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實(shí)驗(yàn)五網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)1一、試管法
【目的】掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞試管法的原理及操作方法。
【原理】網(wǎng)織紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)等染液活體染色后呈藍(lán)色網(wǎng)織狀或點(diǎn)粒狀,可與完全成熟的紅細(xì)胞區(qū)別。2【操作】1.加染液2.加血染色3.制備涂片4.觀察5.計(jì)數(shù)6.計(jì)算7.報(bào)告方式3
【注意事項(xiàng)】1.染液質(zhì)量直接影響網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性?;徒褂退{(lán)染液長(zhǎng)期普遍應(yīng)用,但溶解度低,易形成沉渣吸附于紅細(xì)胞表面;新亞甲藍(lán)對(duì)Ret染色力強(qiáng)且穩(wěn)定,是WHO推薦使用的染液。試劑應(yīng)定期配制,以免變質(zhì)沉淀。瑞氏染液復(fù)染可使網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)值偏低。
2.染色時(shí)間不能過(guò)短,室溫低時(shí),可放置37℃溫箱或適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。染液與血液的比例以1∶1為宜。4
3.因網(wǎng)織紅細(xì)胞在體外仍繼續(xù)成熟,其數(shù)量隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)而遞減,所以標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)處理;標(biāo)本染色后也應(yīng)及時(shí)測(cè)定,因染料吸附可人為增高網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值。
4.選擇紅細(xì)胞分布均勻、網(wǎng)織紅細(xì)胞著色好的部位計(jì)數(shù)。由于網(wǎng)織紅細(xì)胞體積較大,故應(yīng)兼顧血片邊緣和尾部。5二、玻片法
【目的】掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞玻片法的原理及操作方法。
【原理】網(wǎng)織紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核蛋白體和核糖核酸(RNA)等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)等染液活體染色后呈藍(lán)色網(wǎng)織狀或點(diǎn)粒狀,可與完全成熟的紅細(xì)胞區(qū)別。6【操作】1.加染液
2.加血液
3.制備涂片
4.觀察
5.計(jì)數(shù)
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