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文檔簡介
微生物實驗課注意事項課程簡介:必修課,24學(xué)時考試成績按以下公式計算:平時(60%)+操作考試(40%)本文檔共25頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分課堂紀(jì)律嚴(yán)格遵守實驗室規(guī)章制度嚴(yán)肅課堂紀(jì)律不允許無故曠課、早退(1次)遲到(3次)不能做與實驗無關(guān)的事本文檔共25頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分實驗室安全和衛(wèi)生安全實驗室嚴(yán)禁吸煙。注意用水、防電和防火正確使用化學(xué)試劑和儀器衛(wèi)生每次實驗需留下6位同學(xué)值日,協(xié)助保持實驗室清潔本文檔共25頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分1、了解培養(yǎng)基的概念、種類和用途,明確培養(yǎng)基的配制原理。2、學(xué)習(xí)掌握培養(yǎng)基配制的一般方法和步驟。3、掌握高壓蒸汽滅菌的原理和方法步驟。實驗?zāi)康囊?、培養(yǎng)基的配制本文檔共25頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分
培養(yǎng)基(culturemedium)是指人工配制的、適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。自然界中微生物種類繁多,營養(yǎng)類型多樣,加之實驗和研究目的不同,所以培養(yǎng)基的種類很多,不同種類的培養(yǎng)基一般都應(yīng)含有微生物生長所需的碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子和水六大營養(yǎng)要素,且各成分比例應(yīng)合適。為了滿足微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的要求,還必須控制培養(yǎng)基合適的pH。
實驗原理本文檔共25頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分常用凝固劑是瓊脂,固體培養(yǎng)基瓊脂加量通常為1.5%-2%;半固體培養(yǎng)基瓊脂加量為0.5%-0.8%。實驗原理常用培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng);高氏一號培養(yǎng)基用于培養(yǎng)放線菌;麥芽汁培養(yǎng)基和豆芽汁培養(yǎng)基通常用于酵母菌的培養(yǎng);馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)霉菌。本文檔共25頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分實驗分組安排5-6人一組,配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基每組配500mL牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基斜面1支(每人),其余分裝在兩個500mL三角瓶。
本文檔共25頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分包扎:
加塞后,試管通常每7支一起,包上一層牛皮紙或兩層報紙,用線繩扎緊。三角瓶加塞后也用牛皮紙包扎。
以活結(jié)形式扎緊,以便使用時容易解開。
用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、配制人或?qū)嶒灲M。滅菌時包牛皮紙、報紙本文檔共25頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分滅菌:
培養(yǎng)基滅菌一般采用壓力蒸汽滅菌
通常滅菌條件為1.05kg/cm2,121℃滅菌20-30分鐘;含糖量高的培養(yǎng)基,如馬丁氏培養(yǎng)基則為0.56kg/cm2,115℃滅菌30分鐘。本文檔共25頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分二、消毒與滅菌本文檔共25頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分紫外線滅菌----紫外線波長在200-300nm,具有殺菌作用,其中以265-266nm殺菌力最強(qiáng)。無菌室或無菌接種箱空氣可用紫外線燈照射滅菌。本文檔共25頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分干熱滅菌電烤箱1、干熱滅菌2、壓力蒸汽滅菌本文檔共25頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分干熱滅菌1、裝入待滅菌物品2、升溫:接通電源,加熱升溫至160-170℃。3、恒溫:保持160-170℃2小時。4、降溫:切斷電源,自然降溫。5、開箱取物:待烤箱溫度降到70℃以下以后,方可打開箱門,取出物品。箱內(nèi)溫度高于70℃,切勿自行打開箱門,以免玻璃器皿炸裂。本文檔共25頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分本文檔共25頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分三、超凈工作臺的使用方法工作原理:相對無菌的隔離小環(huán)境使用方法和步驟:紫外線的效用和紫外燈的使用方法;照明系統(tǒng)的效用使用方法;酒精燈的效用和使用方法。維護(hù)常識:酒精擦理本文檔共25頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期二\1點(diǎn)17分實驗報告與問題討論1、培養(yǎng)基配制的原理、方法、步驟及注意事項。2、干熱滅菌、壓力蒸汽滅菌方法的原理和方法步驟3、思考題1)培養(yǎng)基應(yīng)具備哪些條件?為什么?2)在配制培養(yǎng)基過程中應(yīng)注意哪些問題?為什么?3)培養(yǎng)基配制好后,為什么要立即滅菌?如何檢查滅菌是否徹底?4)壓力蒸汽滅菌時,為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡?5)滅菌完畢
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