補體檢測及應用

第第#頁該法是借助補體的抗原性與與相應抗體反應的前帶原理建立的補體單個成分定量檢測法。利用前帶原理必須以過量的抗補體抗體保證準確測定的質量。因其簡單、特異、重復性好、自動化程度高而頗受使用者歡迎。且動免疫比濁法可反映所測補體成分的絕對量，并能進行標準化流程管理與質量控制，是目前國內外臨床免疫檢測中的主要檢測方法。第四節(jié)補體結合試驗（CFT）將免疫溶血作為指示系統(tǒng)，用以檢測另一反應系統(tǒng)中抗原或抗體的傳統(tǒng)方法。該方法并非用于補體的檢測，而是利用補體的溶細胞作用進行各種物理狀態(tài)的抗原抗體測定。一、試驗原理包括①反應系統(tǒng)：已知抗原（或抗體）與待測抗體（或抗原）；②補體系統(tǒng)；③指示系統(tǒng)：SRBC與相應溶血素預先結合，成為致敏綿羊紅細胞。反應分兩步進行。首先是反應系統(tǒng)與補體的作用；第二步是指示系統(tǒng)利用剩余補體的反應。如反應系統(tǒng)中有抗體或抗原，則形成免疫復合物而固定與消耗補體，使后加入的$區(qū)30-抗SRBS指示系統(tǒng)無多余補體可利用，則無溶血反應發(fā)生，反之亦然。不溶血為補體結合試驗陽性，而溶血為試驗陰性。試驗中將反應系統(tǒng)的待測抗原（或抗體）作系列倍比稀釋可作半定量測定。試驗中以50%不溶血作為判斷終點。二、試驗方法（一）試劑的準備.抗原或抗體.補體：采用豚鼠血清為補體。.待測標本：及時分離血清用于檢測或-20℃保存?zhèn)溆谩Ｔ囼炃?，應先將血?6℃加熱30分鐘（或60℃3分鐘）以滅活補體。血清標本遇有抗補表達象時，可作下列處理：①加熱滅活時提高l2℃；②-20℃凍融后離心去沉淀；③以3mmol/L鹽酸處理；④加入少量補體后再行滅活；⑤以白陶土處理；⑥通入0。2；⑦以小白鼠肝粉處理；⑧用含l0%新鮮雞蛋清的生理鹽水稀釋血清。（二）正式試驗：小量法較為常用。三、方法評價補體結合試驗是一經典的免疫技術，具有靈敏度高、可檢測的抗原或抗體范圍廣泛等優(yōu)點。該方法無需特殊設備，結果容易觀察，試驗條件要求不高，一般醫(yī)院均具備開展的條件。第五節(jié)補體受體的測定補體受體存在于多種細胞，是清除免疫復合物、凈化機體內環(huán)境的重要膜性成分。在若干補體成分中，C3是各活化途徑的交匯點，且含量最多，故C3受體為測定的重點。第六節(jié)補體測定的應用補體的單個成分及總補體活性的測定，對于評價機體免疫功能、診斷與治療疾病、流行病學調查等均有重要的意義。同時，可根據(jù)補體的溶細胞活性與級聯(lián)反應的性質，用于抗原或抗體的檢測、免疫復合物的測定等。.補體相關試驗用于診斷梅毒螺旋體感染的華氏反應（已淘汰）。.補體含量與活性檢測反映總補體活性的CH50試驗；用于檢測補體單個成分及其裂解產物與補體受體的溶血試驗、免疫化學試驗與免疫熒光技術等。.與補體含量與活性相關的疾病主要包括：（1）免疫相關性疾?。?）與補體有關的遺傳性疾?。?）高補體血癥：偶見于感染恢復期與某些惡性腫瘤患者，如C2、C3、C4的升高。急性病毒性肝炎、心肌梗死、糖尿病甚至正常妊娠時，也可觀察到補體值的增高。（4）補體含量顯著降低的疾病:繼發(fā)性補體降低常見于下列情況：①消耗增多，如SLE、冷球蛋白血癥、自身免疫性溶血性貧血、類風濕關節(jié)炎、移植排斥反應等，此時因免疫復合物形成，消耗補體；②補體的大量丟失，主要見于大面積燒傷患者、失血及腎臟病患者；③補體合成不足，常見于肝臟疾病患者或營養(yǎng)不良的患者。此外，細菌（特別是G-）感染時，常因補體替代途徑的活化使補體水平暫時降低。補體總活性測定采用A.凝集法B.沉淀法C.溶血法D.電泳法E.標記法『正確答案』C『答案解析』補體總活性測定常采用的是CH50試驗。補體結合試驗的指示系統(tǒng)是A.特異性抗體與補體B.特異性抗原與補體C.紅細胞與溶血素D.加熱滅活的患者血清E.補體與溶血素『正確答案』C『答案解析』補體結合試驗試驗原理：包括①反應系統(tǒng)：已知抗原（或抗體）與待測抗體（或抗原）；②補體系統(tǒng)；③指示系統(tǒng)：SRBC與相應溶血素預先結合，成為致敏綿羊紅細胞。下列物質中，不參與溶血反應的是A.羊紅細胞B.抗紅細胞抗體C.補體D.溶血素E.抗補體抗體『正確答案』E『答案解析』免疫溶血法中抗原為SRBC,抗體為兔或馬抗SRBC的抗體（IgG、IgM型），即溶血素。試驗中有兩組補體參與，一組缺少待測成分的試劑（R試劑）。加入致敏SRBC（檢測經典途徑補體成分用