病原菌的采樣技術(shù)

病原菌的采樣(cǎiyànɡ)技術(shù)廣州市CDC鄧志愛(ài)第一頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件主要(zhǔyào)內(nèi)容如何正確(zhèngquè)采集和處理標(biāo)本選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法常見(jiàn)病原菌標(biāo)本的采集食物中毒檢材的處理第二頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件正確采集和處理標(biāo)本無(wú)菌操作血液、腦脊液及穿刺液等---無(wú)菌操作糞便、肛拭子和咽拭子等---避免(bìmiǎn)雜菌污染盛放容器無(wú)菌容器采集時(shí)間和部位在使用抗菌藥物之前；選擇合適的部位第三頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件送檢時(shí)間(shíjiān)和方法做好標(biāo)記填好送檢單立即送檢置運(yùn)送培養(yǎng)基送檢4℃保存運(yùn)送35-37℃保溫運(yùn)送安全防護(hù)人、標(biāo)本、環(huán)境第四頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法(fāngfǎ)依據(jù)：標(biāo)本來(lái)源、可能存在的病原菌血液、腦脊液1.部分標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.培養(yǎng)基：血培養(yǎng)瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麥康凱平板）/EMB（伊紅美藍(lán)平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培養(yǎng)基）3.培養(yǎng)方法：同時(shí)在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)第五頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件糞便、肛拭子SS、MAC/EMB、TCBS痰、咽拭子1.可直接涂片染色鏡檢2.BAP、CA、SA、BCYE（軍團(tuán)菌培養(yǎng)基）3.在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)(péiyǎng)尿1.做細(xì)菌計(jì)數(shù)2.BAP、MAC/EMB、CA第六頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件膿液、分泌物1.可直接涂片染色鏡檢2.EB(增菌肉湯)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厭氧環(huán)境培養(yǎng)生殖道標(biāo)本(biāoběn)1.部分標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻標(biāo)本1.部分標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA第七頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件常見(jiàn)病原菌標(biāo)本的采集血液、腦脊液采血時(shí)間(shíjiān)與次數(shù)用藥前24小時(shí)內(nèi)采3~4次血液標(biāo)本，可使細(xì)菌檢出率高達(dá)99%；一般在病人發(fā)熱初期1~2天內(nèi)或發(fā)熱高峰時(shí)采集采血部位一般從肘靜脈采血，亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血第八頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件采血量成人(chéngrén)5~10ml/次，嬰幼兒1~5ml/次腦脊液采集3~5ml/次，35-37℃保溫，立即送檢第九頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件糞便標(biāo)本自然排便采集法挑取有膿血、粘液或絮狀物部分置采便盒/保存(bǎocún)液/增菌液中送檢直腸拭子采集法置C-B保存液/增菌液中送檢第十頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件呼吸道標(biāo)本咽拭采集法盡量避免口腔正常(zhèngcháng)菌群污染自然咯痰法用清水反復(fù)漱口，用力自氣管深部咳出當(dāng)日第一口膿痰，置無(wú)菌容器中盡快送檢小兒取痰法氣管鏡采集法第十一頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件胃內(nèi)采痰法結(jié)核病人可用此法采集氣管穿刺法主要用于厭氧培養(yǎng)呼吸道標(biāo)本采集注意事項(xiàng)痰液標(biāo)本以晨痰為佳，咳前要充分漱口，減少口腔(kǒuqiāng)正常菌群的污染采集的痰液標(biāo)本必須是肺深部的痰液而不是唾液第十二頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件標(biāo)本(biāoběn)采集后及時(shí)送檢，以防某些細(xì)菌在外環(huán)境中死亡。作結(jié)核分枝桿菌或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時(shí)送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長(zhǎng)做結(jié)核分枝桿菌檢查，最好收集24小時(shí)痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能發(fā)生菌血癥，可同時(shí)做血培養(yǎng)第十三頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件尿液標(biāo)本中段尿采集法腎盂尿采集法確定菌尿是否來(lái)自腎臟膀胱穿刺(chuāncì)尿采集法主要用于厭氧菌培養(yǎng)第十四頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件食物中毒檢材的處理肛拭1.采用C-B保存液和液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基運(yùn)送。2.C-B管：檢驗(yàn)人員在接到C-B管樣后，應(yīng)立即用旋渦振蕩(zhèndàng)器充分振蕩(zhèndàng)混勻，然后用無(wú)菌吸管分別吸取混懸液0.5~1ml放入11種增菌液增菌培養(yǎng)，病人肛拭同時(shí)接種于11種平板培養(yǎng)基直接分離培養(yǎng)。3.液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基：置厭氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)，病人肛拭同時(shí)接種血平板/SPS平板直接分離置厭氧培養(yǎng)箱培養(yǎng)。第十五頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件第十六頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件食品(shípǐn)應(yīng)以無(wú)菌操作取適量食品，分別放入12種增菌液管中增菌培養(yǎng)。產(chǎn)氣莢膜梭菌、蠟樣芽胞桿菌分別按國(guó)標(biāo)GB4789.13、14-2003作菌落計(jì)數(shù)。第十七頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件外環(huán)境一般不采用直接(zhíjiē)分離培養(yǎng)。分別放入12種增菌液管中增菌培養(yǎng)。第十八頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件嘔吐物需直接進(jìn)行金葡腸毒素檢測(cè)，用MiniVIDAS全自動(dòng)熒光免疫(miǎnyì)分析儀檢測(cè)。同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)。第十九頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件12種增菌培養(yǎng)液：亞硒酸鹽增菌液/MM：培養(yǎng)沙門(mén)菌牛肉湯：培養(yǎng)金黃色葡萄球菌(pútáoqiújūn)、蠟樣芽胞桿菌1%葡萄糖肉湯：培養(yǎng)鏈球菌7.5%NaCl肉湯：培養(yǎng)金黃色葡萄球菌嗜鹽增菌液：培養(yǎng)副溶血性弧菌第二十頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件堿性(jiǎnxìnɡ)蛋白胨水：培養(yǎng)霍亂弧菌腸道增菌液：培養(yǎng)致瀉大腸埃希菌GN增菌液:培養(yǎng)志賀菌、變形桿菌LB1增菌液：培養(yǎng)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌布氏肉湯：培養(yǎng)空腸彎曲菌硫乙醇酸鹽培養(yǎng)液/腦心浸液：培養(yǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌第二十一頁(yè)，共二十二頁(yè)。編輯課件內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)病原菌的采樣技術(shù)。3.培養(yǎng)方法：同時(shí)在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)。2.BAP、MAC/EMB、CA。一般從肘靜脈采血，亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動(dòng)脈(dòngmài)或股動(dòng)脈(dòngmài)采血。成人5~