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文檔簡介
2023-2024學年山東省曲阜市生物高三上期末學業(yè)水平測試模擬試題注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚,將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試題卷上答題無效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.果蠅的棒眼基因(B)和野生正常眼基因(b)只位于X染色體上,B和b指導合成的肽鏈中只有第8位的氨基酸不同。研究人員構(gòu)建了一個棒眼雌果蠅品系XhBXb(如圖所示)。h為隱性致死基因且與棒眼基因B始終連鎖在一起,B純合(XhBXhB、XhBY)時能使胚胎致死。下列說法錯誤的是()A.h基因的轉(zhuǎn)錄場所只能是細胞核,翻譯場所只能是核糖體B.次級精母細胞中移向兩極的X染色體分別攜帶了B、b基因是基因重組導致的C.果蠅的眼形由野生正常眼轉(zhuǎn)變?yōu)榘粞劭赡苁欠至验g期時堿基對替換導致的D.該品系的棒眼雌果蠅與野生正常眼雄果蠅雜交,F(xiàn)1中雄果蠅占1/32.下列有關(guān)組織細胞中化合物鑒定實驗的敘述,正確的是()A.脂肪鑒定實驗中,應使用體積分數(shù)為95%的酒精洗去浮色B.蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后,仍然會產(chǎn)生紫色反應C.酵母菌進行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定D.將斐林試劑加入葡萄糖溶液中后,溶液呈現(xiàn)無色,水浴加熱后有磚紅色沉淀生成3.下列關(guān)于酵母細胞固定化實驗的敘述,正確的是A.用溫水使海藻酸鈉迅速溶解,待其冷卻到室溫后用于包埋細胞B.進行包埋時,用于懸浮細胞的CaCl2溶液濃度要適宜C.注射器(或滴管)出口應盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀D.包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性4.為了研究兩個小麥新品種P1、P2的光合作用特性,研究人員分別測定了新品種與原種(對照)葉片的凈光合速率,結(jié)果如圖所示。以下說法錯誤的是A.實驗過程中光照強度和C02初始濃度必須一致B.可用單位時間內(nèi)進入葉綠體的C02量表示凈光合速率C.每組實驗應重復多次,所得數(shù)據(jù)取平均值D.三個品種達到最大凈光合速率時的溫度沒有顯著差異5.圖是人小腸上皮細胞吸收葡萄糖的過程簡圖,其中GLUT2是細胞膜上的葡萄糖載體,Na+/K+ATPase是鈉鉀ATP酶,據(jù)圖分析下列說法錯誤的是:A.小腸上皮細胞面向腸腔的細胞膜形成較多微絨毛可以增加細胞膜上載體蛋白的數(shù)量,高效的吸收葡萄糖等營養(yǎng)物質(zhì)B.圖中所示的小腸上皮細胞膜上的蛋白質(zhì)的功能有催化、運輸、信息交流和密封細胞間隙的作用C.葡萄糖通過Na+驅(qū)動的葡萄糖同向轉(zhuǎn)運載體進入小腸上皮細胞,此運輸方式為主動運輸D.Na+/K+ATPase也存在神經(jīng)元細胞膜上,參與了動作電位恢復為靜息電位的過程6.下列關(guān)于生物進化的敘述,正確的是()A.種群間的雙向基因遷移引起種群內(nèi)變異量增大B.自然種群中,個體中存在變異就會發(fā)生選擇C.環(huán)境條件穩(wěn)定,種群基因頻率就不會變化D.同地物種形成是一個漸進式的過程二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)如圖表示草原上某野兔種群數(shù)量的變化(K0表示野兔種群在無天敵進入時的環(huán)境容納量),請分析回答相關(guān)問題。(1)圖中0→b時段內(nèi)野兔的死亡率_____(填“大于”“等于”或“小于”)出生率,此階段該種群的年齡組成最可能為_______型。(2)某種天敵在圖中標注的某個時間點遷入,一段時間后,野兔種群數(shù)量達到相對穩(wěn)定狀態(tài),則該時間點最可能是_______。在捕食壓力下,野兔種群的環(huán)境容納量降在_______之間。(3)用標志重捕法調(diào)查該草原上某區(qū)域的種群數(shù)量時,若部分標記個體的標記物不慎脫落,則導致調(diào)查結(jié)果_______(“偏高”或“偏低”);對捕獲的野兔進行性別比例調(diào)查,發(fā)現(xiàn)其雌雄比例稍大于l,該比例_______(“有利”或“不利”)于種群增長。(4)該草原隨著環(huán)境的不斷變化,此后可能慢慢長出小灌木叢,甚至有可能繼續(xù)演替出森林,整個過程屬于_____演替。過程中不斷出現(xiàn)新的優(yōu)勢種群,這主要體現(xiàn)了不同植被物種對_____的競爭能力不同。研究表明某種生物可以提高人體的免疫力和抵抗力,這體現(xiàn)了生物多樣性的__價值。8.(10分)目的基因的分離、克隆以及目的基因的結(jié)構(gòu)與功能研究,一般位于整個基因工程的上游。將含有某種生物不同基因的許多DNA片段導入受體菌的群體中儲存,可獲得該種生物的基因文庫。請回答下列問題:(1)目的基因可以在構(gòu)成基因文庫的受體菌中____________________。從基因多少的角度分析,cDNA文庫含有某種生物的__________。(2)區(qū)別于基因組文庫,在構(gòu)建cDNA文庫時需要用到__________酶,從cDNA文庫中獲得的目的基因__________(填“不含有”或“含有”)啟動子。(3)從基因文庫中提取目的基因比較復雜,下圖為一種思路:該過程中需將纖維素膜上的細菌裂解,其目的是____________,再用32P標記的____________作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結(jié)果,進一步操作為__________________________,才能獲得含有目的基因的受體菌。9.(10分)為了增加菊花花色類型,研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1),擬將其與Ti質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導入菊花中?;卮鹣铝袉栴}:(1)PCR技術(shù)所用到的關(guān)鍵酶是__________,利用PCR技術(shù)擴增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,其目的是__________。(2)圖1是花色基因C兩側(cè)被EcoRI酶切后所形成的末端結(jié)構(gòu),請寫出EcoRI酶識別序列并標出切點:__________(用“↓”表示切點位置)。圖2中EcoRI酶所識別的位點應在Ti質(zhì)粒的__________片段上。(3)將導人目的基因的菊花細胞培養(yǎng)成植株需要利用__________技術(shù),其原理是__________。(4)在個體生物學水平上,如何鑒定轉(zhuǎn)基因菊花培育是否成功?____________________10.(10分)斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細胞中選擇性表達,研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達載體,并導入到斑馬魚細胞中研究其作用,請回答:(1)為獲取HuC基因,研究人員從早期胚胎神經(jīng)細胞中提取HuC基因的mRNA,通過_________獲得大量的DNA,進而構(gòu)建出HuC基因的______________。(2)DraⅢ,SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達載體,需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進行切割,這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。(3)用Ca2+處理大腸桿菌,大腸桿菌細胞即能夠______________。實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________,篩選出導入表達載體的大腸桿菌。11.(15分)為了應對“垃圾圍城”的困局,很多大型城市啟動了近城區(qū)垃圾填埋場生態(tài)修復工程。目前推廣的做法是將填埋場改造成生態(tài)公園。請回答下列問題:(l)垃圾填埋場內(nèi)發(fā)生的群落演替屬于____演替。(2)生態(tài)修復工程啟動后,雜草叢生的垃圾填埋場可以在2年時間內(nèi)變身生態(tài)公園,這說明人類活動對群落演替有什么影響?_______________________________(3)為了更好地做好生態(tài)修復工作,前期的調(diào)查研究必不可少。①若要調(diào)查填埋場土壤中小動物類群的豐富度,常用____的方法進行采集、調(diào)查。有些小動物用肉眼難以識別,可用鑷子或吸管取出,放在載玻片上,借助______進行觀察。②某時期有一批田鼠遷入該填埋場,該田鼠以草根為食,田鼠的種群數(shù)量可以通過________法測得。預計該田鼠種群增長速率的變化情況是____。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
1、基因重組指在生物體進行有性生殖的過程中,控制不同性狀的基因重新組合;2、分析圖形:圖示為一對X染色體,有一對等位基因B、b,h與B連鎖?!驹斀狻緼、h基因在染色體上,是核基因,其轉(zhuǎn)錄場所只能是細胞核,翻譯的產(chǎn)生都是核糖體,A正確;B、B、b基因只位于X染色體上,Y染色體上沒有對應的基因,不可能是基因重組中的交叉互換,B錯誤;C、B和b指導合成的肽鏈中只有第8位的氨基酸不同,B是堿基對替換導致的,基因突變發(fā)生在分裂間期,C正確;D、由于B純合(XhBXhB、XhBY)時能使胚胎致死,該品系的棒眼雌果蠅(XhBXb)與野生正常眼雄果蠅(XbY)雜交,產(chǎn)生的子代有XhBXb:XbXb:XbY=1:1:1,F(xiàn)1中雄果蠅占1/3,D正確;故選D?!军c睛】根據(jù)基因重組、基因突變和基因分離定律分析選項。2、B【解析】
生物組織中化合物的鑒定:(1)斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖(如葡萄糖、麥芽糖、果糖)存在與否,而不能鑒定非還原性糖(如淀粉)。(2)蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應。(3)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)鑒定,呈橘黃色(或紅色)?!驹斀狻吭谥镜蔫b定實驗中,用50%的酒精洗去浮色的原因是蘇丹Ⅲ易溶于酒精,A錯誤;蛋白質(zhì)在蛋白酶的作用下會水解成多肽,由于多肽中含有肽鍵,并且蛋白酶的化學本質(zhì)就是蛋白質(zhì),因此混合溶液中加入雙縮脲試劑后,會產(chǎn)生紫色反應,B正確;酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精,酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精,C錯誤;斐林試劑本身具有顏色,因此將斐林試劑加入葡萄糖溶液中后,溶液呈現(xiàn)藍色,D錯誤。故選B?!军c睛】酒精是生物學實驗中常用的試劑,如在細胞中脂肪的觀察、有絲分裂實驗、土壤中小動物豐富度研究等實驗中需要使用。需注意區(qū)分在不同實驗中的濃度和作用。3、D【解析】
本題主要考查固定化細胞的相關(guān)知識點,回憶制作過程中的注意事項:(1)配制海藻酸鈉溶液:小火、間斷加熱、定容,如果加熱太快,海藻酸鈉會發(fā)生焦糊;(2)海藻酸鈉溶液與酶母細胞混合:冷卻后再混合,注意混合均勻,不要進入氣泡;(3)制備固定化酵母細胞:高度適宜,并勻速滴入;(4)剛?cè)芑暮T逅徕c應冷卻后再與酵母菌混合,否則溫度過高會導致酵母菌死亡?!驹斀狻緼、在酵母細胞固定化實驗中,應該用小火、間斷加熱的方式使海藻酸鈉緩慢溶解,A錯誤;B、進行包埋時,CaCl2溶液濃度要適宜,是用于凝膠柱的聚沉,B錯誤;C、注射器(或滴管)出口應與液面保持適當?shù)木嚯x,以保證凝膠珠成為球狀,C錯誤;D、包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性,D正確。故選D?!军c睛】本題考查細胞固定化技術(shù)的相關(guān)知識,解答本題的關(guān)鍵是識記相關(guān)知識點,特別是實驗每一個過程的注意事項,結(jié)合題干提示分析答題。4、B【解析】
A、該實驗過程中的光照強度和C02初始濃度均屬于無關(guān)變量,無關(guān)變量在實驗過程中必須一致,A項正確;B、可用單位時間內(nèi)植物從外界環(huán)境中吸收的CO2量表示凈光合速率,B項錯誤;C、為了減少實驗誤差,每組實驗應重復多次,所得數(shù)據(jù)取平均值,C項正確;D、題圖顯示,三個品種達到最大凈光合速率時的溫度都是25℃左右,沒有顯著差異,D項正確。故選B?!军c睛】本題以實驗為依托,采用圖文結(jié)合的形式考查學生對實驗結(jié)果的分析和處理能力。解答此類問題的關(guān)鍵是:由題意并從題圖中提取有效信息,準確把握實驗目的,采取對比法認真分析曲線的變化趨勢,從中找出實驗變量(自變量、因變量、無關(guān)變量),由此依據(jù)實驗設(shè)計的原則對照各選項作出合理判斷。5、B【解析】
分析圖解:葡萄糖進入小腸上皮細胞時,是由低濃度向高濃度一側(cè)運輸,屬于主動運輸,;而Na+進入小腸上皮細胞是從高濃度向低濃度,屬于協(xié)助擴散;葡萄糖運出細胞時,是從高濃度向低濃度一側(cè)運輸,屬于易化擴散。【詳解】A.小腸上皮細胞面向腸腔的細胞膜形成較多微絨毛,形成微絨毛的意義是增多細胞膜上載體蛋白數(shù)量,有利于高效地吸收腸腔的葡萄糖等物質(zhì),A正確;B.圖中所示的小腸上皮細胞膜上葡萄糖通過Na+驅(qū)動的葡萄糖同向轉(zhuǎn)運載體進入小腸上皮細胞,體現(xiàn)了細胞膜上的蛋白質(zhì)具有運輸功能;Na+/K+ATPase是鈉鉀ATP酶,具有催化功能,但該細胞膜上蛋白質(zhì)未體現(xiàn)信息交流的功能,B錯誤;C.葡萄糖通過Na+驅(qū)動的葡萄糖同向轉(zhuǎn)運載體進入小腸上皮細胞是由低濃度向高濃度一側(cè)運輸,運輸方式為主動運輸,C正確;D.當從動作電位恢復到靜息電位時,需要排出Na+、吸收K+,因此Na+/K+ATPase參與了動作電位恢復為靜息電位的過程,用于鈉鉀的運輸,D正確。6、A【解析】
現(xiàn)代生物進化理論的基本觀點:種群是生物進化的基本單位,生物進化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變;突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料;自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進化的方向;隔離是新物種形成的必要條件?!驹斀狻緼、兩種群間的雙向遷移,會增加個體間的基因交流,引起種群內(nèi)變異量增大,A正確;B、只有變異的性狀影響了個體的存活和繁殖,自然選擇才可能發(fā)生作用,B錯誤;C、影響基因頻率改變的因素有不隨機交配、自然選擇、遺傳漂變和遷移等,因此環(huán)境條件穩(wěn)定所時,種群基因頻率也會發(fā)生改變,C錯誤;D、同地物種形成是不一定漸進的,如多倍體的形成,D錯誤。故選A?!军c睛】本題考查現(xiàn)代生物進化理論的主要內(nèi)容,要求考生識記現(xiàn)代生物進化理論的主要內(nèi)容,能利用所學的知識對選項作出準確的判斷,屬于考綱識記層次的考查。二、綜合題:本大題共4小題7、小于增長型cK2~K3偏高有利次生演替陽光直接使用價值【解析】
(1)題圖表示,野兔的種群數(shù)量經(jīng)過一段時間發(fā)展后,達到環(huán)境容納量,并相對穩(wěn)定,呈S型增長;圖中0→b時段內(nèi)野兔的種群數(shù)量處于增長階段,其死亡率小于出生率,此階段該種群的年齡組成最可能為增長型。(2)某種天敵進入一段時間后,野兔種群數(shù)量達到了相對穩(wěn)定狀態(tài),環(huán)境容納量在K2與K3之間。推測天敵最可能進入的時間在c處。(3)野兔用標志重捕法調(diào)查其種群數(shù)量時,若部分標記個體的標記物不慎脫落,根據(jù)種群數(shù)量=N1N2/n(N1表示第一次捕獲并標記的數(shù)量,n表示第二次捕獲中帶標記的數(shù)量,N2表示第二次捕獲數(shù)量),當n減少,估算出的種群數(shù)量則偏高。攝入食物后,對捕獲的野兔進行性別比例調(diào)查,發(fā)現(xiàn)其雌雄比例稍大于l,該比例有利于種群繁殖而增長。(4)草原原有土壤條件和部分繁殖體或者種子保留而進行的群落演替屬于次生演替。演替過程中主要體現(xiàn)了不同植被物種中優(yōu)勢種群的替代主要是植被物種對陽光的競爭力不同導致。利用生物的藥用價值體現(xiàn)的是生物多樣性的直接使用價值?!军c睛】種群增長的“S”型曲線分析(1)K值及其變化示意圖①同一種生物的K值不是固定不變的,會受到環(huán)境的影響。在環(huán)境不遭受破壞的情況下,K值會在平均值附近上下波動;當種群數(shù)量偏離平均值的時候,會通過負反饋機制使種群密度回到一定范圍內(nèi)。②環(huán)境遭受破壞,K值會下降;生物生存的環(huán)境改善,K值會上升。(2)封閉環(huán)境中的種群數(shù)量變化模型在封閉環(huán)境中,無外源物質(zhì)和能量的補充,種群數(shù)量達到最大值后隨資源的消耗和有害物質(zhì)的積累,最終K值不斷降低,種群數(shù)量減少甚至消亡。8、穩(wěn)定存在并遺傳部分基因逆轉(zhuǎn)錄不含有釋放出DNA目的基因選取培養(yǎng)基上的a菌落繼續(xù)培養(yǎng)【解析】
1、基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,如:cDNA文庫。2、以mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個細菌含有一段cDNA,并能繁殖擴增,這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。3、基因組文庫與cDNA文庫比較:文庫類型cDNA基因組文庫文庫大小小大基因中啟動子無有基因中內(nèi)含子無有基因多少某種生物的部分基因某種生物的全部基因物種間的基因交流可以部分基因可以【詳解】(1)目的基因可以在構(gòu)成基因文庫的受體菌中穩(wěn)定存在并遺傳?;蚪M文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,如cDNA文庫。(2)區(qū)別于基因組文庫,在構(gòu)建cDNA文庫時需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶,由于cDNA文庫中的目的基因是mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的,故不含有啟動子。(3)由于目的基因存在于菌體中,所以上述過程需將纖維素膜上的細菌裂解,其目的是釋放出DNA,再用32P標記的目的基因作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結(jié)果,a菌落的細菌DNA中出現(xiàn)了雜交帶,說明a菌體中含有目的基因,可選取培養(yǎng)基上的a菌落繼續(xù)培養(yǎng),才能獲得含有目的基因的受體菌。【點睛】本題考查基因組文庫和基因文庫的區(qū)別,要求考生識記基因文庫的概念及種類,掌握基因組文庫和部分基因文庫的區(qū)別,再結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。9、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)要根據(jù)這一序列合成引物G↓AATTCT-DNA植物組織培養(yǎng)植物細胞具有全能性觀察轉(zhuǎn)基因菊花是否表現(xiàn)出基因C所控制的花色【解析】
PCR是應用DNA雙鏈復制的原理,將基因的核苷酸序列不斷地加以復制,使其數(shù)量呈指數(shù)方式增加,而這一技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸系列,以便根據(jù)這一序列合成引物。目的基因?qū)胫参锛毎话阈枰M行植物組織培養(yǎng)?!驹斀狻浚?)由于PCR技術(shù)應用了DNA雙鏈復制的原理,在高溫情況下進行,該過程需要的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶;該過程中要有一段已知目的基因的核苷酸系列,以便根據(jù)這一序列合成引物;(2)根據(jù)酶切后形成的序列,可以推測出EcoRI酶識別的序列為GAATTC,且在酶切以后單獨形成一個G,所以酶切位點為G↓AATTC;由于后續(xù)需要將目的基因?qū)氲绞荏w細胞中,所以會將目的基因轉(zhuǎn)移至Ti質(zhì)粒的T-DNA片段上;(3)目的基因?qū)氲街参锛毎?,從而培育出新的植一般都需要植物組織培養(yǎng)技術(shù)的協(xié)助;該過程應用的原理是植物細胞具有全能性;(4)目的基因的檢測在個體水平上需要觀察到明顯的性狀變化或蛋白質(zhì)的合成,因此該過程需要觀察轉(zhuǎn)基因菊花是否表現(xiàn)出基因C所控制的花色?!军c睛】本題的重點是基因工程的過程,包含了目的基因的獲取,目的基因與運載體的結(jié)合,目的基因的檢測等方面的綜合考察,其中目的基因和運載體的結(jié)合是難點,需要考慮目的基因的正常使用和運載體正常行使功能,因此酶切位點的選擇一般是保證運載體上相關(guān)基因的完整性,且可以實現(xiàn)轉(zhuǎn)運,所以一般會將目的基因?qū)隩-DNA片段中。10、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標記基因無法篩選(且沒有啟動子)吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)從早期胚胎神經(jīng)細胞中提取HuC基因的mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因,并通過PCR技術(shù)在體外擴增可獲得大量的目的基因,進而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。(2)構(gòu)建基因表達載體時,不能破壞運載體上的啟動子、復制原點,以及運載體上需要保留標記基因,為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接,常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點可知,為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達載體,需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ
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