產(chǎn)生學(xué)習(xí)興趣的重要途徑。例如在教學(xué)《光的衍射》時，學(xué)生對光的衍射十分好奇，于是筆者分發(fā)單縫衍射觀察片，每片觀察片刻有兩條寬度不同的單縫。讓學(xué)生通過單縫分別觀察設(shè)在教室前、后的紅色燈、藍(lán)色燈的衍射現(xiàn)象，然后教師設(shè)疑：①同一縫紅色衍射條紋與藍(lán)色衍射條紋是否有區(qū)別？②同一種色光，單縫寬度不同時衍射條紋是否有區(qū)別？然后讓學(xué)生通過單縫觀察白熾燈的衍射圖樣。學(xué)生經(jīng)過觀察、分析、歸納，最后總結(jié)出規(guī)律：①波長一定時，單縫窄的中央條紋寬，各條紋間距大；②單縫不變時，光波波長越長的中央條紋越寬，條紋間距越大；③白熾燈的單縫衍射條紋中央為白色亮紋，兩側(cè)為彩色條紋，而且外側(cè)呈紅色，靠近光源內(nèi)側(cè)的為紫色。這樣利用學(xué)生的好奇心理，引導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行觀察分析、思考探究，愉快地學(xué)習(xí)了光的衍射這一知識。四、實驗激趣物理是一門以實驗為基礎(chǔ)的自然科學(xué)，而中學(xué)生對實驗特別喜歡。因此在物理教學(xué)中，教師要充分利用學(xué)生的這種特征和興趣，組織好實驗教學(xué)，“投其所好”，點燃學(xué)生的興趣之火，激發(fā)學(xué)生的求知欲望，調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性。讓學(xué)生在物理實驗中動手、動眼、動腦，通過實驗進(jìn)一步幫助學(xué)生理解概念，掌握物理規(guī)律。1.演示實驗激趣由演示實驗抽象概括出的物理概念和規(guī)律，學(xué)生易理解、易掌握，學(xué)習(xí)興趣也倍增。因此在教學(xué)時，教師必須認(rèn)真做好演示實驗，幫助學(xué)生理解物理概念和規(guī)律，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。例如在教學(xué)《光的干涉》時，為了讓學(xué)生了解雙縫的干涉現(xiàn)象，筆者做了以下演示實驗：先用加濾色片后得到的單色紅光進(jìn)行演示，然后改用激光源做雙縫干涉實驗，并使雙縫與屏幕的距離加大，這樣在屏幕上得到條紋距離大，更為清晰的明暗相間的圖樣。然后展示雙縫干涉圖樣，讓學(xué)生注意觀察圖樣，回答圖樣的特點：①明暗相間；②亮紋間等距，暗紋間等距；③兩縫S1、S2中垂線與屏幕相交的位置是亮條紋――中央亮紋。這樣，通過演示實驗，有利于學(xué)生對知識的建構(gòu)，更有利于激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。2.學(xué)生實驗激趣在物理教學(xué)中，組織學(xué)生自己動手做實驗，可以極大地滿足學(xué)生動手的愿望，調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。因此在教學(xué)中，教師要創(chuàng)造條件，多讓學(xué)生自己動手進(jìn)行實驗，從而調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，提高學(xué)生的實驗?zāi)芰Α＠缭诮虒W(xué)《光的偏振》時，為了讓學(xué)生更好地掌握光的偏振知識，筆者讓學(xué)生自己動手做實驗。找兩片偏振片（如看立體電影時用的鏡片）疊放在一起，放在報紙或書本上，旋轉(zhuǎn)其中的一片，觀察有什么現(xiàn)象發(fā)生并解釋這一現(xiàn)象。這樣讓學(xué)生自己動手進(jìn)行實驗，有利于幫助學(xué)生更好地理解知識，有利于學(xué)生觀察分析能力的提高，有利于調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性?？傊谖锢斫虒W(xué)中，教師要根據(jù)學(xué)生的特征和教材的要求，講究激趣方法，使學(xué)生始終保持濃厚的學(xué)習(xí)興趣，讓學(xué)生學(xué)得有趣、學(xué)得愉快、學(xué)得主動，就能真正地提高物理教學(xué)的實效性。（作者系安徽師范大學(xué)物理與電子信息學(xué)院2010級教育碩士，現(xiàn)任教于安徽省潁上第二中學(xué)）情感貫穿于寫作始終，是作文的血脈所在，它可以使作文真正的“活”起來，所以這就要求學(xué)生在寫作時，能夠具有一定的情感體驗，細(xì)致的表達(dá)自己的思想感情，這樣寫出的文章才能夠深情并茂，打動閱讀者的心。在初中作文教學(xué)中，教師應(yīng)該關(guān)注學(xué)生的心理和情感體驗，善于抓住一切有效時機，努力培養(yǎng)學(xué)生的情感，調(diào)動學(xué)生的情感，并引導(dǎo)學(xué)生能夠?qū)⑶楦信c寫作知識、寫作技巧有機的結(jié)合在一起，從而使學(xué)生寫出“有血有肉”的好文章。一、感悟生活，激發(fā)寫作興趣在教學(xué)中，我們經(jīng)常會聽到“文以情動人”、“情景交融”，這些都道出了感情在寫作中的重要地位，因為沒有感情的文章不能稱之為好文章。因此，教師要善于從學(xué)生的年齡特征、認(rèn)知能力、學(xué)習(xí)水平和語言表達(dá)能力出發(fā)，引導(dǎo)學(xué)生感悟生活，體驗生活的美好，不斷激發(fā)學(xué)生的寫作興趣。比如，在帶領(lǐng)學(xué)生開展以“土地”為話題，寫一篇抒情性的文章或一首小詩時，在上課時，我對學(xué)生們說：“泥土，司空見慣，我們每天都和他打著交道，一說到泥土，可能許多學(xué)生眼前浮現(xiàn)出的是下雨天的泥濘小路，晴天時的塵土飛揚，以及農(nóng)民利用泥土種莊稼，這些都是我們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ姷那榫埃绻?，我們在寫作時，都以此為話題，但也會局限我們的視野，使寫出的文章千篇一律。那見同學(xué)們想一想，我們是否能過以泥土為載體，讓泥土做一次旅行，來感悟一下這個世界的真與善，善與惡，丑與美，同學(xué)們可以插上想象的翅膀，真正走進(jìn)泥土的世界，也可以利用泥土去感悟生活?！睂W(xué)生們聽到我的引導(dǎo)后，思維變得豁然開朗，在寫作時，我也要求學(xué)生能夠以小見大，注意寫作細(xì)節(jié)，要著重表現(xiàn)土地情思，要情真意切。在學(xué)生交上來的作文中，我發(fā)現(xiàn)許多學(xué)生在寫作時，能夠?qū)⒆约旱那楦腥谌氲轿恼轮?，還有的學(xué)生，以土地為話題，展開了豐富的想象，寫出的文章內(nèi)容豐富，情感充實，具有非常高的可讀性。在平時的教學(xué)中，我也會引導(dǎo)學(xué)生，不斷的從生活中積累寫作素材，歷練思維，注重情感體驗，這樣能夠使學(xué)生在寫作時，達(dá)到信手拈來、隨心成文的境界。脫離學(xué)生實際生活環(huán)境的題材，會挫傷學(xué)生寫作的積極性，因此在作文教學(xué)中，教師要善于從學(xué)生的實際生活出發(fā)，利用學(xué)生的積極情感，觸動學(xué)生的心弦，誘發(fā)學(xué)生的情感，從而激發(fā)學(xué)生對寫作濃厚的學(xué)習(xí)興趣，促使學(xué)生在寫作時心境達(dá)到最佳狀態(tài)。二、情感調(diào)動，體驗寫作情趣長期以來，許多學(xué)生“談文色變”，對作文“敬而遠(yuǎn)之”，對于教師所布置的寫作任務(wù)偷工減料，能不寫則不寫，即使寫了也是套用優(yōu)秀作文，寫出的文章生搬硬套，不具有自己的真情實感，教師對于學(xué)生的這一行為也是“望題興嘆”，久而久之也就覺得順其自然了。教師和學(xué)生的這一錯誤心態(tài)導(dǎo)致了作文教學(xué)質(zhì)量的止步不前，在素質(zhì)教育全面推行的今天，作文教學(xué)，教師要充分調(diào)動學(xué)生的寫作情趣，激發(fā)學(xué)生的寫作興趣，引導(dǎo)學(xué)生體驗寫作的樂趣。比如，在?Я煅?生練習(xí)“笑對失敗”為話題的作文時，在開展這次作文講解之前，我先帶領(lǐng)學(xué)生，舉行了“微笑面對生活”的綜合性學(xué)習(xí)活動，請學(xué)生利用課余時間廣泛搜集相關(guān)資料，閱讀名人傳記，這些充滿意義的活動都為本次“笑對失敗”為話題的作文奠定了良好的教學(xué)基礎(chǔ)。在上課時，首先，我為學(xué)生念了一篇中考滿分作文，請學(xué)生認(rèn)真聽講，仔細(xì)分析本篇作文作者在失敗時的情感歷程，認(rèn)真思考作者是怎樣走出失敗陰影的。因為文章作者失敗的經(jīng)歷與許多學(xué)生的經(jīng)歷有著相似之處，所以當(dāng)我念到作者情感變化時，能激起大多數(shù)學(xué)生的情感共鳴。閱讀完畢，給予學(xué)生幾分鐘思考的時間，請學(xué)生理清敘事思路，深刻體驗作者情感，然后，我請學(xué)生站起來說一說自己笑對失敗的經(jīng)歷，并盡可能詳細(xì)的表達(dá)清楚當(dāng)自己遇到失敗時是怎樣想的，怎樣做的，在整個過程中，情感的變化。由于在生活中每一個學(xué)生都會遇到過失敗，所以以“笑對失敗”為話題的作文題目，他們并不陌生，但是如何將自己的情感融入到寫作中，這對于學(xué)生來說有一定的難度，因此，在講解的最后環(huán)節(jié)，我為學(xué)生講解了用心理描述突出人物形象、運用對比描寫人物性格、用細(xì)節(jié)描寫震撼心靈的寫作技巧，并配備相應(yīng)的段子，請學(xué)生認(rèn)真揣摩，仔細(xì)體會，這樣有利于進(jìn)一步調(diào)動學(xué)生情感，使學(xué)生體驗感情在寫作中的重要意義。在初中作文教學(xué)中，教師要善于從學(xué)生身邊發(fā)生的細(xì)小事例出發(fā)，引導(dǎo)學(xué)生對此事例進(jìn)行深度分析、綜合比較，從感性認(rèn)識上升到理性認(rèn)識，這樣有利于進(jìn)一步升華學(xué)生情感，使學(xué)生在寫作時能更好的處理好自己的情感，體驗寫作的情趣。三、多元展示，體驗成功青春期的孩子都有著較強的表現(xiàn)欲，他們渴望得到來自于教師的認(rèn)同與贊揚，而教師的每一句贊揚，都能夠幫助學(xué)生樹立學(xué)習(xí)的自信心，因此在教學(xué)中，教師要善于從學(xué)生的這一心理特征出發(fā)，采取有效的教學(xué)途徑滿足學(xué)生的表現(xiàn)欲，促使學(xué)生體驗成功，燃起寫作的激情。比如，在帶領(lǐng)學(xué)生開展以“母愛”為話題的作文練習(xí)時，首先，我請學(xué)生就自己理解的“母愛”，開展一段即興演講，可以盡情的表達(dá)自己的所感所想，以及自己想對媽媽說的話，在這個環(huán)節(jié)中，許多學(xué)生飽含激情的到講臺上講述了一段自己與媽媽之間的故事，深深的體會到了母愛的偉大，然后，請學(xué)生以“母愛”為話題寫一篇文章，在寫作時要注意突出自己的真情實感。在下一節(jié)課中，我將認(rèn)真挑選出的優(yōu)秀作文張貼在墻上，請各小組同學(xué)進(jìn)行點評，針對這些優(yōu)秀作文，各小組學(xué)生也發(fā)表了自己不同的意見，有的說：“文章中的人物細(xì)節(jié)描寫和細(xì)致的情感能夠打動人的心靈深處?！边€有的學(xué)生說：“這些優(yōu)秀作文視角新穎，以小見大，情感豐富?！毕脑u價，讓我看到了學(xué)生精彩的一面，也看到了學(xué)生情感豐富的內(nèi)心世界。在教室空閑之處，我為學(xué)生開辟了一塊“習(xí)作欣賞園地”，將平時學(xué)生寫的優(yōu)秀作文展示出來，供大家賞析，也會帶領(lǐng)學(xué)生定期開展作文評選活動，請學(xué)生拿出自己認(rèn)為寫的最優(yōu)秀的作文進(jìn)行相互評價，并自主評選出“寫作小能手”，這些多元化的展示活動，充分調(diào)動學(xué)生的競爭意識，也使寫作教學(xué)更具有趣味性。開展多元化展示活動，不僅為學(xué)生增添了許多的樂趣，還促使學(xué)生在相互賞析中學(xué)習(xí)彼此寫作的優(yōu)點，揣摩他人習(xí)作情感描寫的動人之處，從而為課堂營造了一種交流互動、積極向上的寫作情感，讓學(xué)生體驗成功的同時，萌發(fā)寫作的欲望。四、結(jié)束語總而言之，教無定法，在初中語文作文教學(xué)中，教師要不斷地創(chuàng)新教學(xué)思路，優(yōu)化教學(xué)方法，構(gòu)建完善的教學(xué)模式，加強對學(xué)生的寫作情感培養(yǎng)，讓學(xué)生在對生活不缺乏感知力的情況下，打開創(chuàng)作思路，將自己的真情實感融入到寫作中，使學(xué)生寫出來的文章情感更加豐富、細(xì)膩，更能“以情動人”。miRNA差異？疾病預(yù)后，轉(zhuǎn)歸血漿循環(huán)miRNA的表達(dá)–預(yù)測?生物標(biāo)記物？我們的設(shè)想我們的研究工作研究血漿中存在的循環(huán)miRNA，建立其提取檢測的方法，并且檢測血漿miRNA在冠心病人中的表達(dá)情況，尋找疾病發(fā)生發(fā)展或者影響預(yù)后的生物標(biāo)記物。血漿miRNA提取檢測基本流程血漿循環(huán)miRNA提取方法血漿miRNA的提取第四步晾干，加無RNAase水進(jìn)行溶解，檢測濃度，保存第一步ProteinK消化，TrizolLS和氯仿對血漿進(jìn)行提取第三步離心，取得RNA沉淀，70%乙醇洗滌第二步異丙醇和核酸共沉淀劑對前述水相進(jìn)行沉淀血漿循環(huán)miRNA的檢測原理實驗結(jié)果二、miRNA提取方法學(xué)的考察（一）1、采用外源合成的cel-miRNA-39檢驗提取方法的提取效率：2、has-miR-16的累加實驗采用加入外源合成的has-miR-16mimics，比較提取方法的有效性。二、miRNA提取方法學(xué)的考察（二）內(nèi)源BmimicsA三、檢測miRNA在兩組人群中的表達(dá)差異Coronaryarteryheartdisease（CHD）25例Healthycontron30例3.1、研究的一般資料—年齡3.2、研究的一般資料—性別P=0.1553.3、血漿循環(huán)has-miR-126的表達(dá)量3.4、血漿循環(huán)has-miR-16的表達(dá)量四、進(jìn)一步的機制探討1、培養(yǎng)人心肌細(xì)胞AC16，進(jìn)行miR-126inhibitor的轉(zhuǎn)染，Q-PCR檢測miR-126和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)。2、Tunel檢測心肌細(xì)胞凋亡情況。四、Q-PCR檢測VEGF的表達(dá)結(jié)果VEGF有促進(jìn)血管生成的作用，在