臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)操作規(guī)范

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)操作規(guī)范

浙江省基因診斷中心浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院

尚世強(qiáng)一、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化設(shè)置及其各室的功能二、各階段操作要求三、PCR污染與對(duì)策四、因操作欠規(guī)范導(dǎo)致的問(wèn)題分析一、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的

規(guī)范化設(shè)置及其各室的功能規(guī)范化設(shè)置：要求參照《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號(hào)文）附件《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》。

1.四個(gè)隔開(kāi)的工作區(qū)域中每一區(qū)域都須有

專用的儀器設(shè)備。2.明確的標(biāo)記，如加樣器或試劑等。3.單一方向順序，從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)（簡(jiǎn)稱擴(kuò)增區(qū)）至產(chǎn)物分析區(qū)。4.使用不同顏色或有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服。5.實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)至擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進(jìn)行。6.各自的清潔用具。

各室功能：（一）試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)

功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。

含反應(yīng)混合液的離心管或試管在冰凍前都應(yīng)快速離心數(shù)秒。戴手套。工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面，使用可移動(dòng)紫外燈（254nm波長(zhǎng)）照射，一般照射過(guò)夜。實(shí)驗(yàn)室及其設(shè)備的使用必須有日常記錄。（二）標(biāo)本制備區(qū)

功能：臨床標(biāo)本的保存，核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。

要正確使用加樣器。正壓條件避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染，加入待測(cè)核酸后，必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對(duì)具有潛在傳染危險(xiǎn)性的材料，必須有明確的樣本處理和滅活程序。用過(guò)的加樣器吸頭必須放入專門的消毒容器內(nèi)。用于RNA擴(kuò)增檢測(cè)的樣本制備好以后，應(yīng)立即進(jìn)行cDNA合成。

（三驗(yàn)）擴(kuò)紡增區(qū)功能晌：DN呈A或cD宇NA擴(kuò)增。已制描備的DN洲A模板晉和合征成的cD套NA的加江入和暈主反弟應(yīng)混溫合液宿制備見(jiàn)成反妻應(yīng)混池合液張等也柴可在職本區(qū)丘內(nèi)進(jìn)普行。在巢爛式PC祝R測(cè)定禾中，繳第二擔(dān)次加過(guò)樣必來(lái)須在知本區(qū)比內(nèi)進(jìn)養(yǎng)行?？山翟L低本浩區(qū)的鉛氣壓順以避啊免氣酒溶膠撿從本爛區(qū)漏茂出。如有膊加樣遍則應(yīng)攏在超扣凈臺(tái)蘭內(nèi)進(jìn)骨行。打開(kāi)鞋反應(yīng)魚管前乖快速旨離心騰數(shù)秒且。（四父）擴(kuò)禾增產(chǎn)磨物分獲析區(qū)功能鍛：擴(kuò)增垃片段狐的測(cè)福定。膜上拴微孔程板上閘探針杠雜交動(dòng)方法宏、So軋ut年he驕rn轉(zhuǎn)移彎、瓊娘脂糖浸凝膠拔電泳榨、聚滴丙烯梨酰胺游凝膠蠅電泳傷、核逼酸測(cè)丸序方趟法等屠。本區(qū)繼是最鋒主要幣的擴(kuò)張?jiān)霎a(chǎn)浩物污翼染來(lái)礎(chǔ)源。泛溴化師乙錠積、丙黨烯酰漫胺、初甲醛由或同湊位素走等有群毒或招致癌婦物質(zhì)醫(yī)，注扒意實(shí)醫(yī)驗(yàn)人憐員的安全魄防護(hù)。負(fù)壓揭條件動(dòng)。二、藝各階維段操抹作要濫求測(cè)定龜分析剩前的男標(biāo)本胳采集激處理嶼、測(cè)愚定中院的核膜酸提趨取、使擴(kuò)增鑼和產(chǎn)筍物分方析以伏及測(cè)屬定后考的結(jié)尸果報(bào)廚告等瓶。（一丑）標(biāo)崗本的漢采集臨床尿標(biāo)本巡壽包括ED種TA或枸櫞午酸鈉抗凝身全血嘴或骨棚髓、廊血清邀或血井漿、怨痰、鉛腦脊冶液、炒尿及的分泌慶物等群。ED冬TA和枸勸櫞酸狂鹽是歷首選向的抗?jié)q凝劑允。不狂能使吹用肝膛素抗甜凝，敵因肝素酒是Ta德q酶的勤強(qiáng)抑仿制劑。玻璃粘器皿暮在使終用前新應(yīng)高烤壓處名理，否25謎0°烘烤4小多時(shí)以槐上可精使RN潔A酶永罰久性寶失活泳。臨床款用于RN賀A（如HC冬V抱RN曠A）擴(kuò)增俊檢測(cè)交的血遠(yuǎn)標(biāo)本畢應(yīng)盡旅快（3小溫時(shí)以輸內(nèi)）分橡離血聞漿，磚以避踐免RN袖A的降黃解。（二爹）標(biāo)清本的匹穩(wěn)定湯化處?kù)柪鞤N姿A：不需外特殊旺穩(wěn)定書化處錦理。RN銀A：異硫葡氰酸邪胍鹽尋（GI規(guī)TC朵）可使DN壩A酶和RN葡A酶失很活。（三母）標(biāo)亂本的壟運(yùn)送可在廣常溫棕下通出過(guò)郵業(yè)寄運(yùn)枕送，痰如用叨于DN灑A擴(kuò)增尺檢測(cè)彈的ED專TA抗凝尤全血浪及用挽于RN量A擴(kuò)增溉檢測(cè)擇的GI結(jié)TC穩(wěn)定燙化處寇理的近標(biāo)本虜。未經(jīng)椅穩(wěn)定軍化處標(biāo)理，炸則必頌須速知凍后拜，放側(cè)在干螞冰中螞運(yùn)送杠。（四疼）標(biāo)初本的賤貯存1.響血歌清/開(kāi)血漿夠等—省-焰70評(píng)℃2.來(lái)用村于DN秒A測(cè)定壁的已純化瓣核酸樣本肢—百4℃3.巴用界于RN姥A測(cè)定炊的已如純化漿核酸踏樣本絕—禮-8僑0℃4.癥用撕乙醇槳沉淀調(diào)的核耽酸樣恥本—仔-嫌20適℃5.悲G猾I(xiàn)T惰C處理最的RN區(qū)A標(biāo)本鬼在室?guī)鞙乜山颖４婵?天（五喚）標(biāo)蘿本的永處理夾（核鉤酸提妥取）抑制消物可能虛來(lái)源永于：標(biāo)本巨本身禮（如交血紅魚素及絞其前唉體或巾降解若產(chǎn)物急）。核酸旅提取林過(guò)程超中殘球留的槳有機(jī)宰溶劑捎（如取酚、祝氯仿痕等）摸。痰須壤液化淋處理晉。操作獲時(shí)（長(zhǎng)加裂姜解液儉后充頂分混旬勻，傷沸水另?。┳⒁馊危孩匐x眨心管噸不能伶插得姨過(guò)低淚，以直防進(jìn)桿水；②水仰浴時(shí)賊不能謎加蓋美，防窗管蓋嘗爆開(kāi)掩；③水至浴時(shí)散間須斥準(zhǔn)確四，1芽0±豎1mi幫n；④水絡(luò)浴時(shí)烈不能返走開(kāi)之；⑤左纏右手紡分開(kāi)癢，左中手只勝接觸憐樣本席，右膠手只屯接觸妙加樣腫器及朗操作口儀器屋。（六靈）靶憶核酸產(chǎn)的逆脂轉(zhuǎn)錄貪（RT滔）和擴(kuò)輸增有多吳種因獨(dú)素可令引起磨核酸喉擴(kuò)增衡檢測(cè)假陰寒性結(jié)果多，如勒擴(kuò)增嚼靶核澆酸中截抑制晚劑存蠻在、Ta布q酶失槍活、稍退火丟溫度稱不對(duì)餡、Mg謎++濃度翠不佳若、患級(jí)者標(biāo)狠本或斜試劑爽受污鵲染等秋。擴(kuò)增襖儀孔巖中熱悅傳導(dǎo)損的均一祖性極為賞重要茄。RT勉-P衣CR操作仁注意歲：①標(biāo)址本必袍須新窮鮮；②做RN功A標(biāo)本呈的槍論頭離辭心管凈必須榮無(wú)菌秩；③冰泳上操陣作；④處彩理完盤后須延立即紙上機(jī)丑，不扯能放波置；⑤注愚意左補(bǔ)右手桌分開(kāi)濫。（七干）擴(kuò)割增產(chǎn)彼物的奇分析擴(kuò)增汪產(chǎn)物也的測(cè)威定有驢各種財(cái)方法果，如罵電泳紹、限您制性圾酶切攀、斑而點(diǎn)印伙跡、研探針蹄雜交悼、測(cè)多序、嚼分光濤光度蕩法定澇量等允。實(shí)時(shí)拴熒光帥定量PC謊R在熒向光定姨量PC香R基礎(chǔ)撥上實(shí)森時(shí)監(jiān)己測(cè)PC詳R全過(guò)改程，像最后槍通過(guò)伸曲線壓進(jìn)行吹定量馬分析拴。與一何般熒將光定攝量PC撤R使用促熒光禾強(qiáng)度努定量閉不同星，實(shí)榮時(shí)熒治光PC闊R一般重使用Ct（每仇個(gè)反鬧應(yīng)熒觀光信歐號(hào)達(dá)進(jìn)到設(shè)取定域睬值所爭(zhēng)經(jīng)的翁循環(huán)江數(shù)）陰定量案，Ct與模萍板初搭始拷翁貝數(shù)純的對(duì)旗數(shù)成道線性羞關(guān)系腎。實(shí)時(shí)逆熒光PC鋤R的優(yōu)樂(lè)點(diǎn)：精密很度高貫，重掩復(fù)性句能好佩。Ta么qM銳an熒光罩定量PC捕R原理探針鎮(zhèn)兩端匯分別弄用熒蝦光基兵團(tuán)和篩淬滅染基團(tuán)忽標(biāo)記花，因蔑為距貢離相支近，扎基團(tuán)宣相互商作用自，不直產(chǎn)生勾熒光像；探針醋與模錢板雜簡(jiǎn)交在鍬引物拘區(qū)間輝內(nèi)，揭當(dāng)擴(kuò)奸增進(jìn)村行時(shí)朝，Ta票qDN仰A聚合靠酶的5’霜-3鄭’外切監(jiān)酶活柜性降蔥解探就針，徐熒光身基團(tuán)叮和淬問(wèn)滅基令團(tuán)分險(xiǎn)開(kāi)，版受激漆產(chǎn)生捷熒光心信號(hào)聽(tīng)；熒光桶信號(hào)各強(qiáng)度每與擴(kuò)幕增產(chǎn)存物量狡成正陣比；三、PC筒R污染換與對(duì)萍策PC哈R污染艷分環(huán)思境污薦染與障反應(yīng)蝕液污危染二馳種。缸常見(jiàn)PC輪R污染筋源有站三個(gè)霞：第一也、標(biāo)喜本間裳的交多叉污遲染；第二弱、實(shí)槽驗(yàn)室披中克麻隆質(zhì)邊粒的煎污染芽；第三帝、PC澇R產(chǎn)物的污解染（Ca綠rr局yo燃ve脖r）。要防澇止PC沿R污染談，必捧須做徐好以禾下3頑個(gè)環(huán)映節(jié)的辭工作乳：（一桐）污馬染的凈預(yù)防（二摟）污肝染源該的追雨蹤（三盾）污陜?nèi)驹幢诘奶帢?biāo)理（一范）污金染的季預(yù)防操作PC瞧R時(shí)，念按照阻下述英規(guī)則塵可有蓄效地停預(yù)防PC失R的污早染。1、PC紐奉R的前逃處理愚及后鎮(zhèn)處理包要在數(shù)不同澆的隔離工鎮(zhèn)作臺(tái)軋上或侮房間赴內(nèi)進(jìn)黨行。2、筍分裝匹試劑衛(wèi)，標(biāo)良記批徒號(hào)3、即改進(jìn)底實(shí)驗(yàn)哥操作說(shuō)：(1工)膠帶磨一次究性手泰套；(2脅)個(gè)避法免反騙應(yīng)液刮的飛訴濺；(3公)袖用梢一次誕性移食液器比或吸泡頭，挪吸頭莖不要躺暴露絨于空氣花，以則免產(chǎn)腫物氣賣溶膠碼污染唱；(4傭)侵操跳作多壁份樣跳品時(shí)鳴，要棍先將嘩可混攀勻的縱成分(dN膝TP燒s，緩沖皆液，擋引物題等)嫂一起篩制備效標(biāo)準(zhǔn)混合裕液(Ma要st譜er嫌m告ix錄)；(5津)制備溪反應(yīng)徒混合味液時(shí)爺，最氧后加應(yīng)入樣寨品DN狂A，加入DN務(wù)A后，喊在進(jìn)結(jié)行下皺一步察操作軌前要岸蓋緊反應(yīng)香管。4、棟?rùn)z查飄結(jié)果開(kāi)的可我重復(fù)總性。（二突）污膛染源維的追兆蹤1、揭陽(yáng)、扯陰性針對(duì)照選擇萍陽(yáng)性棍對(duì)照犁時(shí)，君應(yīng)選攻擇擴(kuò)齒增弱，且重復(fù)戶性好的樣秒品。陰性用對(duì)照關(guān)的選項(xiàng)擇一爭(zhēng)定要鋪小心柱。不含譜模板DN斗A的PC推R試劑荷對(duì)照艘。2、奇常見(jiàn)讀的環(huán)促境污捐染源鳥(niǎo)有(1患)建點(diǎn)勁雜交礙的點(diǎn)副樣器茫；(2惡)增切塔片機(jī)占；(3遺)執(zhí)離雪心機(jī)掉；(4再)嘗切恨膠用暫刀或束微解耍剖刀訊；(5臣)埋濃肌縮用存具，包真空柄瓶；(6伏)盜電灣泳裝嘆置和槍紫外丑燈箱他；(7復(fù))洗干午冰/凈乙醇走或水披溶鍋頸；(8獄)丘冰廈箱門侵把手拌、冷株凍架它和門喊把手掀。追蹤請(qǐng)可疑腰的環(huán)辦境污孩染源①封用覆去離竿子浸厚濕的族滅菌邪棉簽健擦試怕可疑堤部分②躬在0.撕1ml去離賓子水開(kāi)中浸斗泡；③蠢取5μl作PC閑R反應(yīng)摩；④絨電絡(luò)泳檢夫查結(jié)因果。（三廟）污斧染源銳的處己理1.協(xié)環(huán)輸境污墾染處灰理法（1依）稀酸闖處理摧法。對(duì)擦假試實(shí)御驗(yàn)陽(yáng)匪性部謹(jǐn)位或曠器件此可用狂1mo廈l/LH妥Cl擦洗滅或浸截泡殘前留DN殺A。（2餅）紫外稱法：UV照射愧波長(zhǎng)妥一般淋選擇輸25鎮(zhèn)4/惜30刻0nm竿，需考飽慮PC妥R(shí)產(chǎn)物并的長(zhǎng)預(yù)度與稱產(chǎn)物棵序列鍛中堿秧基的渠分布州。UV對(duì)長(zhǎng)基片段溫（50湯0bp以上霜）有絨效，女而對(duì)賀短片萍段效篇果不肌大。2.快反通應(yīng)液內(nèi)的污季染處典理法(1身)DN躁as尾eI法：PC取R混合危液（覆不加叔模板溉和Ta藏q酶）窗中加邁入0倆.5UDN呀as器eI，室溫魔下作執(zhí)用3轟0mi滿n后，狀加熱舊滅活慢，加剩入模曠板和Ta焦q酶后肌即可械進(jìn)行扎正常PC香R。優(yōu)點(diǎn)梯：便音宜，萄不需但知道卸擴(kuò)增DN治A序列錯(cuò)。(2踏)內(nèi)切砍酶法：選擇效識(shí)別萍四個(gè)層堿基剛的內(nèi)匆切酶吹（如Ms回pI等）來(lái)，最影好幾咬種合梢用，雁可克奪服其越識(shí)別轉(zhuǎn)序列脹特異精的缺跳陷。仁方法慨同上墓，只視是Dn至as搭eI由內(nèi)岡切酶唐（Ms承pI株10跪U）代替五，作駕用時(shí)縮慧間延昌長(zhǎng)到撞1.庫(kù)0～挪1.露5h。(3展)紫外狂照射販法：反應(yīng)羨中不滔加模言板與Ta餡q酶。(4蠅)尿嘧屯啶DN訪A糖基干化酶暢（UN駁G）法：dU蠟TP代替特反應(yīng)肥中的dT樣TP，使產(chǎn)遮物中季含大容量dU卻，U伍NG可去蟲除dU，使失害去dU的位趁置，凝阻止Ta鋤q酶的繞延伸割。PC庸R正常低循環(huán)漲前，獲用UN肆G處理PC衡R反應(yīng)霧混合睜液可躬消除PC射R產(chǎn)物伙的污傾染，標(biāo)而UN唯G在正桿常PC年R循環(huán)專變性威一步香就會(huì)熄失活希，所它以，潮對(duì)含dU的新滔合成PC精R產(chǎn)物捷沒(méi)有牛影響菜。T較A午T霉A暗TA右T域A介T銅APC雞RA筆U刑AU溫A己UUN屢GA孤AA加熱A垂AA×PC寄R該法優(yōu)點(diǎn)：①材去除尸任河獻(xiàn)來(lái)源皮（包此括引考物在諷內(nèi)）憂的污染行；②熄由于將污染歲的產(chǎn)苦物有縫大量dU存在廊，因此纏，UN損G處理今會(huì)徹楚底消泄除污宿染。③UN磁G處理姐與PC笑R擴(kuò)增嶼可在盆同一順試管內(nèi)進(jìn)翻行。四、桂因操烘作欠爽規(guī)范勿導(dǎo)致允的問(wèn)股題分化析（一因）實(shí)超驗(yàn)室榨儀器士設(shè)備1、銜設(shè)備估不齊肌全、蔬不配獵套，敞使得器實(shí)驗(yàn)丑結(jié)果毫不穩(wěn)內(nèi)定，拆引起護(hù)假性惑結(jié)果億。旋渦翠混合聯(lián)器，微政量加熊樣器洗，正苦規(guī)的械紫外訪透射足儀。RN附A如PC挺R樣品地處理殖時(shí)，韻血清怨（或場(chǎng)血漿棚）中明加入準(zhǔn)強(qiáng)烈變針性劑垮后，制血樣以中的虛蛋白絮變性草、結(jié)仍塊。吸頭的與微憑量加護(hù)樣器趨不配境套。2、PC慶R熱循證環(huán)儀攏的差膽異或坡質(zhì)量昨問(wèn)題克。移液器：①嚴(yán)娛禁大丙力來(lái)績(jī)回?cái)Q筋動(dòng)；②嚴(yán)批禁調(diào)籮至容倍量之累外使樣用；③第獲二檔愈為排飽空檔拐，不協(xié)得作全吸取演之用頁(yè)；④吸問(wèn)頭應(yīng)金浸入艱液面擋2—謹(jǐn)3mm處吸取諒；⑤嚴(yán)獄禁將菌有液撒體的糠移液斜器平把放或形倒置椒；⑥混賭勻沉震淀時(shí)多，將慮吸頭闊緊貼蛇于沉侍淀上客方管彈壁，達(dá)反復(fù)很吸取浸液體廢，將忌沉淀伍反復(fù)洲混勻監(jiān)，溶草解；⑦每倉(cāng)周用偶75霉%乙冠醇清濱洗一券次，描若有德污染炕隨時(shí)衡清洗討。離心浪機(jī)：①離驅(qū)心前杯，離篩心管躁須配砌平；②將聽(tīng)調(diào)速給檔打內(nèi)至0宏檔位薦，才慈能打千開(kāi)電盾源開(kāi)廣關(guān)，醉逐漸慨升高始轉(zhuǎn)速橋，直心至即量定轉(zhuǎn)疲速；③定悟時(shí)旋掙鈕不衣能強(qiáng)雅行歸眉零；④轉(zhuǎn)北頭未擔(dān)停止申時(shí)，冬嚴(yán)禁航打開(kāi)待蓋板護(hù)。（二稼）實(shí)互驗(yàn)室擁布局捎不合疏理引浸起的交污染音問(wèn)題1、摟樣品嶼處理斷不進(jìn)奸行隔具離，樣品姓中各耐種核變酸片段均碎會(huì)通擺過(guò)空亭氣進(jìn)柴行傳滅播。2、PC梯R結(jié)果廚檢測(cè)槍實(shí)驗(yàn)尾室和扎其它臂實(shí)驗(yàn)劣室在援一起，會(huì)出項(xiàng)現(xiàn)嚴(yán)謊重的箭擴(kuò)增吩子污壇染。3、良儀器叫設(shè)備汽及工的作服趟等（院尤其燒是加加樣器品）公用，也會(huì)鏈造成息嚴(yán)重瞎污染芒。4、儲(chǔ)實(shí)驗(yàn)扁室操圣作垃餅圾（吸頭舅、離安心管頂、樣雙品杯泳等）亂放，飄散匙在空繁氣中跑的核擦酸片呈段、顯病原傅微生蛋物可舅造成勉實(shí)驗(yàn)冷室污染鞏。（三覺(jué)）PC桂R操作糟中存僑在問(wèn)編題分元析1.陽(yáng)性皇變陰券性2.陰性嚇變陽(yáng)磚性3.家PC江R結(jié)果貓不穩(wěn)瞞定1.陽(yáng)性貸變陰戴性(1)有些役陽(yáng)性隊(duì)病人乳，經(jīng)過(guò)過(guò)PC羅R檢測(cè)依后為余陰性鉤，可稻能有暮兩種汽情況儉：一是懼采集治標(biāo)本攤方法蛾或部倒位不鍛正確鉛，二是晶如果紫病人災(zāi)取樣眠部位萄病原駕體消暫失，唱需根施據(jù)病牙人的莖病理章情況退采樣隊(duì)。(2撥)標(biāo)本袍保存渣不當(dāng)鄙，可遷引起PC殼R失敗鄙。收集起的標(biāo)跌本亂裂放（淺未放高冰箱偷），種病原待體的叨破裂交，檢兄測(cè)的樹(shù)核酸弄降解瞞，失賴去了PC底R(shí)檢測(cè)姻的模脈板或殖造成張標(biāo)本滾污染貨。2.陰性位變陽(yáng)豎性常見(jiàn)爐的原牲因靠有以喘下6遍點(diǎn)：①贊加入寫試劑教或樣帥品時(shí)老引起觸的交禾叉污川染（最呢好在豪加完街所有目其他誘反應(yīng)避成分梯，包優(yōu)括防衰止蒸姓發(fā)用限的礦順物油導(dǎo)后才效吸加模板DN名A，將模姐板加工入微戚量離片心管岸后，藥蓋好泄離心翁管并睬用戴愉有手咐套的蹈手指族輕輕炕單擊會(huì)管側(cè)戶壁，狂以搖助勻液控體，皮再作貨瞬時(shí)竹離心掏[1既0秒所]，經(jīng)使水椅相和姑有機(jī)烘相分檔開(kāi)）讀。②加叨樣器遞通道宅易形雙成氣網(wǎng)溶膠繩，造腎成加逢樣器蜘通道碧污染打，可適通過(guò)價(jià)使用村有濾樓篩的催吸頭旬避免償污染（將勇模板DN霜A加入PC艘R系統(tǒng)萬(wàn)時(shí)，裂注意兼切勿扭形成校噴霧孟，后僅者有絮可能摘污染錄別的潔反應(yīng)心，所擊有并園非即晚用管似都應(yīng)胃蓋嚴(yán)請(qǐng)）。③費(fèi)打開(kāi)熱標(biāo)本搖管蓋唉引起負(fù)樣品進(jìn)飛濺（打桿開(kāi)前駕須瞬永間離么心）④操僻作時(shí)恭手套割引起臘的交剝叉污他染（拿皮過(guò)模進(jìn)板DN蒙A管后零應(yīng)更播換手濫套）⑤不暑明原滾因引刑起公壘用試矮劑如明液體探石蠟渣等污痕染（必獅須設(shè)免置一拒個(gè)不僵含模庭板DN柳A但含PC稿R系統(tǒng)章中所針有其酒他成亮分的漲對(duì)照億反應(yīng)乳。這贏一對(duì)旺照管耗須在財(cái)準(zhǔn)備笛好所尚有其煎他PC絞R以后仿才進(jìn)捕行吸月加）抓。⑥實(shí)船驗(yàn)室輕污染3.PC搏R檢測(cè)穴結(jié)果硬不穩(wěn)核定（1共）樣基品處復(fù)理方播法不令當(dāng)，濫標(biāo)本星中雜齒質(zhì)很喘多，血清伴標(biāo)本控有蛋貞白質(zhì)也、血逢紅素濫、代豬謝產(chǎn)撫物等脈。蛋白割質(zhì)—愿—DN窄A電泳昨帶拖銀尾血紅灑素中敢的卟圓啉化心合物渴——躲抑制Ta苦q酶活幼性代謝塞產(chǎn)物嫩——跌干擾仔引物蹦配對(duì)（2漂）操術(shù)作不醬當(dāng)帶廈來(lái)的嘆后果主要鍛指不媽能嚴(yán)鼠格按查照說(shuō)全明進(jìn)丙行操淺作造仆成PC限R檢測(cè)葛失敗擊。如HC搶V競(jìng)RN妹A壩PC針R樣品農(nóng)處理位試劑A、養(yǎng)B、途C和7熊5%鬼乙醇膊的操惑作過(guò)艷程。50μl血清急標(biāo)本(剪標(biāo)本惹可