高中生物-動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體教學(xué)課件設(shè)計(jì)

專題2細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體一、動(dòng)物細(xì)胞融合1、概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。(也稱細(xì)胞雜交）2、結(jié)果：形成雜交細(xì)胞3、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性5、過(guò)程4、誘導(dǎo)方法物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒（特有）7、最有價(jià)值的應(yīng)用：

制備單克隆抗體6、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。人們獲得抗體的傳統(tǒng)方法：動(dòng)物體內(nèi)抗體（血清）

（抗原不純）（抗體不純）篩選單一漿細(xì)胞可產(chǎn)生單一抗體，但不能無(wú)限增殖

抗原

漿細(xì)胞缺陷：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。二、制備單克隆抗體一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞

雜交細(xì)胞設(shè)計(jì)方案：（體外不能無(wú)限增殖）能無(wú)限增殖1、概念單克隆抗體:單個(gè)B淋巴細(xì)胞通過(guò)克隆形成細(xì)胞群，產(chǎn)生化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體Q11、只考慮兩兩融合，培養(yǎng)液中融合細(xì)胞幾種類型？B-B;B-瘤;瘤-瘤2、哪種是需要的類型，要篩選嗎？注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合B-瘤（雜交瘤細(xì)胞）選擇性培養(yǎng)基有限稀釋法稀釋多次稀釋將多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的培養(yǎng)孔內(nèi)的上清液取出，檢測(cè)抗體。誘導(dǎo)融合雜交瘤細(xì)胞（B-瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)單克隆抗體2、單克隆抗體制備過(guò)程小鼠注射特定抗原B淋巴細(xì)胞B-B細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞未融合細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基骨髓瘤細(xì)胞1、注射特異性抗原的目的：獲得能產(chǎn)生所需抗體的B淋巴細(xì)胞2、選擇性培養(yǎng)基的特點(diǎn)：未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)3、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體。4、兩次篩選的目的：第一次：篩選出雜交瘤細(xì)胞第二次：篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞5、獲取抗體的方法：（1）體外大規(guī)模培養(yǎng)----培養(yǎng)液中提?。?）小鼠腹腔內(nèi)增殖----小鼠腹水中提取6、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備7、此過(guò)程用到的生物技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)3、應(yīng)用：

①作為診斷試劑：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并與之特異性結(jié)合②治療疾病和運(yùn)載藥物：生物導(dǎo)彈=單克隆抗體+藥物，治療腫瘤優(yōu)勢(shì)：既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。(“生物導(dǎo)彈”—單克隆抗體有導(dǎo)向作用，藥物為彈頭)兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)三、課堂小結(jié)你記住了嗎？－－滅活的病毒－－雜交瘤細(xì)胞－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的優(yōu)勢(shì)2010-3-26171、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（

）A.誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段完全相同

C.所采用的原理完全相同

D.都能形成雜種細(xì)胞課堂練習(xí)D2010-3-26182、用a表示骨髓瘤細(xì)胞，用b表示B淋巴細(xì)胞，則細(xì)胞融合過(guò)程中兩次篩選的目的分別是（）

A.a、aa、ab、bb、ba、aa、ababB.a、aa、ab、bb、bab、bb、babC.a、aa、ab、bb、bab產(chǎn)生特定抗體的abD.a、aa、ab、bb、baa能無(wú)限增殖的aaC2010-3-26193.單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）

①B淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A．②④B．①③⑤

C．①②③④

D．②③C2010-3-26204.關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是()A.可以制成診斷盒，用于疾病的診斷

B.可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療

C.可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)

D.可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)D2010-3-2621(1).該實(shí)驗(yàn)方案的目的是：B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

5.右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無(wú)法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞。(2).該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？2010-3-2622B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

(3).A是從小鼠的脾臟中取得__________該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______。(4).圖中B為_________過(guò)程，常用___________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承_________的遺傳特性，既能__________,又能___________。B淋巴細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活的病毒雙親細(xì)胞產(chǎn)生專一抗體無(wú)限增殖2010-3-2623B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠