免疫分析中的干擾與消除詳解演示文稿

免疫分析中的干擾與消除詳解演示文稿本文檔共24頁；當前第1頁；編輯于星期二\9點44分優(yōu)選免疫分析中的干擾與消除本文檔共24頁；當前第2頁；編輯于星期二\9點44分概述基礎(chǔ)、前沿的話題普遍、常見的現(xiàn)象復雜、多樣的本質(zhì)深刻、直接的影響長遠、艱巨的任務(wù)本文檔共24頁；當前第3頁；編輯于星期二\9點44分定義IFCC：樣本中被分析物質(zhì)外存在的因素，產(chǎn)生的檢測信號，表現(xiàn)在檢測結(jié)果上的系統(tǒng)性錯誤。分析物不相關(guān)的因素溶血、脂血、抗凝樣本、樣本保存等分析物相關(guān)的因素

類風濕因子，異嗜性抗體，自身抗體等本文檔共24頁；當前第4頁；編輯于星期二\9點44分免疫分析中干擾的分析不同次檢驗結(jié)果的對比的不一致性檢驗結(jié)果與臨床癥狀不符系列檢驗結(jié)果的矛盾極度偏離，難以置信的檢驗結(jié)果稀釋回收高度偏離預(yù)期與其他檢驗試劑或方法相背離的結(jié)果本文檔共24頁；當前第5頁；編輯于星期二\9點44分常見“干擾”因素溶血高膽紅素脂血（對脂溶性物質(zhì)的干擾，NEFA）抗凝樣本（添加劑，分離膠）樣本的穩(wěn)定性與保存條件本文檔共24頁；當前第6頁；編輯于星期二\9點44分內(nèi)源性激素結(jié)合蛋白白蛋白TBG，SHBG，CBGFDH（家族性異常白蛋白高甲狀腺素血癥）游離激素的測定（標記抗原，標記抗原類似物，標記抗體）本文檔共24頁；當前第7頁；編輯于星期二\9點44分內(nèi)源性抗體等干擾因素類風濕因子、補體、溶菌酶、異嗜性抗體，HAAA等10%以上（30-40%）的病人體內(nèi)存在內(nèi)源性異嗜性抗體（CAP）10%-40%的人群存在HAMA干擾，取決于檢測試劑（LarryKricka,President,AACC）我國臨床醫(yī)療總誤診率為27.8%，比國際平均臨床醫(yī)療總誤診率25%高2.8個百分點，其中惡性腫瘤誤診率為40%（2008），抗體干擾是其中原因之一。本文檔共24頁；當前第8頁；編輯于星期二\9點44分異嗜性抗體產(chǎn)生的途徑類風濕性關(guān)節(jié)炎流行性感冒過敏輸血自身免疫疾病免疫抑制藥物心肌病變注射疫苗動物接觸（飼養(yǎng)寵物）特定食物（奶酪）動物輔助治療（胸腺細胞，胚胎細胞，羊細胞）血液透析母嬰傳遞腸胃炎（E.coli）本文檔共24頁；當前第9頁；編輯于星期二\9點44分類風濕因子（Rheumatoidfactors，RF）自身抗體，體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG（一種抗體）為抗原的一種抗體，通常為IgM，結(jié)合IgG的FC片段。約90%類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者的RF呈陽性，在其他自身免疫疾病中也有一定的陽性率。正常人有5%左右的陽性率本文檔共24頁；當前第10頁；編輯于星期二\9點44分類風濕因子（Rheumatoidfactors，RF）去除Fc片段，用F（ab）2替代完整的IgG熱變性IgG處理檢驗抗原時，加入2-巰基乙醇使RF降解。本文檔共24頁；當前第11頁；編輯于星期二\9點44分類風濕因子（Rheumatoidfactors，RF）IgM測定方法：捕獲包被和中和IgG本文檔共24頁；當前第12頁；編輯于星期二\9點44分補體（Complement）存在于正常人和動物血清與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)。約占血清球蛋白總量的10％。極不穩(wěn)定，大部分對熱敏感，56℃30分鐘即失去活性。結(jié)合IgG的Fc片段，封閉結(jié)合位點。新鮮血清中的補體對試劑反應(yīng)干擾較大除熱滅活外，可用EDTA稀釋標本緩解補體的影響。亦有推薦在試劑中加入雞IgG的，以抑制補體激活本文檔共24頁；當前第13頁；編輯于星期二\9點44分溶菌酶（Lysozyme）一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶，廣泛存在于人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中強烈結(jié)合低等電點蛋白，可橋接固相和標記抗體導致假陽性?？杉尤脬~離子，形成絡(luò)合物可在試劑中加入卵清蛋白（pI=4.9）鳥蛋白（beckman）本文檔共24頁；當前第14頁；編輯于星期二\9點44分異嗜性抗體（Heterophilicantibodies，HA）HA是存在于人類血清中，由已知或未知的抗原物質(zhì)刺激人體產(chǎn)生的，與嚙齒類動物（如鼠等）Ig（s）結(jié)合的一類抗體。通常是由于直接接觸動物，污染的食品，接種動物血清或疫苗而產(chǎn)生?？煞譃樘烊豢贵w和自身免疫抗體，親和力低，結(jié)合力弱，具有廣泛的特異性，普遍存在于人體中，多為IgG。HA可與試劑中抗體的Fc或者F(ab)區(qū)域的決定簇結(jié)合，從而干擾免疫反應(yīng)。本文檔共24頁；當前第15頁；編輯于星期二\9點44分人抗動物抗體（HAAA）與HA具有一定的同源性，均能發(fā)生交叉反應(yīng)，造成干擾免疫途徑較為明確，動物免疫球蛋白治療或接觸史具有高親和力，可定向結(jié)合到動物的抗原表位上HAAA有IgA，IgG，IgM等多種類型，又可分為抗同種型，抗獨特型，抗抗獨特型等三類物種廣泛，目前已報道抗鼠，牛，山羊，綿羊，馬等多種抗體不同種動物Ig分子間蛋白質(zhì)序列有大量同源性，因此抗動物抗體可與多種動物免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)接觸動物蛋白兩周后可產(chǎn)生抗體，存在時間可長達30個月本文檔共24頁；當前第16頁；編輯于星期二\9點44分人抗鼠抗體（HAMA）由于鼠抗在單克隆抗體影像，抗體治療以及診斷試劑中的廣泛應(yīng)用，使得HAMA尤其受關(guān)注抗同種型，抗獨特型，抗抗獨特型本文檔共24頁；當前第17頁；編輯于星期二\9點44分HAMA干擾機制本文檔共24頁；當前第18頁；編輯于星期二\9點44分HAMA干擾機制本文檔共24頁；當前第19頁；編輯于星期二\9點44分HAMA的鑒別稀釋樣本測定的值不成比例用參考試劑盒測定進行對比其他試劑盒驗證加入清潔抗體進行對比HAMA測定試劑盒（6HAMA試劑盒）包被鼠抗，標記鼠抗的夾心法包被鼠抗，標記抗人IgG/IgM的間接法本文檔共24頁；當前第20頁；編輯于星期二\9點44分內(nèi)源性抗體干擾的消除試劑盒的設(shè)計原材料的選擇去除Fc片段嵌合抗體（RocheTSH/CEA）雞抗體樣本的預(yù)先處理固相血清吸附蛋白A之類的固相吸附劑

PEG6000處理樣本樣本酸和熱聯(lián)合處理加入阻斷劑清潔抗體

本文檔共24頁；當前第21頁；編輯于星期二\9點44分商品化的異嗜性抗體阻斷劑HBR：單克隆鼠抗人IgMII