生物學與免疫學檢驗系列實驗

生物學與免疫學檢驗系列實驗第一頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三志賀菌屬與沙門菌屬志賀菌屬(Shigella)：

人類細菌性痢疾最為常見的病原菌通稱痢疾桿菌（dysenterybacteria）沙門菌屬(Salmonella)：

引起腸熱癥----傷寒、副傷寒食物中毒敗血癥第二頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三志賀菌有菌毛不分解乳糖無鞭毛（動力—）分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣不產(chǎn)生H2S沙門菌有菌毛不分解乳糖周身鞭毛（動力+）分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒桿菌不產(chǎn)氣）大多產(chǎn)生H2S生物學性狀第三頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三O-Ag：

LPS成分；耐熱：100℃數(shù)小時不破壞0.1%石碳酸不破壞TI-AgIgMH-Ag：鞭毛蛋白質(zhì)；不耐熱；0.1%石碳酸不破壞TD-AgIgGVi-Ag：

毒力抗原（Virulence）位于菌體表面抵抗吞噬阻止O-Ag與相應Ab的體內(nèi)外結(jié)合Vi-Ag抗原性弱，可作為帶菌者的檢測傷寒桿菌的抗原構造第四頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三致病部位：

大腸不侵入血流致病物質(zhì)：侵襲力：菌毛粘附上皮細胞侵襲侵入結(jié)腸粘膜上皮細胞，繁殖、擴散，形態(tài)感染病灶內(nèi)毒素外毒素致病部位；小腸侵入血流，引起菌血癥

致病物質(zhì)：侵襲力鞭毛穿越小腸粘膜，達皮下組織Vi抗原抵抗吞噬細胞的殺傷內(nèi)毒素致病性志賀菌沙門菌第五頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三致病過程：志賀菌—痢疾

糞—口傳播（傳染源：病人/帶菌者）

潛伏期10-200個細菌即使人感染

1-3天突破人體防御能力

①胃酸②正常菌群拮抗作用③局部免疫作用（SIgA）

大腸部位侵入侵襲力（菌毛）

粘膜上皮細胞（其中生長繁殖，形成感染灶）第六頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三

釋放內(nèi)毒素、外毒素

壞死、脫落粘膜組織局部刺激進入血流粘液、1、腸功能紊亂發(fā)熱、WBC細菌、痙攣、腹痛脫水、酸中毒炎性細胞、大便次數(shù)增多微循環(huán)衰竭血液里急后重中毒性腦炎2、腸壁通透性增DIC促進毒素吸收死亡率高膿血便腹瀉中毒性菌痢致病過程：志賀菌—痢疾第七頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三

傷寒桿菌（隨食物）

未被胃酸殺滅潛伏期小腸上部（以菌毛吸附在粘膜表面）

穿過組織間隙（鞭毛）

腸壁固有層淋巴組織，由Mφ吞噬

Vi抗原抵抗殺傷，繼續(xù)生長繁殖

淋巴液、腸系膜淋巴組織

血液

第一期菌血癥致病過程：傷寒桿菌—傷寒第八頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三初期血液

第一期菌血癥（病程出現(xiàn)乏力、頭痛①血液、骨髓第1W）全身酸痛等前期癥狀細菌培養(yǎng)

骨髓、肝、脾、膽、腎等臟器

陽性率高

被其中吞噬細菌在其昂②IgM抗OAb

細胞吞噬中大量繁殖出現(xiàn)

釋放極期（病程肝腎各臟器第2、3W）

膽囊再膽汁次

腸道尿液血液

第二期菌血癥第九頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三腸道尿液血液第二期菌血癥刺激已致敏的釋放大量①血液、糞便、腸壁淋巴組織內(nèi)毒素化尿液，細菌培養(yǎng)可呈陽性發(fā)生Ⅳ變態(tài)反應加重全身中毒癥狀②血清中：導致壞死、潰瘍IgGIgM糞便排出細菌尿液排出細菌血液有細菌

持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒癥狀顯著，第十頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三恢復期（第3W

1、特異性抗體升高，作用于細胞外細菌以后）

2、特異性細胞免疫加強，TD細胞釋放淋巴因子，激活Mφ，使其活性增強，有效殺滅Mφ內(nèi)的傷寒桿菌。（TC細胞殺傷細菌感染的靶細胞？）

3、抗傷寒桿菌O-Ag的抗體（IgM）：抗傷寒桿菌H-Ag的抗體（IgG）：帶菌者

恢復期帶菌者：恢復后3周----3月長期帶菌者：》3月

傷寒的痊愈指針：

膽囊、膽汁，細菌（L型細菌）培養(yǎng)陰性第十一頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三細菌性痢疾腸道癥狀：有

不侵入血流全身中毒癥狀：中毒性痢疾血象WBC膿血粘液便，

糞便是唯一的標本以局部體液免疫

---SIgA為主所致疾病——臨床癥狀的差異傷寒腸道癥狀：有

侵入血流引起菌血癥全身中毒癥狀：有尚影響肝、腎、脾、膽等器官。血象WBC？

嗜酸性粒細胞除糞便外，血液、骨髓、尿液、膽汁均可分離到細菌。以細胞免疫為主，病后獲牢固免疫力第十二頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三微生物學檢查法：傷寒桿菌沙門菌的分離與鑒定標本因病程不同采取不同標本：

靜脈血骨髓糞便和尿液第1周第1~3周第2周以后分離培養(yǎng)

增菌增菌離心沉淀

SS平板挑取可疑菌落鑒定KIA；MIU；血清學試驗第十三頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三因病程不同采取不同標本第十四頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三原理：已知傷寒桿菌O-Ag傷寒桿菌H-Ag+病人血清

甲型副傷寒桿菌H-Ag乙型副傷寒桿菌H-Ag

——定量凝集——相應Ab的含量血清學試驗——Widaltest第十五頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三血清學試驗——Widaltest結(jié)果判定：正?？贵w水平O凝集價＜1∶80；H凝集價＜1∶160O-AbH-Ab傷寒早期皮O-AbH-Ab傷寒急性期O-AbH-Ab傷寒恢復期

O-AbH-Ab

A：傷寒愈后期B：曾患傷寒桿菌C：預防接種疫苗D：L型細菌感染輔助診斷：A：O凝集價≥1∶80；H凝集價≥1∶160B：2次檢測凝集價遞增≥4倍或以上第十六頁，共十九頁，編輯于2023年，星期三實驗內(nèi)容及其安排

11.總體內(nèi)容講解2.傷寒桿菌感染模型建立l

實驗分組：1只小鼠/人l

感染模型建立：灌胃接種傷寒桿菌培養(yǎng)液

2感染小鼠標本采集與接種1.血液標本：l

接種增菌培養(yǎng)基l

分離血清，置-20度保存（肥達試驗用）2.糞便標本：接種分離培養(yǎng)基（SS平板）

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