大三第四周課件醫(yī)學免疫學4球蛋白

免疫球蛋白Nanjing

University抗

體第一節(jié) 抗體Nanjing

University抗體(antibody)是由B細胞發(fā)育的終末階段的漿細胞

(plasma

cell)分泌產生的?？贵w具有特征的折疊方式，形成血漿蛋白的一個家族，在體液免疫中發(fā)揮重要作用?？贵w具有雙功能，即特異性識別抗原和募集效應分子和細胞?？贵w有兩種存在形式，即分泌型和跨膜型。一、抗體概念的建立Nanjing

University德國學者Behring和日本學者北里（Kitasato）于1890年在Koch研究所應用白喉外毒素給動物免疫，發(fā)現白喉桿菌及分泌的白喉外毒素致病，進而發(fā)現在感染者的血清中有一種能中和外毒素的物質，稱為抗毒素，即為首例發(fā)現的抗體。而將能刺激機體產生抗體的物質稱為抗原(antigen)。含有抗體的血清稱為免疫血清。將這種免疫血清轉移給正常動物也有中和外毒素的作用。

Behring于1891年應用來自動物的免疫血清成功地治療了一個白喉患者，這是第一個被動免疫治療的病例。為

此他于1902年獲得了諾貝爾醫(yī)學獎。他們也研制成功了將白喉及破傷風外毒素減毒成類毒素，進行預防接種?，F在，我們知道，抗體是B細胞識別抗原后增殖分化為

漿細胞所產生的一種蛋白質，主要存在于血清等體液中，能與相應抗原特異性地結合，具有免疫功能。Nanjing

UniversityBehring與Kitasato免疫馬制抗血清Nanjing

University二、抗體的理化性質Nanjing

University1937年Tiselius等用電泳方法，將血清分離成白蛋白和α1、α2、β及γ球蛋白等組分。

抗體主要位于球蛋白區(qū)，也有少量的可位于區(qū)及2球蛋白區(qū)?？贵w是球蛋白；抗體不是由均質性球蛋白組成，而是由異質性球蛋白組成；具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白稱為免疫球蛋白分子（immunoglobulin,Ig）。正常人血清電泳分離圖Nanjing

University續(xù)上Nanjing

University人類血清中存在五類免疫球蛋白分子，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，其中IgG量最多，IgA次之，IgM較少，IgD和IgE僅微量，它們的結構和功能是各不

相同的。免疫球蛋白具有蛋白質的通性，不耐熱，在60-70℃即被破壞，能被蛋白酶水解，凡能被蛋白質凝固變性之物

也能破壞抗體的活性；可被中性鹽類沉淀，常用50%飽和硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中提取抗體。三、抗體的自然分布Nanjing

University1、在血漿和組織液中；2、在細胞漿內內質網和高爾基體的膜和B淋巴細胞膜上；3、在某些免疫效應細胞的表面；4、在乳汁和分泌液中。第二節(jié)免疫球蛋白的基本結構Nanjing

University自40年代確立了抗體的血清球蛋白性質后，便集中精力 研究抗體的分子結構與生物學功能。Ig的分子量很大，結構復雜。

50年代Edelman打開了Ig的二硫鍵，Porter用木瓜蛋白酶水解Ig獲得了具有抗體活性的片段和易結晶片段，并對血清IgG抗體的研究證明，IgG分子的基本結構是由四條肽鏈組成的。Edelman和Porter共同獲得了1972年的諾貝爾獎。一、Ig單體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成Nanjing

UniversityIgG分子由二條相同的分子量較小的肽鏈稱為輕鏈(light chain，L鏈)和二條相同的分子量較大的肽鏈稱為重鏈

(heavychain，H鏈)組成的。

輕鏈與重鏈是由二硫鍵連接形成一個四肽鏈分子稱為Ig分子的單體，是構成免疫球蛋白分子的基本結構。

Ig單體中四條肽鏈二端游離的氨基或羧基的方向是一致的，分別命名為氨基端（N端）和羧基端（C端）。

X射線晶體結構分析發(fā)現，IgG分子由3個大小相同的節(jié)段組成，形成一個“Y”形分子。免疫球蛋白的基本結構Nanjing

University二、輕鏈(L鏈)和重鏈(H鏈)CH1CLVLVHCH2CH3HingeRegionDisulfidebondCarbohydrateNanjing

University1、L鏈大約由214個氨基酸殘基組成，通常不含碳水化合物，分子量約為25kD。每條L鏈含有兩個由鏈內二硫鍵所組成的環(huán)肽。Nanjing

UniversityL鏈根據其C區(qū)的化學結構和抗原性的差異分為二型Nanjing

University即kappa()與lambda()，同一個天然Ig分子上L鏈的型總是相同的，不是型就是型，絕無可能二型輕鏈共同存在于同一個Ig分子中。五類Ig中每類Ig都可以有鏈或鏈，兩型輕鏈的功能無差異。不同種屬中，兩型輕鏈的比例不同，正常人血清中的：約為2：1，而小鼠的約為20：1。：比例的不同可能反映免疫系統的異常。根據鏈恒定區(qū)個別氨基酸的差異，又可分為1、2、3和4四個亞型。2、H鏈大小約為L鏈的2倍，含

450-550個氨基酸殘基，分子量約為55-75kD。重鏈上結合有不同的糖，故Ig屬于糖蛋白。每條H鏈含4-5個鏈內二硫鍵所組成的環(huán)肽。不同的H鏈由于氨基酸組成的排列順序、二硫鍵的數目和位置、含糖的種類和數量不同，其抗原性也不同。Nanjing

UniversityIg的類別由重鏈決定Nanjing

University

根據H鏈抗原性的差異，可將其分為五類：鏈、鏈、鏈、鏈和鏈。

不同H鏈與L鏈（或）組成完整Ig的分子分別為IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。、和鏈上含有4個肽環(huán)，和鏈含有5個肽環(huán)。

同一類Ig根據其鉸鏈區(qū)氨基酸組成和重鏈二硫鍵的數目和位置的差異，又可分為不同的亞類。IgG可分為

IgG1、IgG2、IgG3和IgG4；IgA可分為IgA1和IgA2。IgM、IgD和IgE尚未發(fā)現有亞類。三、Ig的H鏈和L鏈分為可變區(qū)和恒定區(qū)對不同骨髓瘤蛋白或本周蛋白H鏈和L鏈的氨基酸序列比較分析，發(fā)現其氨基端（N-端）約110個氨基酸序列變化較大，稱此區(qū)為可變區(qū)（variableregion,V區(qū)），而羧基末端（C-端）則相對穩(wěn)定，變化很小，稱此區(qū)為恒定區(qū)（constant

region,C區(qū)）。Nanjing

University1、可變區(qū)（V區(qū)）Nanjing

University

位于L鏈靠近N端的1/2（約含108-111個氨基酸殘

基）和H鏈靠近N端的1/5或1/4（約含118個氨基酸殘基）。每個V區(qū)中均有一個由鏈內二硫鍵連接形成的肽環(huán)，每個肽環(huán)約含67-75個氨基酸殘基。

V區(qū)氨基酸的組成和排列隨抗體結合抗原的特異性不同

有較大的變異。由于V區(qū)中氨基酸的種類和排列順序千

變萬化，故可形成許多具有不同結合抗原特異性的抗體。Ig可變區(qū)中的高變區(qū)是抗原結合的部位Nanjing

UniversityL鏈和H鏈的V區(qū)分別稱為VL和VH。在VL和VH中各有三個局部區(qū)域的氨基酸組成和排列順序具有更高的變化程度，這些區(qū)域稱為高變區(qū)

(hypervariable

region,

HVR)，分別稱為HVR1、HVR2和HVR3。VL的三個高變區(qū)分別位于28-35、49-56和91-98位氨基酸；VH的三個高變區(qū)分別位于29-31、49-58和95-102位氨基酸。在V區(qū)中非HVR部位的氨基酸組成和排列相對比較保守，稱為骨架區(qū)(framework

region)。L鏈可變區(qū)的變化特點HVR3FR1FR2FR3FR4HVR1HVR2Variability

Index257510050Amino

acid

residue150Nanjing

University100500L鏈和H鏈中的片層結構Nanjing

UniversityIgL鏈中V區(qū)或C區(qū)的每個功能區(qū)各形成一個免疫球蛋白折疊(imunoglobulin

fold)，每個Ig折疊含有兩個大致平行、由二硫鍵連接的片層結構(betapleated

sheets)，每個片層結構由3至5股反平行的多肽鏈組成。兩個片層中心的兩個半胱氨酸殘基由一個鏈內二硫鍵垂直連接，具有穩(wěn)定功能區(qū)的作用?？勺儏^(qū)中的高變區(qū)在Ig折疊的一側形成高變區(qū)環(huán)

(hypervariable

loops)，是與抗原結合的位置?？贵w與抗原以表面互補的方式結合－互補決定區(qū)Nanjing

University經X線結晶衍射的研究分析證明，高變區(qū)形成一個與抗原決定基互補的表面，確實為抗體與抗原結合的位置，因而稱為互補性決定區(qū)（complementarity-determining

region,

CDR）。VL和VH的HVR1、HVR2和HVR3又可分別稱為CDR1、CDR2和CDR3，一般CDR3具有更高的高變程度。抗體的特異性由其CDR的序列不同決定。高變區(qū)也是Ig分子獨特型決定簇（idiotypicdeterminants）主要存在的部位。在大多數情況下H鏈在與抗原結合中起更重要的作用?？贵wCDR與抗原表位結合示意圖Nanjing

University2、恒定區(qū)Nanjing

University

位于L鏈靠近C端的1/2（約含105個氨基酸殘基）和H鏈靠近C端的

3/4或4/5區(qū)域（約從119位氨基酸至C末端）。

H鏈每個功能區(qū)約含110多個氨基酸殘基，含有由二硫鍵連接的50-60個氨基酸殘基組成的肽環(huán)。

不同類Ig重鏈CH長度不一，有的包含CH1、CH2和CH3，有的包含CH1、CH2、CH3和CH4。

同一類別的Ig其恒定區(qū)氨基酸僅有少數可被取代、增加或缺少，但不同類別Ig恒定區(qū)的這些指標差異很大。該區(qū)不僅作為Ig的骨架，且對激活免疫反應也有一定的作用。四、鉸鏈區(qū)鉸鏈區(qū)(hinge

region)位于兩條重鏈之間二硫鍵連接處附近的重鏈恒定區(qū)，即在CH1和CH2之間，由2-5個鏈間二

硫鍵、CH1尾部和CH2頭部的小段肽鏈構成，約含30個氨基酸殘基。Nanjing

University鉸鏈區(qū)賦予Ig易于結合抗原該區(qū)易發(fā)生伸展及一定程度的轉動，當VL、VH與抗原結合時，此區(qū)發(fā)生扭曲，使抗體分子上兩個抗原結合點更好地與兩個抗原決定簇發(fā)生互補；也可使Ig變構，暴露補體結合點。鉸鏈區(qū)能轉動的原因，可能是由于該區(qū)富含脯氨酸。脯氨酸是構成膠原纖維的重要成分。Nanjing

UniversityIg或亞類的鉸鏈區(qū)不相同IgG1、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區(qū)較短，IgG3和IgD的鉸鏈區(qū)較長，IgM和IgE缺乏鉸鏈區(qū)。Nanjing

University五、J鏈和分泌成分Nanjing

University

J鏈：存在于二聚體分泌型IgA和五聚體IgM中。J鏈分子量為15KD，由124個氨基酸組成的酸性蛋白，富含半胱氨酸，由漿細胞合成。J鏈起穩(wěn)定多聚體的作用。J鏈的成分都相同，即只有一種J鏈，它以二硫鍵的形式共價結合到Ig的重鏈上。

分泌成分：又稱分泌片(secretory

piece)，是分泌型IgA上的一個輔助成分，分子量約為75KD，為一種含糖的肽鏈，以共價形式結合到二聚體IgA分子上，并一起被分泌到粘膜表面。SC的存在對于抵抗外分泌液中蛋白水解酶的降解具有重要作用，并介導IgA的轉運。分泌片與IgA的形成無密切的關系，分泌片是由粘膜上皮細胞合成和分泌的。J鏈和分泌片示意圖Nanjing

University六、酶解抗體初步揭示其結構Nanjing

University1、木瓜蛋白酶水解IgG片段共裂解為三個片段：①兩個相同的Fab段（抗原結合段，

Fab），相當與抗體分子的兩個臂，每個Fab段由一條完整的L鏈和一條約為1/2的H段組成。Fab分子量約為

54kD。一個完整的Fab段可與抗原結合，表現為單價，但不能形成凝集或沉淀反應。Fab中約1/2H鏈部分稱為

Fd段。②一個Fc段（可結晶段，Fc），由連接H鏈的二硫鍵和近羧基端兩條約1/2的H鏈所組成，分子量約為50kD。Fc段無抗原結合活性，是抗體分子與效應分子和細胞相互作用的部位。Ig在異種間免疫所具有的抗原性主要存在于Fc段。PapainFcNanjing

UniversityFab2、胃蛋白酶水解IgG片段裂解片段：①一個F（ab’）2，包括一對完整的L鏈和由鏈間二硫鍵相連的一對略大于Fab片段中的Fd的H鏈，稱為Fd’。F（ab’）2具有雙價抗體活性，與抗原結合可發(fā)生凝集和沉淀反應。F（ab’）2由于缺乏Fc部分，不具有固定補體以及與細胞膜表面Fc受體結合的功能。F（ab’）2經還原等處理后，H鏈間的二硫鍵可發(fā)生斷裂而形成兩個相同的Fab’片段。②Fc’片段可繼續(xù)被胃蛋白酶水解成更小的片段，失去生物活性。PepsinFc

PeptidesNanjing

UniversityF(ab’)2水解片段Nanjing

University七、Ig具有三種抗原性Nanjing

University同種型同種異型獨特型第三節(jié) 抗體的功能Nanjing

University抗體是體液免疫應答的重要介質，能特異性識別并結合抗原分子，但這種結合不能達到消滅病原體的目的。因此，抗體在結合抗原分子后，還需要借助其他效應細胞或分子清除抗原，以維持機體的健康。抗體的功能主要包括特異性結合抗原、中和作用、調理作用、活化補體以及對免疫應答有正負調節(jié)作用等。一、特異性結合抗原Nanjing

UniversityIg最顯著的生物學特點是能夠識別并特異性地與相應的抗原結合。這種結合在體內介導多種生理和病理效應，從而發(fā)揮免疫效應，清除病原微生物或引起免疫病理損傷；在體外引起各種抗原抗體反應。Ig的類別決定免疫效應的形式?？贵w分子可有單體、雙體和五聚體，因此結合抗原決定簇的數目（結合價）也不相同。Fab段為單價，不能產生凝集反應和沉淀反應。F（abˊ）2和單體Ig為雙價。雙體分泌型IgA有4價。五聚體IgM10價，但實際上由于立體構型的空間位阻，一般只有5個結合點可結合抗原。二、活化補體，以便清除病原體Nanjing

UniversityIgM、IgG1、IgG2和IgG3與抗原結合后，可通過經典途徑活化補體；聚合的IgA可通過替代途徑活化補體；IgD、IgG4和IgE等不能激活補體。補體的經典途徑的活化可由復合物中的IgG與IgM的Fc區(qū)與補體成分C1q的結合所啟動。C1q與IgG的單個Fc區(qū)的親和力是不充足的。因此C1q可與聚集形式的IgG結合。

IgM是五聚體，循環(huán)的IgM可與C1q結合，其結合區(qū)域為

IgM的C3區(qū)。三、抗體的調理作用－增強吞噬細胞的吞噬功能Nanjing

University在體外的實驗中，如將免疫血清加入單核吞噬細胞或中性粒細胞的懸浮液，可增強對相應細菌的吞噬作用，稱這種現象為抗體的調理作用。這是由于單核吞噬細胞和中性粒細胞表面表達IgG的Fc受體，結合抗原的IgG與這些Fc受體結合，可促進吞噬細胞對抗原（病原體）的吞噬。

不同細胞表面具有不同Ig的Fc受體，分別用FcR、FcR、FcR等表示。當Ig與相應抗原結合后，由于構型的改變，其Fc段可與具有相應受體的細胞結合。抗體與Fc受體結合可誘發(fā)的作用Nanjing

University介導I型變態(tài)反應；調理吞噬作用；發(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用(ADCC)：指中性 粒細胞、單核巨噬細胞，尤其是NK細胞可通過其表面的

FcR（CD16）與Ig的相互作用產生一種溶解各種靶細胞 的細胞毒性作用。人IgGFc段能非特異地與葡萄球菌A蛋白（SPA）結合，應用SPA可純化IgG等抗體，或代替第二抗體用于標記技術。BACK介導I型超敏反應Nanjing

University抗體的調理作用Nanjing

University抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用

(ADCC)Nanjing

University四、由分泌抗體所致的抗原中和作用Nanjing

University

許多對機體有害的因子，如毒素、藥物、病毒、細菌和其它寄生蟲可通過與特殊細胞受體結合而造成機體的損害，而分泌抗體可通過與其結合阻止它們與相應受體的結合，這種作用稱為中和作用(neutralizaing)。母體的sIgA可分泌到乳汁中起到中和作用?？贵w的功能小結Nanjing

University第四節(jié)五類抗體的特性與功能Nanjing

University一、IgG－是再次免疫應答的主要抗體Nanjing

University1、IgG于出生后3個月開始合成2、IgG多為單體，半衰期約為23天，占血清免疫球蛋白總量的75%～80%3、IgG1、IgG2和IgG3的CH2

能通過經典途徑激活補體

4、IgG是唯一能通過胎盤的抗體5、通過Fc段與吞噬細胞表面

FcR結合，發(fā)揮調理作用；與K細胞結合，發(fā)揮ADCC作用；與葡萄球菌A蛋白結合6、具有抗菌、抗毒和抗病毒作用7、參與II、III型超敏反應IgG亞類的結構示意圖Nanjing

University二、IgM－再早期感染中發(fā)揮重要的免疫防御作用Nanjing

University1、為五聚體，是分子量最大的

Ig，稱巨球蛋白。2、IgM激活補體能力比IgG強3、天然血型抗體是IgM4、IgM是個體發(fā)育過程最早能產生的抗體，胚胎晚期已能合成，新生兒臍帶血中若IgM水平升高，表示該兒曾有宮內感染5、IgM是抗原刺激后出現最早的抗體，故檢測IgM水平可用于傳染病的早期診斷。6、IgM是B細胞抗原受體的主要成分7、也可參與II、III型超敏反應CH4J

ChainNanjing

UniversityIgM的結構三、IgA-分泌型可有效地抵御病原體經由粘膜上皮的感染Nanjing

University1、分為血清型和分泌型兩種，血清型IgA主要由腸系膜淋巴組織中的漿細胞產生。2、主要存在于初乳、唾液、淚液，以及呼吸道消化道和泌尿生殖道黏膜表面的分泌液中。3、分泌型IgA（SIgA）是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等處的固有層中漿細胞產生分泌型IgA的合成和主要作用部位在黏膜。IgA的結構Nanjing

University分泌型IgA的形成Nanjing

University四、IgD－是B細胞發(fā)育分化成熟的標志Nanjing

University

IgD主要由扁桃體、脾等處的漿細胞產生。人血清中

IgD總量占不到血清總Ig的1%，在個體發(fā)育中合成較晚。半衰期僅2.8天。免疫功能尚不清楚。IgD是B細胞的重要表面標志。

B細胞的分化過程中首先出現SmIgM，后來出現

SmIgD，它的出現標志著B細胞成熟了。IgD的結構Tail

PieceNanjing

University五、IgE－結合在肥大細胞上的IgE會引發(fā)將列的細胞反應Nanjing

University

主要由鼻咽部、扁桃體、支氣管、胃腸等粘膜固有層的漿細胞產生。人血清中IgE總量占血清總Ig的0.002%，在個體發(fā)育中合成較晚。對熱敏感。

IgE又稱親細胞抗體，它的CH2和CH3功能區(qū)可與肥大細胞、嗜堿性粒細胞上的高親和力Fcε受體結合，引起I型超敏反應。IgE的結構CH4Nanjing

UniversityNanjing

University第五節(jié) 抗體的制備Nanjing

University

抗體在疾病的診斷和免疫防治中的重要作用，使人們對抗體的需求越來越大。人工制備抗體是大量獲得抗體的重要途徑。早年人工制備抗體的方法主要是以相應抗原免疫動物，獲得抗血清。由于這些抗原中常常含有多種不同的抗原表位，加之所獲得的抗血清也未經免疫純化，因此，以此獲得的抗血清實際上是含多種抗體的混合物，即多克隆抗體。為了獲得大量的、高特異性的、均質性的抗體，1975年，Kohler和Milstein建立了體外細胞融合技術，獲得了免疫小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞，大規(guī)模地制備出高特異性的單克隆抗體。一、多克隆抗體Nanjing

University多克隆抗體是由含多種抗原表位的抗原物質，刺激、活化多個B細胞克隆所產生的針對多種不同抗原表位的不同抗體的混合。在體內，多克隆抗體是機體發(fā)揮特異性體液免疫效應的重要分子，在中和抗原、免疫調理、介導CDC、ADCC中起重要作用。在體外，多克隆抗體主要來源于動物免疫血清、恢復期病

人血清或免疫接種人群。其特點是來源廣泛、制備容易。

但由于多克隆抗體是多種不同抗原表位特異性抗體的混合，因此，它不能針對某一特定表位，特異性不高，常出現交

叉反應；同時也不易大量制備，其應用受到限制。二、單克隆抗體在機體淋巴細胞組織內可存在許多種抗體形成細胞（即B細胞），每種抗體形成細胞只識別其相應的抗原決定簇，當受抗原刺激后可增殖分化為一種細胞群，這種由單一細胞增殖形成的細胞群可稱為細胞克隆。同一克隆的細胞可合成和分泌在理化性質、分子結構、遺傳標志以及其生物學特性等方面都是完全相同的均一性抗體，也可稱為單克隆抗體。Nanjing

University1、雜交瘤的發(fā)現1975年德國學者Kohler和英國學者Milstein將小鼠骨髓瘤細胞和經綿羊紅細胞（SRBC）免疫的小鼠脾細胞在體外進行兩種細胞融合，結果發(fā)現部分形成的雜交細胞既能繼續(xù)在體外培養(yǎng)條件下生長繁殖又能分泌抗SRBC抗體，稱這種雜交細胞系為雜交瘤。這種雜交瘤細胞能大量無限生長繁殖的特性，又具有抗體形成細胞合成和分泌抗體的能力。它們是由識別一種抗原決定簇的細胞克隆所產生的均一性抗體，故稱為單克隆抗體。Nanjing

University2、雜交瘤技術的原理Nanjing

University骨髓瘤細胞（一種漿細胞的瘤細胞）可大量無限繁殖，但不能產生特異性抗體；而B細胞能產生抗體，但不

能在體外無限繁殖。將免疫小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞融合后產生雜交瘤細胞，它繼承了兩個親代細胞的

特點，既保存了骨髓瘤細胞無限制迅速繁殖的特點，又繼承了免疫B細胞可合成和分泌特異性抗體的能力，因而可生產大量均一的McAb。這種用雜交瘤技術制備的單克隆抗體可視為第二代抗體。3、單克隆抗體的優(yōu)點Nanjing

University單克隆抗體在結構和組成上高度均一，抗原特異性及同種型一致，易于體外大量制備和純化，因此，單克隆抗體具有純度高、特異性強、效價高、少或無血清交叉反應，制備成本低等特性，已廣泛應用于疾病的診斷、特異性抗原或蛋白的檢測和鑒定、疾病的被動免疫治療和生物導向藥物的制備等。單克隆抗體的制備Nanjing

University細胞融合Nanjing

University三、基因工程抗體Nanjing

University目前絕大多數單克隆抗體是鼠源的，臨床重復給藥時體內產生抗鼠抗體，可能引起超敏反應，使臨床療效減弱或消失，從而限制了單抗的體內應用。因此，臨床應用理想的單克隆抗體應是人源的，但人-人雜交瘤技術目前尚未突破。目前較好的解決辦法是研制基因工程抗體。基因工程抗體興起于80年代早期。這一技術是將對Ig基因結構與功能的了解與DNA重組技術相結合，根據研究者的意圖在基因水平對Ig分子進行切割、拼接或修飾，甚至是人工全合成后導入受體細胞表達，產生新型抗體，也稱為第三代抗體。（一）制備基因工程抗體的基本過程Nanjing

University首先獲得抗體的基因片段，可從B細胞DNA庫中篩選；用探針從雜交瘤細胞、免疫脾細胞的DNA庫或cDNA中篩選；或以PCR法直接擴增等；然后將抗體基因片段導入真核細胞（如雜交瘤細胞）或原核細胞（如大腸桿菌等），使之表達具有功能活性的抗體片段。（二）基因工程抗體的種類Nanjing

University1、嵌合抗體2、改型抗體3、單鏈抗體4、單區(qū)抗體及抗體庫等。其中以嵌合抗體研究的較多。1、嵌合抗體Nanjing

University在基因水平上連接鼠抗體可變區(qū)（V區(qū))和人抗體穩(wěn)定區(qū)(C區(qū))，插入表達質粒在轉染細胞表達所產生的抗體，稱之為嵌合抗體(chimeric

anti