啤酒酵母選育

啤酒酵母選育項(xiàng)目紫外誘變及其突變株的性能測試1材料與方法1.1材料菌種：四鈴啤酒酵母儀器：分光光度計(jì)、恒溫振蕩器、水浴鍋、離心機(jī)、顯微鏡、蒸餾裝置、分析天平。培養(yǎng)基：麥芽汁培養(yǎng)基，麥芽汁固體培養(yǎng)基。（麥芽汁由四鈴啤酒廠提供）1.2試驗(yàn)方法1.2.1酵母菌的活化取菌種接種至裝有麥芽汁液體培養(yǎng)基的錐形瓶130r/min振蕩培養(yǎng)，于28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)14h，得到正常生長階段的釀酒酵母菌懸液。然后接種于斜面麥芽汁固體培養(yǎng)基上，采用28℃恒溫培養(yǎng)14h，得到完全活化的正常生長的酵母菌。1.2.2釀酒酵母菌對(duì)數(shù)生長期的測定1.2.2.1菌懸液的制備取1OmL菌液離心收集菌體，洗滌2次后，菌體懸浮于1OmL生理鹽水中，制得菌懸液。取活化的菌懸液各1mL接種于36支含9mL的麥芽汁液體培養(yǎng)基中，搖勻，130r/min振蕩培養(yǎng)，每隔2h取試管3個(gè)，放入冰箱，全部培養(yǎng)結(jié)束用722型分光光度計(jì)于波長600nm處測各管菌液的吸光度值，以空白的麥芽汁培養(yǎng)液為對(duì)比，根據(jù)所得數(shù)據(jù)做出釀酒酵母菌的生長曲線。（此圖視為參考）1.2.3紫外線誘變?cè)囼?yàn)淚用麥寫芽汁片液體額培養(yǎng)丑基將短處于向?qū)?shù)柱生長則期的今菌懸判液稀揉釋，驅(qū)使菌誠種的跡濃度席達(dá)到怖lx預(yù)10估6夢(mèng)個(gè)／諸mL棒。(裙此處蘭菌懸煩液濃聽度的林確定顧采用堅(jiān)三種束方法竄：1盟.顯懼微鏡般直接洗計(jì)數(shù)抖法;瞇2.析平板守菌落款計(jì)數(shù)硬法；察3.獵光電漆比濁束計(jì)數(shù)左法)買備注橡：平剛板直些接計(jì)賊數(shù)法版：如跨果過悟少菌化液不段易涂炮布開極，過腸多則側(cè)在涂竟布完雙后或繼在培軍養(yǎng)時(shí)送菌液始仍會(huì)棋在平史板表最面流辱動(dòng)，贈(zèng)不易抹形成對(duì)單菌匙落，去且培蠅養(yǎng)周狠期長食，耗乎時(shí)多言，工撤作量叢大，有但是屆也是雀我們爪的強(qiáng)剖項(xiàng)，衡可以侍鍛煉產(chǎn)大一夠的動(dòng)咸手能飼力。罪2：褲顯微封鏡直徒接計(jì)嶄數(shù)法清：比痛較直泥觀，錘我們已可以邀直接蓬顯微萬觀察損，多明人工可作計(jì)漸數(shù)。狡耗時(shí)跡較短找，且異工作沒量較肺小，軌并且賤我系北其他宋實(shí)驗(yàn)炒組采薄用此兇方法祖計(jì)數(shù)改，可丙供參閉考。給3：血光電爛比濁勢(shì)法：技雖然沖繪制胸標(biāo)準(zhǔn)轎曲線葉要求鉗較高用，但攜是工容作量研較小宿，且司一次兔繪制梁好標(biāo)那準(zhǔn)曲由線好茅后，仗以后逢可以瓶用，聲準(zhǔn)確暢率較眠高。程比較矩三種無方法燃，我遼傾向感于第證一種搞和第柴三種泊，二突者相襲比較獻(xiàn)，可購以校誦正方逝案。群實(shí)驗(yàn)根步驟奶：孕打開濫30嚇W紫居外燈吹預(yù)熱困30典mi衛(wèi)n，債使其催功率向達(dá)到撤穩(wěn)定樸。捎1取冬斜面復(fù)菌苔嚴(yán)一環(huán)給于2鎖Om感L麥奮汁中盞混勻萌，2簡8善℃派活化隱培養(yǎng)逆14皆h。菜2取池4m角L培軟養(yǎng)液片以3葉00暖0r輪/m慕in細(xì)的速怎度離仿心1兇5m尺in出，棄預(yù)上清伸液加音入4朋mL幸生理典鹽水田洗滌椒，在杰電磁數(shù)振蕩芽儀上激震蕩影10皂mi蕩n左畜右，懼重復(fù)飼2次崖，制負(fù)成5休mL評(píng)懸液事，用屬血球惜計(jì)數(shù)宵板在泳顯微秧鏡下內(nèi)直接徐計(jì)數(shù)商，調(diào)冬整細(xì)購胞濃軌度。惱3取診誘變念前的齊1m約L菌頂懸液負(fù)進(jìn)行陪適當(dāng)膜稀釋刮，分稱離出剝3個(gè)靜合適伏的稀住釋度狐傾注致瓊脂擊平板祝，約汗為1濱0號(hào)-3暮、1恒0拒-4但、1蘇0諸-5臺(tái)，每今一個(gè)傾梯度叮3個(gè)拘平板呢，每林一個(gè)烏平板剃加0崗.2沙mL竄菌液睬，進(jìn)受行培問養(yǎng)后勁平板瓶計(jì)數(shù)緣法，蝦作為會(huì)對(duì)照印。浸4取抗菌懸啟液5控mL咽移入饑無菌備培養(yǎng)禮皿中病，加孝入一熔無菌組磁力撿轉(zhuǎn)子至，置浮于磁谷力攪敏拌器悠上。斗5縫30矩W紫趙外燈糾下3串0c輕m處消照射茶，調(diào)色整照雁射時(shí)劃間。設(shè)本次童預(yù)設(shè)籃為0食，3互0，萌45坑，6道0，箏90藥，1泥20床，1戰(zhàn)80羊，6突00倚.（朱單位止s）訊6取縫一定獅稀釋節(jié)梯度罩的紫寸外照串射菌沈液0狂.1稻（視候具體騎情況瞞而定蹤）用勢(shì)無菌她涂布鵝棒涂己布均搶勻，詞每組怠做三握個(gè)平霉行線罷培養(yǎng)自記錄尤菌落賽數(shù)，有計(jì)算專各照法射時(shí)喝間下末的致余死率嶺。（胞選在曠75聞%-戴80犬%）鈔。送致死農(nóng)率=腰未經(jīng)排照射細(xì)菌落與數(shù)-界紫外炎照射榜菌落齊數(shù)糧未經(jīng)腸紫外觀照射險(xiǎn)菌落姑數(shù)碌7挑康取平賢板上飛生長世迅速油菌落諷比較豆大的騎菌株扒進(jìn)行涼斜面博培養(yǎng)鋪，然津后重篩復(fù)1所-5征，再讀重復(fù)從第5令步，叢挑取吸平板熔上生辭長迅康速、存菌落富比較拴大的很菌株注進(jìn)行陡斜面裳培養(yǎng)者，連各續(xù)進(jìn)么行5含次，餅28腿℃津培養(yǎng)食20茄h左細(xì)右，爪計(jì)算醉其突踐變率桶和致齡死率座。（靠上述潑時(shí)間揭等數(shù)柔字視蹈為參宇考數(shù)數(shù)值）應(yīng)1.孩2.乖3.冒1初胡篩滔誘變幕后挑賠選在做麥芽皮汁固裙體培厲養(yǎng)基瘦上生溪長良塌好，潮菌落鉛呈中寫等大巴小、群乳白階色、冷表面觀光滑潔和邊符緣整末齊的終菌落吧移接鄰斜面兼供復(fù)哪篩。變1.冷2.愧3.場2復(fù)灑篩剝供復(fù)毀篩的嗽菌株萄進(jìn)行唇50濁0m濁l三忽角瓶耍低溫膊發(fā)酵和，測珍定發(fā)螞酵液貫中的捆雙乙晃酰含祖量并間以此練作為挪復(fù)篩姐的標(biāo)李準(zhǔn)。綠同時(shí)惕測定坐發(fā)酵辯液中鋤雙乙紅酰含蛇量最塵低的托幾株龍酵母啄的其準(zhǔn)它性前能。骨雙乙切酰含齒量測含定：占初篩洽獲得三的菌堂株經(jīng)摸50木0m就l三嶼角瓶啟內(nèi)裝擇30甲0m出l挨12打0助Bx刻麥芽梁汁發(fā)組酵8目d后靠，測糧定發(fā)贈(zèng)酵液巾中的蒙雙乙脹酰含雞量，跳選擇標(biāo)發(fā)酵偷液中喇雙乙廢酰含匆量低優(yōu)的菌統(tǒng)株進(jìn)路行二童次發(fā)撿酵，周將雙島乙酰展含量抹明顯桑降低農(nóng)的4晨株腸菌分乒別編他號(hào)為御FB球-E究1、裕FB主-E荒2、細(xì)FB載-E瞞3羅和F撿B-他E4芒。桶結(jié)果吐見表饞1縮表1扭發(fā)捉酵液今中雙堂乙酰味含量猶的比小較盼菌株蒙授南緣頌起侵世子F公B藏F程B-格E1色涼FB褲-E礎(chǔ)2暢F棒B-折E3桶瀉FB喜-E棉4聲雙乙王酰含役量鞋(m腔g/予L)勺0駝.1省23垂3占0.貍07剝06刺0敞.0扣92叉6裝0.輛07夠76鴿0據(jù).0微87煌0歡降低孟率(型%)歐啦農(nóng)勒班軟0慢邊碎42諒.7觸擔(dān)把24退.9另苦乎37頓.1工客2餓9.述4逢（此聞處繪水制表躬格樣挑式視宜為參乓考）休雙乙甩酰代肢謝的厚控制雷：星降低蛋前驅(qū)沾物質(zhì)扣α利-乙磚酰乳犬酸的屈生產(chǎn)魯量星措施扣：改糧良酵頑母菌喝種怨提高磚麥汁籌中預(yù)α型-氨遺基氮式含量導(dǎo)，可蹦以抑跡制合童成酶換的活受性咽2加馳速雙云乙酰接的還虛原國措施脫：提被高酵牙母的聲細(xì)胞帶密度豬（增窄大酵師母菌美的接棋種量叉）慧提高仁還原認(rèn)溫度邪（封繪罐后泉高溫退還原編）壺限制肯后期霜酵母木的出氣芽率源（封飼罐）跪國標(biāo)叨中對(duì)較于啤草酒中丙雙乙瞇酰的鈴量的敞要求絕二級(jí)橡啤酒稿：0析.2蠻mg叮/L可繭血超一級(jí)功啤酒處：0摔.1盯3m橫g/枕L紙方法喬：國侮標(biāo)G添B4動(dòng)92生7-伯20繳01胸檢測般培養(yǎng)跟條件蜜：恒劣溫1慈2度犧發(fā)酵華栓培弱養(yǎng)8綠d后緒檢測凍發(fā)酵較液中拌雙乙筍酰的涌含量肉?？嬖硎蹋弘p渾乙酰槽的測承定方瞎法采胃用比青色法止。鄰挨苯二樹胺比桐色法優(yōu)是連猛二酮數(shù)類都顯能發(fā)皆生顯瓣色反宣應(yīng)的稀方法優(yōu)，所蠶以，模此法斑測得降之值毯為雙年乙酰并與戊鎮(zhèn)二酮猴的總撇量，廈結(jié)果吧偏高襖。但喬此法貧快速研簡便受。用仇蒸汽骨將雙讀乙酰刺從樣跌品中案蒸餾刊出來拖，加暑鄰苯搞二胺愧，形則成2瀉，3趣—哨二甲另基喹草喔琳斃，其屠鹽酸蠢鹽在林33輕5n趙m波師長下浸有一焰最大盯吸收差峰，謹(jǐn)可進(jìn)霉行定索量測康定。晚1儀畜器：紫帶有直加熱坡套管祥的雙腫乙酰孟蒸餾鉤器，繁蒸汽蔑發(fā)生分瓶（撒20搏00閉mL材或3婆00靈0m廉L）鞠或者匙錐形浴瓶，論平底株燒瓶貝，容答量瓶滑25群mL星2試念劑和陽溶液術(shù)鹽酸視溶液晃（4劍mo撞L/誘L）紫，鄰雀苯二鐘銨溶會(huì)液：瘡10尸g/鍵L（誦稱取貝鄰苯欣二銨勺0.息1g在用鹽喂酸溶糞液溶價(jià)解并勒定容各至1太0m盯L搖辛勻，矮放于靠陰暗領(lǐng)處，贊注意財(cái)此溶耳液即冠用即芬配）它消泡買劑均3實(shí)路驗(yàn)步膜驟垮(1小)把湯雙乙史酰蒸獄餾器臂安裝侵好，似把夾邀套蒸擾餾器郊下端郵的排晚氣夾比子打嘆開。努(2值)將高內(nèi)裝窩2.下5m宏L蒸暫餾水淡的容紅量瓶檢(或爹量筒仙)放龜于冷捆凝器音下，證使出癢口尖白端浸每沒在還水面智下，痕外加民冰水宴冷卻球。蹲(3宮)加狗熱蒸磨汽發(fā)顧生器揀至沸樓，通內(nèi)汽加喝熱夾婦套，頂備用字。妹(4秋)于木10慌0m春L量移筒中底加入松2雞~補(bǔ)4滴暗消泡滅劑，啦再注疲入5跳℃震左右醒未除寨氣啤善酒1糖00功mL迅。示(5挪)待趁夾套俘蒸餾獎(jiǎng)器下姥端冒穿大汽置時(shí)，裳打開前進(jìn)樣象口瓶劍塞，拉將啤足酒迅咳速注祥入蒸斷餾器排內(nèi)，碌再用玉約1研0m鵝L蒸繼餾水億沖洗輔量筒叼，同戚時(shí)倒究入，雕迅速歡蓋好參進(jìn)樣救口塞快子，心用水榴封口倘。套(6怖)待黃夾套淘蒸餾克器下盯端再她次冒栽大汽吐時(shí)，惜將排冬氣夾辛子夾粱住，懂開始棵蒸餾湊，到談餾出夸液接?jì)鸾?寄5m礦L時(shí)額取下例容量崗瓶，根用水悟定容靈至2殊5m裂L，依搖勻怕(蒸家餾應(yīng)陵在3閣分鐘飲內(nèi)完遞成)煮。預(yù)(7津)分沙別吸祝取餾遞出液些10榜mL李于兩茫支比夜色管驕中。恭一管是作為撐樣品止管加恨入0睛.5陣mL遺鄰苯打二胺寄溶液授，另關(guān)一管的不加靠作空駱白，窩充分姐搖勻尺后，飽同時(shí)抗置于杜暗處讀放置給20忽-3倍0分妨鐘，礙然后長于樣京品管紐中加山2m梁L4旨N鹽橋酸溶爺液，爹于空林白管零中加參2.誓5m染L4輸N鹽古酸溶巾掖，扔混勻伏。褲(8轎)在男33我5n玉m波辮長處麥，用扶1c未m比香色皿撓以空供白作瘡對(duì)照環(huán)測定疾樣品沫吸光墊度。淚(9榮)計(jì)套算：會(huì)雙乙虜酰(鍵mg任／L家)＝忍A3千35粉×們2.怖4（截用2拜0m獨(dú)m石臘英比慢色皿猴時(shí)，展吸光叫度與付雙乙拾酰的索換算塔系數(shù)蹲）材注：橫若用瘋20孩mm銹的石屠英比諒色皿磨則換昏算系河數(shù)則腎為1乖.2訂1.賣2.臺(tái)4不遇同菌年株的寸發(fā)酵膀性能墾測試恭（C卸O毅2坦失重昌法）辯將發(fā)零酵搖素瓶置步于圍26嚼度恒應(yīng)溫環(huán)益境中襖，每精天稱月重肚1失次（晨直至歷日失節(jié)重小燒于0哨.5陪g為盯止）踢，因需每瓶璃用于隙發(fā)酵擁的麥號(hào)芽汁牙體積茅相同示，所麗以只捎需計(jì)告算發(fā)巷酵后宰單位倘時(shí)間摟內(nèi)變CO訪2刺的釋橫放量期，發(fā)梅酵鹽6d蒸，以頭CO毫2窗產(chǎn)生謙量為晝縱坐視標(biāo)，揀發(fā)酵第時(shí)間捷為橫臂坐標(biāo)蹲，繪曬制C剖0靠2駝產(chǎn)生根量曲撞線。櫻1.秀2.泳6不嬸同菌策株發(fā)貢酵發(fā)具酵液電中殘嚇留總姑糖含舉量測蘋定足從8輔個(gè)發(fā)艦酵后寨的發(fā)仆酵瓶辛中各田取0溉.2少mL為發(fā)酵房液并蘿稀釋高50巡0倍次，用哲硫酸慕-苯漸酚法拘測定冠發(fā)酵著液中系殘留活總糖著的含遞量。腰附錄筐：硫籠酸-盞苯酚棟法疊1）韻葡萄戴糖標(biāo)悲準(zhǔn)液蓄的配擇制尤準(zhǔn)確湖稱取邊干燥患恒重墻的葡贈(zèng)萄糖披20蠟mg落，蒸份餾水漆準(zhǔn)確兔定容脈50坑0m鳴L得敢到0擊.0擴(kuò)4m時(shí)g/檢L的逃葡萄停糖液淘?；@2）冶試劑噴1）浙濃硫憐酸：押分析噸純，扎95豪.5鐵%摘2）賞80燈%苯龍酚：傅80洞克苯法酚（司分析濤純重葛蒸餾冰試劑播）加木20臥克水雷使之照溶解榜，可升置冰腫箱中苦避光驢長期純儲(chǔ)存脈。套3）輕6%填苯酚姓：臨轎用前鵲以8鍋0%片苯酚狹配制什。（論每次戀測定償均需塊現(xiàn)配菜）祥4）討15俯%三夜氯乙籠酸（造15恐%T監(jiān)CA逼）：富15聚克T辛CA普加8蛛5克林水使下之溶適解，呀可置渴冰箱翻中長歉期儲(chǔ)賽存。黑5）釀5%微三氯掘乙酸詳（5誘%T叔CA甲）：罩25破克T等CA部加4喊75到克水真使之付溶解搶，可層置冰昂箱中滑長期悉儲(chǔ)存沫。農(nóng)6）催6m露ol妥/L洪氫條氧化骨鈉：疏12查0克銅分析繳純氫序氧化遠(yuǎn)鈉溶釘于5諒00耳ml墻水。哪7）品6m扮ol圍/L棚鹽酸殺表1作便標(biāo)準(zhǔn)做曲線盡的制犬作步腸驟疑管號(hào)美肝聚咬0語船棉牲孔站1攜陜拘雪2旅灘芳寬3肯筐輪揀4幸喇喪座緊5鋒億父基6略答晃7情赤豪蹄8壽葡萄芒糖叮威0.隊(duì)0忠襯賞認(rèn)0.鍵4搞他歇元0.度6霞分填0.服8凍公捉1友.0液勝碧推1刮.2跪輔冒1早.4裙倡毒欺1.同6陰宋1.蕩8賠蒸餾討水是讓2.晶0摩釣粱讀1.兇6騙抱槽1.史4畜礎(chǔ)溝惕1.混2怕估任1剛.0型末涂貴0.桶8稠竟水0策.6市老閉寨0.舍4棄品0.申2烈苯酚兆液夢(mèng)授1.選0槐昌介膛1.蹤0蒜獅若1澡.0左糠躺1惹.0肌處識(shí)殖1警.0豬柜輝雷1需.0綱倦評(píng)1綠.0現(xiàn)咐籍刑1.計(jì)0允嗽1.店0財(cái)濃硫庸酸婆戴5.茂0夕異猾岡5.澇0尾萬耗5佛.0潤松辟5鋪.0尤子分巧5匆.0嚇扭懸鵝5掉.0加撲膠損5.日0渠章芳5友.0池趨5.灶0酷取8因支干棒凈的華具塞憶試管常按表物2方敢法操倘作,匙搖勻泄后放末置5霉mi圖n,摘置沸匹水浴例中加秒熱1孕5m鍛in角,取甘出迅償速冷筐卻至岸室溫廢,以來0號(hào)側(cè)作為跌空白骨調(diào)零沒,在屯最大磨吸收刪波長尤處測次定吸嘗光度捉。以菊葡萄序糖濃箭度X亂為橫熱坐標(biāo)考（u脆g/索mL妻），疲吸光浙度Y更為縱閑坐標(biāo)謙，從雅而來罪繪制敢標(biāo)準(zhǔn)播曲線撥。德1．抖制作毛標(biāo)準(zhǔn)航曲線意：準(zhǔn)著確稱蘿取標(biāo)醫(yī)準(zhǔn)葡鋼聚糖蠢（或娘葡萄含糖）逮20悶mg貝于5東00環(huán)ml桶容量胳瓶中嫂，加徒水至伴刻度鵝，分廣別吸設(shè)取0明.4焰、0棕.6五、0圓.8槐、1肚.0變、1膜.2薪、1存.4霜、1伙.6亂、1鑼.8或,各箭以蒸攜餾水濃補(bǔ)至茂2.摟0m出l，遲然后翅加入愉6%與苯酚熟1.準(zhǔn)0m烈l及換濃硫歉酸5昆.0扎ml裂,搖回勻冷起卻，巨室溫奸放置礦20洋分鐘小以后幣于4碰90橋nm般測光慕密度押，以宰2.余0m赴l(fā)水婦按同如樣顯后色操午作為懶空白膽，橫單坐標(biāo)傲為多報(bào)糖微增克數(shù)刻，縱言坐標(biāo)幫為光喇密度賀值，婚得標(biāo)滔準(zhǔn)曲咬線。暈2．訴樣品啟含量泊測定蹈：君①榮取樣陷品1判克（大濕樣蛇）加純1m酸L1庭5%病TC附A（脖三氯塑醋酸洗）溶英液研悔磨，濤再加鴉少許壓5％角TC學(xué)A溶知液研條磨，葵倒上趙清液關(guān)于1勁0毫照升離窩心管女中，撇再加可少許宣5％替TC影A溶叨液研繼磨，茄倒上棟清液將，重蕩復(fù)3憲次。碑最后啄一次頭將殘捐渣一崖起到黎入離熄心管如。注俱意：麥總的購溶液聰不要慣超出告10舉毫升腎。（倚既不咸要超把出離騎心管歪的容膚量）態(tài)。注②遲離心鐵，轉(zhuǎn)科速3鄰00藍(lán)0轉(zhuǎn)肝/分娘鐘，順共三抖次。全第一倦次1篩5分而鐘，辦取上羞清液濁。后脊兩次際各5炊分鐘秀取上品清液窗到2例5毫巷升錐昆形比濃色管喚中。壓最后亡濾液娘保持唱18鑰毫升音左右否。餓③國水浴香，在都向比追色管天中加砍入2粥毫升雅6m地ol瞇/L糧鹽遙酸之坊后搖逐勻，否在9玻6肌℃愚水浴碰鍋中兼水浴辣2小僻時(shí)。螺④裙定容呢取樣窮。水劃浴后碼，用亡流水究冷卻幸后加唱入2云毫升辛6m否ol插/L龍氫啞氧化言鈉搖圾勻。朽定容聯(lián)至2松5毫型升的防容量滿瓶中數(shù)。吸免取0暢.2掘ml士的樣筒品液桿，以住蒸餾慕補(bǔ)至顧2.身0m烘l，籃然后靈加入哥6%蹄苯酚盞1.歪0m尖l及用濃硫雁酸5幼.0概ml頓,搖揚(yáng)勻冷旬卻室掘溫放外置2墻0分緩鐘以壘后于吧49選0n杰m測礎(chǔ)光密臉度。拔每次荷測定謀取雙點(diǎn)樣對(duì)黑照。筑以標(biāo)放準(zhǔn)曲蘭線計(jì)釣算多如糖含益量。貪1.衣2.芒7不儉同菌駝株產(chǎn)擁酒精西能力迷（酒浩精度勸）測昂試馬快速掉氧化贏法逆乙醇顧在酸刑性條跳件下襲,經(jīng)涂過量暈的、弓一定垃濃度樸的重輝鉻酸叉鉀作級(jí)用，澡氧化斃生成季醋酸罩。再腸將剩尾余的勿的重創(chuàng)鉻酸慌鉀經(jīng)賴硫代姐硫酸去鈉還街原。禮由反休應(yīng)過衣程中緊，通蠶過消顆耗的侮硫代猶硫酸塔鈉的策量計(jì)碗算酒錄精含密量。順試劑宮：重咬鉻酸偶鉀溶皺液、焦硝酸祝溶液責(zé)、堿戚性碘練化鉀秩溶液壩、淀醒粉溶壟液、憶硫代重硫酸幫鈉標(biāo)閃準(zhǔn)溶云液猛方法思：在欲蒸餾辜器的吸接收倒瓶中胖，加目入1冶0.姜00室ml超重鉻匙酸鉀非溶液冊(cè)和2下5m紀(jì)l硝裕酸溶爪液。偶并將盈空氣垃冷凝安器的素出口痰插入控此溶蒜液中慎。在跡蒸餾速瓶中遵加入復(fù)12艙ml貝水和腹1.胃00飛ml頓試樣顯。接笛好裝啄置，攜迅速培加熱展至沸醫(yī)，并介繼續(xù)魚煮沸還3分種鐘，維蒸餾房即告充完成棒。在認(rèn)接受忍瓶中臭，加踢入3淋00依m(xù)l健水、林10攻ml竭堿性遵碘化陣鉀溶董液及筑10乎ml逗淀粉夏溶液搭，在臭電磁專攪拌猴器攪欺拌下樓，用撐硫代團(tuán)硫酸綱鈉標(biāo)肚準(zhǔn)溶純液滴農(nóng)定至扛淡青蕩色的賀淀粉向終點(diǎn)條。通掛過如權(quán)下公雖式計(jì)扔算酒棍精含扮量。譯酒精呢（%罵，V剝/V豈）=匙(2舍0.辱00呆-0闊.6找57沙5V組)/免Vs攤式中苗V室——彼硫代之硫酸魚鈉標(biāo)膠準(zhǔn)溶劇液滴穗定量京Vs封——妨試樣挺取樣霉量溝方法弟二：殊2.崖2竄蒸餾加—恒密度殲瓶法盆2.婚2.依1脂儀器蛋權(quán)全玻銜璃蒸王餾器究（5愚00漲mL膚）、放恒溫史水浴連（精苗度捉±睡0.我1義℃虧）、聚容量盛瓶（么10趁0m喜L）普、移手液管向（1師00導(dǎo)m銷l）施分析喜天平英（感都量0漏.1守mg務(wù)）、嶄天平魚（感亮量0趟.1親g）棒、2弊5爪ml督附溫借度計(jì)三密度潮瓶陜2.銀2.歐2爐操作乘方法敏用1度00權(quán)mL西容量移瓶準(zhǔn)孝確量棚取試政樣1久00雀ml劑，置鏈于蒸提餾瓶鹽中，倆用5趙0m涂l水縱分三鐵次沖貌洗容哲量瓶斯，洗太液并潮入蒸疲餾瓶翅中，岔加玻傭璃珠謹(jǐn)數(shù)粒圍，裝馳上蛇陶型冷出凝管督，用袍原1竹00赤ml侄容量語瓶接濕收餾蘭出液暫(外發(fā)加冰畫浴)身,緩蘿緩加邀熱蒸糟餾，黑收集敏約9鑰6m莊l餾往出液族(蒸硬餾應(yīng)乳在3陵0-歐60很分鐘伸內(nèi)完文成)催，取材下容揚(yáng)量瓶仍，調(diào)宵溫到便20淘℃驕，補(bǔ)局水定伐容，塵混勻鋼。用蹈25袍mL帖附溫優(yōu)度計(jì)盛密度青瓶測當(dāng)試樣緩餾出頂液2嗎0列℃佳的相串對(duì)密林度，鐵根據(jù)債相對(duì)芹密度柄查表依，得將到試切樣餾御出液堤的酒朱精度條（%片，V耽/V灣），裝即為紋試樣震的酒鼓精度墓。時(shí)2.薯3懸蒸航餾裝榨置鳳2.朋3.偷2穿試筐劑李重鉻卻酸鉀負(fù)溶液貢、優(yōu)或級(jí)純驢無水評(píng)乙醇甩2.悄4操揉作方偶法厚2.束4.盾1標(biāo)系準(zhǔn)曲妨線的閃制備焦吸取榆1m慎l無無水乙緩醇于像10笛0m疏l容朱量瓶額中，挪稀釋式至刻秤度，羽混勻出。分趙別吸尚取此利稀釋趁液0叢、1欣、2舌、3扶、4頭、5樣、6剝、7粘ml祥于5肥0核ml烤容量違瓶中雷，各閉加1舅5.序0爐ml睛重鉻顯酸鉀懶溶液遍，加春水至煙刻度峽，混印勻。變此標(biāo)心準(zhǔn)系賴列相辰當(dāng)于泰試樣皮中含旨有0除.0停、1里.0瞇0、早2.雞00新、3擁.0齡0、壘4.冶00賭、5南.0客0、貿(mào)6.諒00撲、7輪.0巾0(皆V/駕V)抽的酒筋精。健以空幕白標(biāo)果準(zhǔn)作澤參比咽，在翻波長乘61卻0n誼m，周用1蘭cm窯比色舍皿測魂定其震余各胳標(biāo)準(zhǔn)波的吸喪光度粱。用忌吸光燙度對(duì)尺酒精脈濃度割作圖膽，繪歇標(biāo)準(zhǔn)丹曲線畏。首2.叛4.礦2試摸樣的雙測定角在5俱00高ml甩蒸餾隙燒瓶惡中，汁加入選10百0.營0m察l試很樣。貍按1陵.2潛方法殖進(jìn)行悟蒸餾夢(mèng)，最相后加紙適量卻水將業(yè)蒸餾宣液補(bǔ)近足為然10貓0.弦0m盯l?，F(xiàn)吸取板1.妻0m她l蒸統(tǒng)餾液艇于5肆0槽ml室容量織瓶中驗(yàn)，按續(xù)標(biāo)準(zhǔn)慚曲線載的制授備的眾操作箭測定度其吸抓光度壩，由梁標(biāo)準(zhǔn)尺曲線復(fù)查出迎酒精翼含量鍋（%腫、V掃/V趕）。冰鈔1.雅2.劍8剪α伏-氨鼻基氮暫含量里的測珠定牧水合歌茚三瞎酮是迎一種潔氧化州劑，貨可使叢氨基脊酸脫矮羧氧拖化，榆而本況身被扇還原吃成還類原型擊水合里茚三等酮。吐還原錘型水研合茚乏三酮儉再與越末還袍原的功水合寬茚三黑酮及裳氨反胸應(yīng)，猛生成鋸藍(lán)紫裕色縮夾合物脾，顏歡色深消淺與伸游離巴α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