北中大中藥鑒定學實驗指導01基本實驗-2中藥的化學定性鑒別

1.2中藥的化學定性鑒別內容提要本實驗采用中藥常用的化學定性鑒別（包括顯微化學鑒別）方法與基本技術，對部分常用中藥進行品種鑒定或質量控制。通過實驗掌握中藥化學定性鑒別的一般規(guī)律和方法，掌握部分常用中藥化學定性鑒別的主要特征。原理化學定性分析是指利用某些化學試劑能與中藥中的某種或某類化學成分產生特殊的氣味、顏色、沉淀或結晶等反應，作為鑒別中藥品種的手段。優(yōu)質中藥的專屬性成分，也可作為質量評價的特征之一。在對中藥進行化學定性分析時，可用其提取液、粉末或切片等來進行。如將化學試劑直接加到中藥表面、切片或粉末上，觀察產生的結晶（用顯微鏡觀察）以及特殊的顏色反應；取切片或粉末也可裝置在玻片或濾紙上，滴加相應的試劑進行直接觀察；取適量中藥粉末于小試管中，加適當溶劑提出其化學成分，然后將溶液滴于玻片上、濾紙上或加入小試管中，再滴加一定的化學試劑并觀察其現(xiàn)象；利用微量升華法，將中藥中可升華的成分分出，加適當?shù)脑噭┯^察其化學反應現(xiàn)象等。儀器、材料與試劑(1)儀器與材料1)儀器天平，試管，燒杯，錐形瓶，吸管，量筒，漏斗，分液漏斗，濾紙，水浴鍋，蒸發(fā)皿，載玻片，蓋玻片，電吹風等。2)材料粉末：安息香，白術，檳榔，薄荷，蟾酥，丁香，番瀉葉，茯苓，附子，狗脊，訶子，厚樸，黃連，黃芩，金櫻子，決明子，鹿茸，沒藥，全蝎，人參，乳香，延胡索，知母。（2）試劑0.2%吲哚醌溶液，0.25mol/L硫酸溶液，0.5%硫酸銅溶液，1%三氯化鐵溶液，1%鐵氰化鉀溶液，10%醋酸鉛試液，10%氫氧化鈉溶液，2%醋酸溶液，2%茚三酮溶液，2,4-二硝基苯肼，3%過氧化氫溶液，4%氫氧化鈉溶液，5%對二甲基苯甲醛的10%硫酸溶液，5%三氯化鐵的甲醇溶液（1?1），5%三氯化鐵乙醇溶液，5%茚三酮丙酮溶液，50%硫酸，α-萘酚試液，苯酚，醋酐，醋酸，碘化鉍鉀試液，碘化汞鉀試液，碘化鉀-碘試液，碘試液，對二甲氨基苯甲醛，過氧化氫試液，甲醇，堿性酒石酸銅試液，氯仿，氯化鈉明膠試液，鎂粉，硝酸汞試劑，明膠試液，濃硫酸，氫氧化鈉試液，四氯化碳，鐵氰化鉀-三氯化鐵試液，稀醋酸，稀硫酸，香草醛，3%氫氧化鈉氯化鈉的飽合溶液，硝酸，鹽酸，乙醇，乙醚等。操作步驟（1）含生物堿類成分中藥的鑒定1）取附子粉末約0.1g置試管中，加乙醇5mL，在水浴上加熱20min，時時振搖，濾過，濾液蒸干，加2%醋酸溶液2mL，攪拌，濾過，濾液中加碘化汞鉀試液2滴，即發(fā)生黃色沉淀。2）取延胡索粉末2g置小燒杯中，加0.25mol/L硫酸溶液20mL，振搖片刻，濾過。取濾液2mL，加1%鐵氰化鉀溶液0.4mL與1%三氯化鐵溶液0.3mL的混合液，即顯深綠色，漸變深藍色，放置后底部有較多深藍色沉淀。另取延胡索粉末0.2g，加稀醋酸5mL，在水浴上加熱5min，濾過。取濾波lmL，加碘化鉍鉀試液1～2滴，顯紅棕色；另取濾液lmL，加碘化汞鉀試液1～2滴，顯淡黃色沉淀。3）取黃連粉末置載玻片上，加乙醇1～2滴及30%硝酸1滴，加蓋玻片，放置片刻，鏡檢，有黃色針狀或針簇狀結晶析出，加熱或放置，結晶消失并顯紅色。4）取檳榔粉末0.5g，加水3~4mL，加5%硫酸液1滴，微熱數(shù)分鐘，濾過，取濾液1滴于載玻片上，加碘化鉍鉀試滴1滴，即顯混濁，放置后，置顯微鏡下觀察，有石榴紅色的球晶或方晶產生。（2）含酚類和鞣質類成分中藥的鑒定1）取狗脊粉末2g，加水30mL，加熱15min，濾過。分取濾液2mL，加1%三氯化鐵試液，呈淡綠色；加鐵氰化鉀-三氯化鐵試液，呈藍黑色沉淀；加明膠試液，產生混濁或沉淀。2)取金櫻子粉末5g，加水50mL，置60℃水浴上加熱15min，立即濾過。取濾液1mL，加堿性酒石酸銅試液4~5滴，在水浴中加熱5min，生成紅棕色沉淀；取濾液1mL，加1%三氯化鐵溶液1~2滴，即顯暗紫色。3)取訶子果肉粉末3g，加水30mL，50℃水浴溫熱3~5min，濾過。取濾液2mL，加三氯化鐵試液1滴，呈深藍色和生成沉淀。另取濾液2mL，加氯化鈉明膠試液1滴，生成白色沉淀。（3）含黃酮類成分中藥的鑒定取黃芩粉末2g，置100mL錐形瓶中，加乙醇20mL，置水浴上回流15min，濾過。取濾液1mL，加10%醋酸鉛試液2～3滴，即發(fā)生橘黃色沉淀；另取濾液lmL，加鎂粉少量與鹽酸3～4滴，顯紅色。（4）含蒽醌類成分中藥的鑒定1）取決明子粉末0.5g，加稀硫酸20mL與氯仿10mL，微沸回流15min，分取氯仿層，加入氫氧化鈉試液10mL，振搖，放置，堿液層顯紅色；若顯棕色，則分取堿液層加過氧化氫試液1~2滴，再置水浴中加熱4min，即顯紅色。2）取番瀉葉粉末0.1g，加50%硫酸10mL，沸水浴上加熱水解15min，放冷，用氯仿或乙醚萃取，分取氯仿層或乙醚層，加4%氫氧化鈉溶液提取，堿液加3%過氧化氫溶液2滴，沸水浴上加熱4min，出現(xiàn)明顯的紅色。（5）含皂苷類成分中藥的鑒定1）取知母粉末2g，加乙醇5mL，振搖后放置20min，吸取上面清液1mL，于水浴上蒸干，殘渣加濃硫酸2滴，初顯黃色，繼變紅色、紫堇色，最后呈棕色。2）分別取人參和三七粉末少許，放于白瓷板上，然后滴加濃硫酸1～2滴，人參呈棕褐色，三七呈血紅色。（6）含木質素類成分中藥的鑒定取厚樸粗粉3g，加氯仿30mL，回流30min，濾過。取15mL氯仿提取液，蒸去氯仿，殘渣加10mL乙醇溶液，取濾液各1mL，分別加5%三氯化鐵的甲醇溶液（1?1）1滴顯棕黑色或藍黑色；加硝酸汞試劑1滴，產生棕色沉淀。（7）含內酯類成分中藥的鑒定取白術粗粉2g，置100mL具塞錐形瓶中，加乙醚20mL，連續(xù)振搖10min，濾過。取濾液少許，揮干后加醋酐和硫酸呈藍紫色至棕色；取濾液2mL，置蒸發(fā)皿中，待乙醇揮散后，加5%對二甲基苯甲醛的10%硫酸溶液1mL，顯玫瑰紅色，于100℃烘5min，變?yōu)樽仙?。取濾液少許，揮干，加乙醇溶解，再加2,4-二硝基苯肼，有黃色沉淀。（8）含揮發(fā)油類成分中藥的鑒定1）取薄荷粉末少許，經微量升華得油狀物，加硫酸2滴及香草醛結晶少量，初顯黃色至橙黃色，再加水1滴，即變紫紅色。2）取丁香粉末1g，置小試管中，加氯仿3mL，浸漬5min，吸取氯仿浸液2～3滴于載玻片上，速加3%氫氧化鈉飽和液1滴，加蓋玻片，片刻即有簇狀細針形丁香酚鈉結晶產生。（9）含樹脂類成分中藥的鑒定1）取安息香約0.1g，加乙醇5mL，研磨，濾過，濾液加５％三氯化鐵乙醇溶液0.5mL，即顯亮綠色，后變?yōu)辄S綠色。2）取乳香粗粉0.05g,置小蒸發(fā)皿中，加入苯酚-四氯化碳（1:5）液1滴，即顯褐色或紫色。取本品1g，研碎，加入甲醇10mL,振搖24h,濾過。取濾液5mL,蒸干，殘渣加稀硫酸10mL后轉移到分液漏斗中，用氯仿振搖提取2次,每次10mL,合并氯仿濾液，并濃縮至除盡氯仿，殘渣加醋酸1mL溶解，再加醋酐-濃硫酸（19:1）試劑1mL,溶液很快變成紫色。（檢查乳香酸）3）取沒藥粉末加硝酸，呈紫色。取沒藥粉末0.1g，加細沙0.5g，研勻，置試管中，加乙醚振搖提取，將提取液置蒸發(fā)皿中，待乙醚揮發(fā)后，殘留有一層薄膜，用溴或發(fā)煙硝酸蒸氣接觸皿底殘渣，即顯紫紅色。（10）含氨基酸類成分中藥的鑒定1）取全蝎粉末1g，加甲醇20mL，冷浸過夜，濾過，將濾液濃縮至5mL左右，作為供試品溶液。將此液分別點于2張濾紙上，分別噴0.5%茚三酮丙酮溶液及0.2%吲哚醌溶液，置110oC紅外燈下烘烤，前者出現(xiàn)紫色斑點，后者出現(xiàn)藍黑色斑點。2）取鹿茸粉末0.1g，加水4mL，置水浴中加熱15min，放冷，過濾。取濾液1mL，加2%茚三酮溶液3滴，搖勻，加熱煮沸數(shù)分鐘，顯藍紫色。另取濾液1mL，加10%氫氧化鈉溶液2滴，搖勻，滴加0.5%硫酸銅溶液，顯藍紫色。（11）含強心苷類成分中藥的鑒定1）取蟾酥粉末0.1g，加氯仿5mL，浸泡1h，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酐少量使溶解，滴加硫酸，初顯藍紫色，漸變?yōu)樗{綠色。取蟾酥粉末0.1g，加甲醇5mL，浸泡1h，濾過，濾液中加對二甲氨基苯甲醛固體少許，滴加硫酸數(shù)滴，即顯藍紫色。（12）含多糖類成分中藥的鑒定取茯苓塊片或粉末少許，加碘化鉀碘試液數(shù)滴，顯深紅色。取茯苓粉末0.1g于試管中，加水5mL，煮沸，加碘試液3滴，得黃色溶液，應不顯藍色或紫紅色。取茯苓粉末加α-萘酚及濃硫酸，團塊物即溶解，可顯橙紅色至深紅色。要點及難點解答（1）中藥的化學定性鑒定，應選擇中藥中專屬性成分或有效成分為鑒別特征?；瘜W成分的提取要選擇最佳溶劑，所選的化學試劑要具有靈敏、選擇性強和穩(wěn)定性好等特點。（2）重點掌握下列中藥的化學定性鑒別特征附子，延胡索，黃芩