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菌種的提純與復壯知識第一頁,共十頁,編輯于2023年,星期五長期使用某一品種栽培,或?qū)ζ贩N保存、管理不當,會造成該品種的退化和老化,因此對菌種必須進行經(jīng)常的提純復壯工作。菌種的退化和老化有兩種不同的含意。退化是指某一良種遺傳性狀發(fā)生改變,造成產(chǎn)量下降的現(xiàn)象。一個優(yōu)良品種在長期栽培過程中,由于環(huán)境條件的逆境,病蟲害的侵襲,化學藥物的殺傷,管理不當,多次的轉(zhuǎn)管造成人為的創(chuàng)傷的增多,影響菌種遺傳性狀的變異或突變,從而改變了菌種原有的遺傳特性,造成退化現(xiàn)象;其次,在實踐中往往是幾個品種在同一環(huán)境下培養(yǎng),它們之間的自然雜交率也是很高的,品種的自然雜交也會引起菌種的不純。老化是指菌種菌齡過長,使菌絲體衰老,生活能力下降,抗病能力減弱,吃料慢,長勢弱,出菇少,畸形多等種種現(xiàn)象。第二頁,共十頁,編輯于2023年,星期五菌種提純復壯途徑1、分離篩選:采用組織分離法及基質(zhì)菌絲分離法獲得母種,經(jīng)轉(zhuǎn)管純化后做栽培試驗,進行產(chǎn)量、質(zhì)量比較,選優(yōu)去劣。2、育種:通過雜交育種、誘變育種、原生質(zhì)體融合技術(shù)培育新品種。3、加強管理:加強菌種保存工作,創(chuàng)造條件使其處于休眠狀態(tài),嚴格控制轉(zhuǎn)管次數(shù),防止菌種退化、老化。4、注意菌種的選用:選用菌齡適中的菌絲體擴繁,取試管菌種時應(yīng)避開試管邊緣和接種點附近的菌絲,應(yīng)挑取它們中間部分菌絲,最好是挑基質(zhì)菌絲接種;取原種時去掉瓶口表面菌膜、老菌絲、子實體原基和菌蕾,盡量挑取瓶中間部分的菌絲接種,達到選優(yōu)復壯的目的。5、采用液體菌種:液體菌種培養(yǎng)條件容易控制,生長速度快,培養(yǎng)時間短,生命力強,菌齡一致,雜菌污染少,操作方便又起到了防止退化的作用。6、改善營養(yǎng)成份:首先改換培養(yǎng)基主料成份,使菌種吸收不同的營養(yǎng)成份,促進復壯。食用菌的復壯可以用豆芽、棉籽皮、甘薯、玉米粉等等代替馬鈴薯或者采用馬鈴薯培養(yǎng)基和上述培養(yǎng)基交替使用,復壯效果更好。其次是在培養(yǎng)基中添加各種輔料,使菌絲生長健壯。如在培養(yǎng)基內(nèi)加入適量的麥芽糖、谷氨酸、檸檬酸、酵母膏等有機營養(yǎng),或加磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸鋅、銅、鈷、錳等無機營養(yǎng),對防止菌絲老化是有益的。第三頁,共十頁,編輯于2023年,星期五菌種復壯由于環(huán)境條件和營養(yǎng)條件的暫時改變,常引起菌種退化(大多是非遺傳變異)。菌種復壯是針對菌種退化而采取的一種防止措施。從廣義上講,菌種復壯并不單純只限于采取一些防止退化的措施,也含有不斷提高菌種純度,提高優(yōu)良種性(高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強)的含義。第四頁,共十頁,編輯于2023年,星期五〔1〕防止菌種退化的措施
①控制菌種傳代次數(shù)。菌種退化性的變異,是在繁殖過程中發(fā)生的,因此,減少傳代次數(shù)可以防止退化。母種的傳代擴接應(yīng)控制在3次以內(nèi),擴接次數(shù)愈多,后代的生活力就愈衰退。原種個栽培種也應(yīng)盡量減少傳代次數(shù)。②優(yōu)化菌種培養(yǎng)和保藏的環(huán)境條件。菌種退化這有是基因突變引起的,基因突變與環(huán)境條件、代謝產(chǎn)物有關(guān)。一般突變比率隨溫度降低而減少,因此,應(yīng)采用低溫(0~4℃)條件保藏菌種。另外,用木屑或枝條培養(yǎng)基保藏菌種,擴接后,成活率高,菌絲生長健壯,也是防止菌種退化的有效措施之一。第五頁,共十頁,編輯于2023年,星期五⑵對已開始退化菌種的復壯措施①改善營養(yǎng)條件大多菌種退化是由于營養(yǎng)條件的改變或缺乏而引起的,一但營養(yǎng)條件得到改善,就可以恢復原來優(yōu)良的性狀。實踐中常用的是采用加富營養(yǎng)的辦法,即除一般培養(yǎng)基成分外,需在加蛋白胨2~5克,酵母膏0.5~2克,牛肉膏2.5克,維生素B10.01~0.05克,必要時可加入適量的復合B族維生素和微量蜂王漿。待菌種恢復良好性狀后,再移植到普通培養(yǎng)基上。②經(jīng)常分離純化菌種如果菌種退化原因是屑純種不純,即已退化的菌株占了優(yōu)勢,應(yīng)進行純種重新分離。生產(chǎn)上使用的菌種,每年要重新分離一次,選具有典型優(yōu)良性狀的子實體進行組織分離、培養(yǎng)。也可每年進行一次孢子分離,通過有性繁殖來發(fā)現(xiàn)好的菌株,再用組織分離來鞏固這些優(yōu)良菌株的遺傳性。第六頁,共十頁,編輯于2023年,星期五菌球形態(tài)菌種長好后會看到菌瓶內(nèi)充滿大小均勻,活力旺盛,毛刺明顯的大量菌球,靜置X分鐘后菌球占菌液濃度的X%以上或不分層,若菌球很少或大小不一值可能是質(zhì)量有部題。判斷菌種的質(zhì)量第七頁,共十頁,編輯于2023年,星期五菌液澄清度菌液中除菌球以外,無其它固形物,菌液由前期的微渾濁變的澄清透明,多數(shù)是淺黃色或橙黃色,如變的渾濁不清則很可能是染菌判斷菌種的質(zhì)量第八頁,共十頁,編輯于2023年,星期五菌液氣味到培養(yǎng)后期菌液的糖香味會逐漸消失,取而代之的是或有或無的菌種特有的清香味,若有臭味、酸味、霉味則可能是染菌。判斷菌種的質(zhì)量第九頁,共十頁,編輯于
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