豬冷凍精液技術(shù)規(guī)程

豬冷凍精液1范圍本文件規(guī)定了豬冷凍精液的術(shù)語與定義、產(chǎn)品質(zhì)量要求，抽樣，檢驗(yàn)規(guī)則和方法，標(biāo)志、標(biāo)簽及隨性文件，包裝、貯存和運(yùn)輸。本文件適用于豬冷凍精液產(chǎn)品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本規(guī)程必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本規(guī)程。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB23238-2021《種豬常溫精液》GBT25172-2020《豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范》GB/T5458液氮生物容器GB/T

14174-2012大口徑液氮容器GB

4789.2-2016

食品微生物學(xué)檢驗(yàn):菌落總數(shù)測定GB/T8170-2019數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1原精液采集后未經(jīng)稀釋的精液。3.2冷凍精液經(jīng)特殊方法處理，經(jīng)超低溫冷凍后可在液氮中（-196℃）長期保存種豬精液。3.3GB23238界定的術(shù)語和定義適用于本文件4質(zhì)量要求4.1種豬體型外貌和生產(chǎn)性能等符合種用要求，三代系譜資料齊全，體質(zhì)健康的公豬。4.2原精液色澤為灰白色或乳白色，精子活力≥85%，精子密度≥2億個/mL，精子畸形率≤8%。4.3冷凍精液冷凍精液細(xì)管無裂痕，兩端封口嚴(yán)密，所印字跡清晰易認(rèn)、信息齊全；解凍后的質(zhì)量應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1凍精解凍后質(zhì)量要求項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)劑型/ml0.51.05.0劑量/ml≥0.4≥0.8≥4.0精子活力/%≥60前向運(yùn)動精子數(shù)/（108個/劑）≥0.6≥1.2≥6.0精子畸形率/%≤20精子頂體完整率/%≥60細(xì)菌數(shù)/cfu≤500≤1000≤5000病原非洲豬瘟病毒、豬瘟病毒、豬圓環(huán)病毒、高致病性豬藍(lán)耳病毒、豬細(xì)小病毒和豬布X氏桿菌病原學(xué)檢測呈陰性5抽樣5.1抽樣條件抽樣場所應(yīng)潔凈、干燥和避光，抽樣用具和樣品容器應(yīng)清潔，樣品容器應(yīng)具有保溫和貯存性能。5.1.2抽樣過程中，樣品不得因抽樣受到污染，應(yīng)防止樣品原有品質(zhì)的變化。5.1.3當(dāng)從外觀可明顯看出原始樣品與同批樣品品質(zhì)不一致或冷凍精液棉塞端異常時，應(yīng)立即停止抽樣。抽樣應(yīng)由對抽樣、液氮生物容器使用以及液氮特性等熟悉的人員執(zhí)行。抽樣的每頭公豬樣品應(yīng)為同一生產(chǎn)批次的產(chǎn)品，抽樣數(shù)量不得少于16支（含復(fù)檢備樣）。5.2抽樣方法5.2.1抽樣器具抽樣時需具備下列器具：適用的抽樣器（長鑷子等）；b）液氮生物容器；c）廣口保溫容器；d）樣品袋（其容量足夠容納所需抽的原始樣品）。5.2.2操作步驟按隨機(jī)抽樣方法，對確定抽樣的種豬，從其冷凍精液貯藏容器中隨機(jī)抽取一個包裝袋，迅速浸泡入盛有液氮的廣口保溫容器中。用抽樣器在液氮中打開包裝袋，從中抽出樣品并裝入貯精管中后再轉(zhuǎn)移入樣品袋中，然后把樣品袋口扎緊。每個包裝袋應(yīng)栓系標(biāo)簽，詳細(xì)注明抽樣地點(diǎn)和日期、生產(chǎn)或銷售單位名稱、豬號、樣品數(shù)、抽樣人姓名以及其他需要說明的重要事項(xiàng)。5.2.2.4從廣口保溫容器中轉(zhuǎn)移入液氮生物容器中，期間暴露在空氣中的時間不應(yīng)超過5S，樣品應(yīng)保存于液氮生物容器的液氮中，標(biāo)簽栓系在液氮生物容器的把手上，蓋上蓋子后密封液氮生物容器。6檢驗(yàn)方法6.1冷凍精液試樣制備6.1.1樣品貯存存放冷凍精液的低溫容器質(zhì)量應(yīng)符合GB/T5458規(guī)定，使用前經(jīng)過清洗后加入新鮮液氮，樣品浸泡在液氮中。抽放樣品時在空中暴露時間不得超過5S。由專人保管樣品，樣品不允許脫離液氮，抽樣登記單與樣品隨行。樣品包裝、標(biāo)記應(yīng)保持原樣。6.1.2樣品解凍檢測4支細(xì)管分別直接置于50℃恒溫水浴中解凍15S，解凍4支與稀釋液混合后，抽精液約10μL置于載玻片上加蓋玻片，立即放在載物臺上，溫度保持38℃，用精子質(zhì)量分析系統(tǒng)（CASA）檢測分析，也可用200X～400X顯微鏡觀察活力，每樣片觀察3個視野，并應(yīng)觀察不同液層內(nèi)的精子運(yùn)動狀態(tài)，進(jìn)行全面評定。檢驗(yàn)有效時限為解凍后2min～20min。6.2測定6.2.1外觀測定采用目測法進(jìn)行。6.2.2劑量、精子活力、直線前進(jìn)運(yùn)動精子數(shù)、精子畸形率的測定按GB23238-2021附錄A中規(guī)定的方法進(jìn)行。6.2.3細(xì)菌數(shù)測定按GB

4789.2-2016中規(guī)定的方法進(jìn)行。6.2.3病原檢測參見非洲豬瘟、口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病、布X氏桿菌病相關(guān)國家/行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1常規(guī)檢驗(yàn)對種豬冷凍精液外觀和精子活力的檢驗(yàn)，通常是在生產(chǎn)批入庫前和銷售前的檢驗(yàn)。7.2型式檢驗(yàn)對種豬冷凍精液全部指標(biāo)檢驗(yàn)，在正常生產(chǎn)情況下，每季度至少進(jìn)行1次型式檢驗(yàn)。有下列情況之一時，亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：a）產(chǎn)品定型投產(chǎn)時；b）生產(chǎn)工藝、配方或主要原料來源有較大改變，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時；c）停產(chǎn)3個月以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；d）常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時；e）行政管理部門提出檢驗(yàn)要求時。7.3判定7.3.1所驗(yàn)項(xiàng)目全部合格，判定為該批次產(chǎn)品合格。7.3.2檢驗(yàn)結(jié)果中有任何指標(biāo)不符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定時，可自同批產(chǎn)品中重新加倍取樣進(jìn)行復(fù)檢。若復(fù)檢結(jié)果仍不符合本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定該批產(chǎn)品不合格。7.3.3各項(xiàng)目指標(biāo)的極限數(shù)值判定按GB/T8170中修約值比較法執(zhí)行。8標(biāo)志、標(biāo)簽和隨行文件8.1標(biāo)志冷凍精液細(xì)管外壁應(yīng)清楚標(biāo)明生產(chǎn)站名、種豬品種代碼、個體號、生產(chǎn)日期或批次。8.1.2種豬品種代碼以畜禽遺傳資源鑒定及審定部門公布的為準(zhǔn)。8.2標(biāo)簽在硬紙板或無紡布上標(biāo)注種豬品種代碼、個體號、細(xì)管數(shù)量、包裝日期、產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號、生產(chǎn)許可證號、生產(chǎn)者名稱和地址及、貯存方式和條件、使用說明等。標(biāo)簽信息可包括生產(chǎn)單位商標(biāo)或徽標(biāo)，以及可追溯的其他信息，有條件的單位宜使用二維碼信息，但二維碼信息中至少應(yīng)包括8.2.1中的信息。8.3隨行文件8.3.1隨行文件應(yīng)符合現(xiàn)行法律、法規(guī)。8.3.2隨行文件應(yīng)包括種豬系譜、檢疫證明、冷凍精液檢驗(yàn)合格證明、生產(chǎn)經(jīng)營許可證等。9包裝、運(yùn)輸和貯存9.1包裝包裝應(yīng)在液氮或-140℃以下的環(huán)境中進(jìn)行。將冷凍細(xì)管分批次裝入貯精管，包裝后的細(xì)管冷凍精液其棉塞端應(yīng)朝向貯精管的底部，不得倒置。用滅菌紗布袋將裝有冷凍精液的貯精管包裝起來，一個滅菌紗布袋一個個體，每一包裝量不得超過100劑。9.2運(yùn)輸應(yīng)在貯存容器的明顯位置呈現(xiàn)“向上”“小心輕放”等符號圖示標(biāo)志。運(yùn)輸過程中貯存容器不得碰撞或劇烈震動。9.3貯存種豬冷凍精液應(yīng)貯存