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文檔簡介

微生物專題復習1概念梳理2知識延伸3課堂練習CONTENTS目錄概念梳理01概念3發(fā)酵工程利用微生物的特定功能規(guī)?;a對人類有用的產品3.1獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎3.1.1闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提3.1.2闡明無菌技術是在操作過程中,保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技木3.1.3舉例說明通過調整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物3.1.4概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法3.1.5概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計數法是測定微生物數量的常用方法3.2發(fā)酵工程為人類提供多樣的生物產品3.2.1舉例說明日常生活中的某些食品是運用傳統(tǒng)發(fā)酵技術生產的3.2.2闡明發(fā)酵工程利用現(xiàn)代工程技術及微生物的特定功能,工業(yè)化生產人類所需產品3.2.3舉例說明發(fā)酵工程在醫(yī)藥、食品及其他工農業(yè)生產上有重要的應用價值生物學課程標準(2017版)要求一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項計算稱量熔化調PH值滅菌倒平板步驟實驗目的培養(yǎng)硝化細菌培養(yǎng)耐鹽細菌挑選大腸桿菌培養(yǎng)纖維素降解菌擴大培養(yǎng)目的菌一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制成分狀態(tài)計算稱量熔化調PH值滅菌倒平板步驟實驗目的培養(yǎng)硝化細菌培養(yǎng)耐鹽細菌挑選大腸桿菌培養(yǎng)纖維素降解菌擴大培養(yǎng)目的菌用途:選擇;鑒別狀態(tài):固態(tài)(凝固劑);

液態(tài)一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制接種方法比較稀釋涂布法平板劃線法一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制接種方法比較稀釋涂布法平板劃線法操作工具操作結果涂布器均勻菌落能得到單菌落適宜濃度可以計數接種環(huán)不均勻菌落能得到單菌落不可以計數一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法倒置、恒溫培養(yǎng)箱震蕩培養(yǎng)、搖床倒置培養(yǎng)減少外來微生物污染防止冷凝水減少水分流失菌落生長集中易觀察震蕩培養(yǎng)增加培養(yǎng)基中的氧容量微生物與營養(yǎng)物質充分接觸,提高增殖速度一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法顯微鏡直接計數法稀釋涂布平板計數法比濁計數法顯微鏡直接計數法估測值>實際值,原因?如何減小計數誤差?一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物倒置、恒溫培養(yǎng)箱震蕩培養(yǎng)、搖床基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法倒置、恒溫培養(yǎng)箱搖床、震蕩顯微鏡直接計數法稀釋涂布平板計數法比濁計數法稀釋涂布平板計數法(間接計數、菌落計數)適宜濃度;30-300估測值<實際值時間滯后一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法倒置、恒溫培養(yǎng)箱搖床、震蕩顯微鏡直接計數法稀釋涂布平板計數法比濁計數法比濁計數法(間接計數)比濁計數是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。可用一系列已知菌數的菌懸液測定光密度,作出光密度—菌數標準曲線。然后,以樣品液所測得的光密度,從標準曲線中查出對應的菌數一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物基本流程取材配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法倒置、恒溫培養(yǎng)箱搖床、震蕩顯微鏡直接計數法稀釋涂布平板計數法比濁計數法一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物菌種保藏目的在于使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的各種特征和生理活性?;驹硎鞘刮⑸锏纳顒犹幱诎胗谰眯缘男菝郀顟B(tài),也就是使微生物的新陳代謝作用限制在最低范圍內。干燥、低溫和隔絕空氣是保證獲得這種狀態(tài)的主要措施。常用的方法有凍干保藏法、液氮保藏法等。日常工作中,常選用4℃冰箱進行短時間的菌種保藏?;玖鞒倘〔呐渲婆囵B(yǎng)基接種培養(yǎng)純化計數保存梯度稀釋注意事項按需配制稀釋涂布法、平板劃線法倒置、恒溫培養(yǎng)箱搖床、震蕩顯微鏡直接計數法稀釋涂布平板計數法比濁計數法一.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物無菌技術二.傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用發(fā)酵產品發(fā)酵菌種結構特點代謝類型發(fā)酵溫度氧氣條件發(fā)酵裝置物質檢測果酒真核18-25CO2酒精果醋醋酸桿菌30-35泡菜原核室溫亞硝酸鹽腐乳毛霉菌異養(yǎng)需氧15-18需氧二.傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用發(fā)酵產品發(fā)酵菌種結構特點代謝類型發(fā)酵溫度氧氣條件發(fā)酵裝置物質檢測果酒酵母菌真核異養(yǎng)兼性厭氧18-25前期需氧后期無氧CO2酒精果醋醋酸桿菌原核異養(yǎng)需氧30-35需氧泡菜乳酸桿菌原核異養(yǎng)厭氧室溫無氧亞硝酸鹽腐乳毛霉菌真核異養(yǎng)需氧15-18需氧自然菌種,無需嚴格無菌知識延伸02知識延伸1:培養(yǎng)基培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質,既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。微生物培養(yǎng)(細菌、真菌)動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)成分水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子水、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等水、蔗糖、大量元素、微量元素、植物激素等狀態(tài)固態(tài)—菌落液態(tài)—工業(yè)生產常用液態(tài)常用固態(tài)知識延伸2:菌種鑒定常規(guī)鑒定--

菌落特征形態(tài)特征顯微形態(tài)知識延伸2:菌種鑒定常規(guī)鑒定--

理化特性:包括營養(yǎng)類型、碳氮源利用能力、各種代謝反應、酶反應和血清學反應等知識延伸2:菌種鑒定分子生物學鑒定:應用分子生物學方法從遺傳進化角度闡明微生物種群之間的分類學關系16SrDNA鑒定:利用細菌16SrDNA序列測序的方法對細菌進行種屬鑒定原理:16SrDNA普遍存在于原核生物中。16SrDNA的相對分子量大小適中,便于序列分析。在16SrDNA分子中,既含有高度保守的序列區(qū)域,又有中度保守和高度變化的序列區(qū)域??勺儏^(qū)序列因細菌不同而異,恒定區(qū)序列基本保守,所以可利用恒定區(qū)序列設計引物,將16SrDNA片段擴增出來,利用可變區(qū)序列的差異來對不同菌屬、菌種的細菌進行分類鑒定。知識延伸2:菌種鑒定分子生物學鑒定:應用分子生物學方法從遺傳進化角度闡明微生物種群之間的分類學關系16SrDNA鑒定:利用細菌16SrDNA序列測序的方法對細菌進行種屬鑒定技術流程:知識延伸2:菌種鑒定分子生物學鑒定:應用分子生物學方法從遺傳進化角度闡明微生物種群之間的分類學關系16SrDNA鑒定:利用細菌16SrDNA序列測序的方法對細菌進行種屬鑒定結果圖:知識延伸3:教材中的典型微生物任務:請同學們回憶教材中學過哪些典型的微生物?知識延伸3:教材中的典型微生物任務:請同學們回憶教材中學過哪些典型的微生物?知識延伸3:教材中的典型微生物必修1:藍藻(藍細菌)酵母菌小球藻硝化細菌必修2:肺炎雙球菌T2噬菌體必修3:HIV病毒分解者原核、自養(yǎng)需氧型(光合自養(yǎng))真核、自養(yǎng)需氧型(光合自養(yǎng))原核、自養(yǎng)需氧型(化能自養(yǎng))原核、DNA是其遺傳物質主要是細菌和真菌病毒知識延伸3:教材中的典型微生物--病毒結構特點:無細胞結構物質組成:蛋白質+某一種核酸(DNA或RNA)分類:DNA病毒、RNA病毒

動物病毒、植物病毒、細菌病毒4.代謝特點:無獨立代謝,特異性寄生5.增殖過程:識別--吸附—注入—合成—組裝—釋放6.應用:

基因工程載體、促進動物細胞融合、做疫苗知識延伸3:教材中的典型微生物選修1:酵母菌醋酸桿菌乳酸桿菌毛霉選修3:動、植物病毒大腸桿菌農桿菌滅活的仙臺病毒基因工程--運載體基因工程--受體細胞基因工程-農桿菌轉化法細胞工程-誘導動物細胞融合傳統(tǒng)發(fā)酵技術知識延伸4:微生物與現(xiàn)代生物技術1.定向改造植物:如抗逆、抗病、抗蟲植物知識延伸4:微生物與現(xiàn)代生物技術病毒感染細胞導致干擾素的產生,并隨被感染細胞死亡、崩解而釋出。干擾素分子向附近擴散,隨血液循環(huán)至全身,作用于動物機體內的干擾素受體,經信號傳導等一系列的生物化學過程,啟動基因合成抗病毒蛋白。該蛋白能阻斷病毒mRNA與宿主細胞核糖體之間相互結合,抑制病毒多肽鏈的合成,即阻斷病毒的繁殖,起到抗病毒的作用。干擾素作用機理2.大量生產基因工程藥品知識延伸4:微生物與現(xiàn)代生物技術重組干擾素制備流程2.大量生產基因工程藥品知識延伸5:微生物與食品安全食品微生物檢測食品微生物(foodmicroorganisms)是與食品有關的微生物的總稱。包括生產型食品微生物(醋酸桿菌,酵母菌等)和使食物變質(霉菌,細菌等)和食源性病原微生物(大腸桿菌,肉毒桿菌等)食品微生物檢驗是衡量食品衛(wèi)生質量的重要指標之一,也是判定被檢食品是否食用的科學依據之一。我國開展微生物檢驗的重點食品種類為:奶制品、罐頭食品、調味品、蛋制品、淀粉類制品、發(fā)酵和非發(fā)酵性豆制品、冷凍飲品、糖果、飲用天然礦泉水等,其中食糖以及保健品的微生物檢驗為我國所獨有知識延伸5:微生物與食品安全食品微生物檢測我國衛(wèi)生部頒布的食品微生物指標有菌落總數、大腸菌群和致病菌3項1.植物病原微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產西南的四川、重慶、貴州(單季稻)、長江流域中部的江西早稻、東北稻區(qū)的黑龍江、吉林水稻種植區(qū)。嚴重田塊全田干枯“化苗”,甚至翻耕,穗頸瘟造成白穗絕收,損失稻谷63萬噸水稻稻瘟病2002年全國小麥條銹病發(fā)生面積558.27萬公頃(8374萬畝)小麥銹病1.植物病原微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產有益微生物,可以防治植物病害作用機理:2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產有益微生物,可以防治植物病害106105104103CK毛桃種子表面根癌病菌的濃度與桃苗根癌病發(fā)生呈正相關關系種子表面攜帶的根癌病菌達到103cfu·g-1時,可引起桃苗根癌病的發(fā)生根癌病病原:根癌農桿菌土壤中根癌病菌含量越高,植株發(fā)病越重;當土壤中根癌土壤桿菌的含量為103cfu·g-1時,已不適合用于核果類果樹育苗。如何獲得根癌病的“生防微生物”?種子表面攜帶根癌病菌的數量對桃根癌病發(fā)生的影響樣品采集(63份)生物型檢測變黃:1型;不變色:2型不生長:1型;生長良好:2型土壤桿菌屬細菌分離D1M培養(yǎng)基溴百里酚藍培養(yǎng)基碲酸鹽培養(yǎng)基分子檢測virD2A/virD2C引物Tip6F/Tip6R引物根癌病菌的分離與鑒定2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產根癌病病原:根癌農桿菌如何獲得根癌病的“生防微生物”?2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產根癌病病原:根癌農桿菌如何獲得根癌病的“生防微生物”?根癌病生防菌的篩選平板拮抗測定法測定待測菌株對病原菌的抑制作用選擇有抑菌圈菌株指示植物接種法評價初篩菌株的防效2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產根癌病病原:根癌農桿菌如何獲得根癌病的“生防微生物”?防病效果評價:拮抗菌對根癌土壤桿菌對植物形成根瘤的抑制作用2.生防微生物知識延伸6:微生物與農業(yè)生產根癌病病原:根癌農桿菌如何獲得根癌病的“生防微生物”?菌劑制備:菌劑搖瓶培養(yǎng)培養(yǎng)液試管斜面菌劑拌種課堂練習3例題1a.藍藻b.水綿c.酵母菌d.噬菌體關于下列a、b、c、d四種生物的敘述,不正確的是

A.a和d不具有核膜包被細胞核B.a和b都能進行光合作用C.a、b、c、d都能獨立繁殖和代謝 D.a、b、c、d都可發(fā)生基因突變腺相關病毒(AAV)是一類結構簡單的單鏈DNA病毒,能感染多種動物細胞,但不易引起免疫反應。AAV的復制需要輔助病毒(通常為腺病毒),在缺乏輔助病毒時,AAV整合其基因組到人類第19號染色體的特異性位點,進入潛伏狀態(tài)。下列有關AAV的敘述,正確的是A.是細胞內寄生的原核生物

B.與雙鏈DNA病毒相比變種少C.遺傳信息傳遞不遵循中心法則

D.可作為基因治療的理想載體例題2例題3在微生物培養(yǎng)的過程中,需要通過選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來篩選出目標菌種,下列與之相關的敘述中不正確的是A.纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料,從而使菌落周圍出現(xiàn)透明圈B.尿素分解菌能夠將尿素分解為氨,從而使酚紅指示劑變紅C.在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應抗性的菌株D.在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍會出現(xiàn)“溶鈣圈”例題4人們利用某些微生物制作食品時,需要分析微生物的特點,控制微生物的發(fā)酵條件。下列與此有關的各項內容都正確的是為獲得果膠酶高產菌株,科研人員進行了下列分離、篩選、鑒定工作。(1)為分離果膠酶產生菌,科研人員配制了下表

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