【課件】動(dòng)物細(xì)胞工程課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞核移植第2節(jié)

動(dòng)物細(xì)胞工程第2章

細(xì)胞工程是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)一

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。1.原理：2.地位：動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)細(xì)胞增殖【思考】：動(dòng)物組織的選擇：

幼齡動(dòng)物or老齡動(dòng)物幼齡動(dòng)物的細(xì)胞分化程度低、分裂能力強(qiáng)，易培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。1.原理：2.地位：3.培養(yǎng)對(duì)象：4.目的：胚胎或幼齡動(dòng)物的細(xì)胞獲得細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物細(xì)胞分化程度低、分裂能力強(qiáng)，易培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)細(xì)胞增殖一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1.營(yíng)養(yǎng)(1)成分②動(dòng)物血清由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。①葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等1.營(yíng)養(yǎng)(2)培養(yǎng)基類型②液體培養(yǎng)基①合成培養(yǎng)基將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按照種類和所需量嚴(yán)格配置而成一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件2.無菌、無毒的環(huán)境(1)無菌：①對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理②在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作定期更換培養(yǎng)液。(2)無毒：③添加一定量的抗生素以便清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件3.溫度、pH和滲透壓(1)溫度：(36.5±0.5)℃維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能(3)滲透壓：(2)pH：7.2～7.4一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件4.氣體環(huán)境(1)主要有O2和CO2細(xì)胞代謝所必需維持培養(yǎng)液的pH(2)容器：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶。(3)儀器：置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體

的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)1.培養(yǎng)前，為什么要將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞？①分散不會(huì)限制彼此的生長(zhǎng)和增殖；②利于從培養(yǎng)液中獲得營(yíng)養(yǎng)，排出代謝廢物，利于繼續(xù)培養(yǎng)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念，初步構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程培養(yǎng)根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念，初步構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：2.怎樣將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞？機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間。①說明動(dòng)物細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？蛋白質(zhì)機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理

動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程培養(yǎng)②用胃蛋白酶可以嗎？不可以，因?yàn)槲傅鞍酌傅淖钸mPH為1.5左右2.怎樣將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞？機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間。根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念，初步構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理

動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程培養(yǎng)③胰蛋白酶處理時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)怎樣？會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，把細(xì)胞消化掉2.怎樣將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞？機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間。根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念，初步構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理

動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程培養(yǎng)3.分散成的單個(gè)細(xì)胞，如何培養(yǎng)？用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。加培養(yǎng)液細(xì)胞懸液培養(yǎng)培養(yǎng)皿/瓶適宜條件根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念，初步構(gòu)建動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液★4.體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞分類:(1)懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖(2)貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞（主要類型）細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖懸浮培養(yǎng)瓶培養(yǎng)機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理培養(yǎng)皿/瓶適宜條件細(xì)胞貼壁過程圓球形細(xì)胞剛開始鋪展貼壁生長(zhǎng)(100×)培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)并進(jìn)行有絲分裂(100×)細(xì)胞單層貼壁生長(zhǎng)鋪滿瓶壁后出現(xiàn)接觸抑制(100×)貼壁生長(zhǎng)與接觸抑制二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液★4.體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞分類:(1)懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖(2)貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞（主要類型）細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖懸浮培養(yǎng)瓶培養(yǎng)具有細(xì)胞貼壁、接觸抑制的現(xiàn)象機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理培養(yǎng)皿/瓶適宜條件二.

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程5.細(xì)胞分裂會(huì)受阻原因：懸浮生長(zhǎng)貼壁生長(zhǎng)(大多數(shù))動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液培養(yǎng)機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理培養(yǎng)皿/瓶適宜條件細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等接觸抑制細(xì)胞分裂受阻如何解決？二.

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程★6.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液培養(yǎng)機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理培養(yǎng)皿/瓶適宜條件原代培養(yǎng)適宜條件分瓶培養(yǎng)傳代培養(yǎng)分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。判斷依據(jù)：胰蛋白酶處理的對(duì)象和是否分瓶！指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)；(1)原代培養(yǎng)：(2)傳代培養(yǎng)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)如何分瓶培養(yǎng)？二.

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程★7.進(jìn)行傳代培養(yǎng)(分瓶培養(yǎng))的操作：動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液培養(yǎng)機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理培養(yǎng)皿/瓶適宜條件原代培養(yǎng)適宜條件分瓶培養(yǎng)傳代培養(yǎng)(2)制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)(1)收集細(xì)胞懸浮細(xì)胞離心法收集貼壁細(xì)胞胰蛋白酶處理離心法收集思考細(xì)胞增殖到互相接觸的時(shí)候，什么物質(zhì)識(shí)別到這種信息，使細(xì)胞停止分裂繁殖，出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象?糖蛋白結(jié)合上述解釋，嘗試闡述癌細(xì)胞無接觸抑制現(xiàn)象的原因。癌細(xì)胞的細(xì)胞膜上糖蛋白等物質(zhì)減少，無法識(shí)別到相互接觸的信息而失去接觸抑制三.

干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用1.概念：動(dòng)物和人體內(nèi)保留的具有分裂和分化能力的細(xì)胞2.分布：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等3.分類：包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等三.

干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用

來源或分布功能、特點(diǎn)局限性應(yīng)用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至個(gè)體成體組織或器官體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功