莨菪烷類抗膽堿藥物的分析

教學(xué)目的與要求

掌握莨菪烷類抗膽堿藥物的鑒別試驗和含量測定方法。熟悉莨菪烷類抗膽堿藥物的基本結(jié)構(gòu)和主要性質(zhì)。了解莨菪烷類抗膽堿藥物的雜質(zhì)檢查。當(dāng)前第1頁\共有84頁\編于星期一\14點當(dāng)前第2頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析結(jié)構(gòu)莨菪烷類抗膽堿藥物莨菪烷衍生的氨基醇與各種不同有機酸縮合酯+生物堿當(dāng)前第3頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷含氮的生物堿(氨基)莨菪烷(Tropane)當(dāng)前第4頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tropine)當(dāng)前第5頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物硫酸阿托品當(dāng)前第6頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物硫酸莨菪堿當(dāng)前第7頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析結(jié)構(gòu)區(qū)別硫酸莨菪堿硫酸阿托品當(dāng)前第8頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析性質(zhì)區(qū)別硫酸莨菪堿硫酸阿托品熔點、溶解度、旋光度、分子量當(dāng)前第9頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物氫溴酸后馬托品當(dāng)前第10頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物氫溴酸山莨菪堿當(dāng)前第11頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物氫溴酸東莨菪堿當(dāng)前第12頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物甲溴酸東莨菪堿當(dāng)前第13頁\共有84頁\編于星期一\14點莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物丁溴酸東莨菪堿當(dāng)前第14頁\共有84頁\編于星期一\14點二、主要性質(zhì)1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品莨菪醇莨菪酸2.堿性與生物堿沉淀劑產(chǎn)生有色沉淀

阿托品和東莨菪堿結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)含有叔胺氮原子，較強的堿性，易與酸成鹽，如阿托品pKb1為4.35.當(dāng)前第15頁\共有84頁\編于星期一\14點二、主要性質(zhì)當(dāng)前第16頁\共有84頁\編于星期一\14點一、托烷生物堿一般鑒別試驗(Vitaili反應(yīng))原理：莨菪烷類生物堿結(jié)構(gòu)中的酯鍵水解后生成莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀的醇溶液和固體氫氧化鉀作用脫羧，轉(zhuǎn)化成具有共軛結(jié)構(gòu)的陰離子而顯深紫色。二、鑒別試驗托烷生物堿類的特征反應(yīng)，鑒別阿托品和莨菪堿類當(dāng)前第17頁\共有84頁\編于星期一\14點一、托烷生物堿一般鑒別試驗(Vitaili反應(yīng))取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇2～3滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。二、鑒別試驗莨菪酸硝基化脫羧化共軛結(jié)構(gòu)深紫當(dāng)前第18頁\共有84頁\編于星期一\14點二、氧化反應(yīng)(與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)）二、鑒別試驗當(dāng)前第19頁\共有84頁\編于星期一\14點三、沉淀反應(yīng)生物堿在酸性溶液中與重金屬鹽或大分子酸生成難溶性鹽、復(fù)鹽或配合物沉淀二、鑒別試驗生物堿沉淀試劑反應(yīng)條件及結(jié)果碘化鉍鉀試液橙紅或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液在酸性或堿性溶劑中生成白色或淡黃色沉淀三硝基苯酚試液結(jié)晶性沉淀并有特定熔點硅鎢酸試液白色、淡黃色或黃棕色沉淀磷鎢酸試液酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀當(dāng)前第20頁\共有84頁\編于星期一\14點三、沉淀反應(yīng)二、鑒別試驗當(dāng)前第21頁\共有84頁\編于星期一\14點四、光譜鑒別法紫外光譜法一般通過比較藥物的或吸收光譜的一致性來進行鑒別以及吸光系數(shù)二、鑒別試驗當(dāng)前第22頁\共有84頁\編于星期一\14點四、光譜鑒別法紅外光譜法CHP收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進行鑒別二、鑒別試驗當(dāng)前第23頁\共有84頁\編于星期一\14點五、色譜鑒別法色譜法一般用于已知生物堿的鑒別，主要有TLC、HPLC、GC、PC等二、鑒別試驗當(dāng)前第24頁\共有84頁\編于星期一\14點六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在通過加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色二、鑒別試驗當(dāng)前第25頁\共有84頁\編于星期一\14點Chp氫溴酸東莨菪堿的鑒別：六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)當(dāng)前第26頁\共有84頁\編于星期一\14點三、特殊雜質(zhì)與檢查一、氫溴酸東莨菪堿制備工藝洋金花粗粉乙醇/滲漉滲漉液減壓蒸餾浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取總生物堿Na2CO3,CHCl3/分離東莨菪堿HBr/成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）75%C2H5OH/精制成品根據(jù)其制備工藝，本品可通過酸度、其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進行控制當(dāng)前第27頁\共有84頁\編于星期一\14點一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查酸度東莨菪堿堿性很弱，對石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。如氫溴酸東莨菪堿為強酸弱堿鹽、通過其5%的水溶液pH為4.0~5.5，可控制酸性雜質(zhì)三、特殊雜質(zhì)與檢查當(dāng)前第28頁\共有84頁\編于星期一\14點一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機物，他們的紫外吸收波長會紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色三、特殊雜質(zhì)與檢查當(dāng)前第29頁\共有84頁\編于星期一\14點一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機物，他們的紫外吸收波長會紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色三、特殊雜質(zhì)與檢查當(dāng)前第30頁\共有84頁\編于星期一\14點一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查其它生物堿本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存在時，則易產(chǎn)生混濁。三、特殊雜質(zhì)與檢查當(dāng)前第31頁\共有84頁\編于星期一\14點本品水溶液一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查檢查方法：當(dāng)前第32頁\共有84頁\編于星期一\14點其他生物堿ab當(dāng)前第33頁\共有84頁\編于星期一\14點二、硫酸阿托品硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對莨菪堿雜質(zhì)進行檢查CHP用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保留時間來控制雜質(zhì)限度三、特殊雜質(zhì)與檢查當(dāng)前第34頁\共有84頁\編于星期一\14點第四節(jié)含量測定莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強、臨床使用劑量較少，因此測定方法要專屬、靈敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色譜法當(dāng)前第35頁\共有84頁\編于星期一\14點UV

酸性染料比色法在一定的pH條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進而可用分光光度法進行測量第四節(jié)含量測定當(dāng)前第36頁\共有84頁\編于星期一\14點酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特征波長處的吸光度，即可進行含量測定第四節(jié)含量測定當(dāng)前第37頁\共有84頁\編于星期一\14點當(dāng)前第38頁\共有84頁\編于星期一\14點酸性染料比色法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第39頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四節(jié)含量測定當(dāng)前第40頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH過低抑制酸性染料的解離、使酸性陰離子濃度過低影響離子對的形成；pH過高，有機藥物呈游離態(tài)，也抑制離子對的形成，因此須有一個最佳pH值存在，使離子對生成最有利。其選擇方法一般根據(jù)藥物與染料的pK值及水相與有機相的分配系數(shù)而定第四節(jié)含量測定當(dāng)前第41頁\共有84頁\編于星期一\14點水相最佳pH當(dāng)前第42頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素

酸性染料及其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量一般認(rèn)為對測定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。但濃度過高的話就會形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測定結(jié)果。第四節(jié)含量測定當(dāng)前第43頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素有機溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想一般應(yīng)選擇對有機堿藥物與酸性染料形成離子對萃取效率高、能與離子對形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機溶劑作為萃取溶劑。第四節(jié)含量測定當(dāng)前第44頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素水分的影響：第四節(jié)含量測定當(dāng)前第45頁\共有84頁\編于星期一\14點影響因素酸性染料里面的有色雜質(zhì)影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去第四節(jié)含量測定當(dāng)前第46頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例氫溴酸東莨菪堿片的含量測定精密量取對照品溶液和供試品溶液各2ml，分別置預(yù)先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液4ml，振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外-可見分光光度法，在420nm波長處分別測定吸光度，計算，即得。第四節(jié)含量測定本法主要適用于紫外吸收弱、標(biāo)示量低的有機堿性藥物（生物堿）制劑的含量或含量均勻度的測定。當(dāng)前第47頁\共有84頁\編于星期一\14點

當(dāng)前第48頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例硫酸阿托品片的含量測定當(dāng)前第49頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例硫酸阿托品片的含量測定當(dāng)前第50頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例硫酸阿托品片的含量測定當(dāng)前第51頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例硫酸阿托品片的含量測定當(dāng)前第52頁\共有84頁\編于星期一\14點二、非水溶液滴定法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第53頁\共有84頁\編于星期一\14點二、非水溶液滴定法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第54頁\共有84頁\編于星期一\14點二、非水溶液滴定法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第55頁\共有84頁\編于星期一\14點三、高效液相色譜法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第56頁\共有84頁\編于星期一\14點當(dāng)前第57頁\共有84頁\編于星期一\14點三、高效液相色譜法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第58頁\共有84頁\編于星期一\14點三、高效液相色譜法第四節(jié)含量測定當(dāng)前第59頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例第四節(jié)含量測定當(dāng)前第60頁\共有84頁\編于星期一\14點當(dāng)前第61頁\共有84頁\編于星期一\14點應(yīng)用示例第四節(jié)含量測定當(dāng)前第62頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考1、莨菪烷類生物堿的特征反應(yīng)是A、與三氯化鐵反應(yīng)B、與生物堿沉淀劑反應(yīng)C、重氮化-偶合反應(yīng)D、丙二酰脲反應(yīng)E、Vitali反應(yīng)當(dāng)前第63頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考2、藥物水解后，與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味的藥物是A、氫溴酸山莨菪堿B、異煙肼C、硫酸奎寧D、鹽酸氯丙嗪E、地西泮當(dāng)前第64頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考3、影響酸性染料比色法的最主要因素是A、水相pHB、酸性染料的種類C、有機溶劑的種類D、酸性染料的濃度E、水分的影響當(dāng)前第65頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考4、采用酸性染料比色法測定藥物含量，如果溶液pH過低對測定造成的影響是A、使In-濃度太低，而影響離子對的形成B、有機堿藥物呈游離狀態(tài)C、使In-濃度太高D、沒有影響E、有利于離子對的形成當(dāng)前第66頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考5、離子對HPLC要在流動相中加入與呈解離狀態(tài)的待測組分離子電荷相反的離子對試劑，分析堿性物質(zhì)時常用的離子對試劑有A、戊烷磺酸鈉B、庚烷磺酸鈉C、十二烷基磺酸鈉D、四丁基溴化銨E、四丁基氫氧化銨當(dāng)前第67頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考6、離子對HPLC要在流動相中加入與呈解離狀態(tài)的待測組分離子電荷相反的離子對試劑，分析酸性物質(zhì)時常用的離子對試劑有A、戊烷磺酸鈉B、庚烷磺酸鈉C、十二烷基磺酸鈉D、四丁基溴化銨E、四丁基氫氧化銨當(dāng)前第68頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考7、氫溴酸東莨菪堿中其他生物堿的檢查方法是A、水溶液加入氨試液產(chǎn)生渾濁B、水溶液加入氨試液不得發(fā)生渾濁C、加入氫氧化鉀試液則有渾濁D、加氫氧化鉀試液無渾濁E、加氫氧化鉀試液數(shù)滴，只發(fā)生瞬即消失的類白色渾濁當(dāng)前第69頁\共有84頁\編于星期一\14點練習(xí)與思考8、ChP2010硫酸阿托品含量測定：取本品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸與醋酐各10mL溶解后，加結(jié)晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍(lán)色，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。已知：取樣量為0.5009g，高氯酸滴定液濃度C=0.1028mol/L，V空=0.04mL；V樣=7.05mL；(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O分子量694.83當(dāng)前第70頁\共有84頁\編于星期一\14點思考題簡述酸性染料比色法的原理和影響因素。當(dāng)前第71頁\共有84頁\編于星期一\14點當(dāng)前第72頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題1．藥品臨床試驗管理規(guī)范的英文縮寫是（）A.GAPB.GCPC.GLPD.GMPE.GSP當(dāng)前第73頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題2．關(guān)于中國藥典最恰當(dāng)?shù)恼f法是（）A.關(guān)于藥物分析的書B.收載我國生產(chǎn)的所有藥物的書C.關(guān)于藥物的詞典D.國家監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)E關(guān)于中草藥和中成藥的技術(shù)規(guī)范當(dāng)前第74頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題3.藥品質(zhì)量的全面控制是()A.藥品研究、生產(chǎn)、供應(yīng)、臨床使用和有關(guān)技術(shù)的管理規(guī)范、條例的制度與實施B.藥品生產(chǎn)和供應(yīng)的質(zhì)量控制C.真正做到把準(zhǔn)確、可靠的藥品檢驗數(shù)據(jù)作為產(chǎn)品質(zhì)量評價、科研成果鑒定的基礎(chǔ)和依據(jù)D.幫助藥品檢驗機構(gòu)提高工作質(zhì)量和信譽E.樹立全國自上而下的藥品檢驗機構(gòu)的技術(shù)權(quán)威性和合法地位當(dāng)前第75頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題6．日本藥局方的英文縮寫是（）A.BPB.JPC.USPD.CHPE.以上都不是

當(dāng)前第76頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題7．GLP的中文全稱是（）A.藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范B.藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范C.藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范D.藥品臨床試驗管理規(guī)范E.分析質(zhì)量管理規(guī)范當(dāng)前第77頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題8．中國藥典中既對藥品具有鑒別意義，又能反映藥品的純雜程度的項目是（）A.外觀形狀B.物理常數(shù)C.鑒別D.檢查E.含量測定當(dāng)前第78頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題9．中國藥典（2010年版）規(guī)定的“溶解”系指1g或1ml溶質(zhì)能溶解在（）A.1ml溶液中B.1~10ml溶液中C10~30ml溶液中D.30~100ml溶液中E.100~1000ml溶液中當(dāng)前第79頁\共有84頁\編于星期一\14點習(xí)題11．中國藥典（2010年版）規(guī)定，“精密稱定”時，系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取質(zhì)量的（）A.百分之十B.百分之一C.千分