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文檔簡介
關(guān)于尿液分析技術(shù)和相關(guān)儀器第1頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
概述:尿液分析是臨床診斷泌尿系統(tǒng)的重要措施之一,通過對尿液的理化檢查和尿沉渣有形成分的分析,對腎臟和尿路疾患的診斷、鑒別診斷以及預(yù)后判斷都有重要的臨床意義。第2頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第一節(jié)尿液分析儀
尿液自動(dòng)分析儀的發(fā)展史尿液分析儀的分類尿液分析儀測試原理尿液分析儀結(jié)構(gòu)安裝、調(diào)校、維護(hù)干化學(xué)檢查與顯微鏡檢查干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作的局限性影響干化學(xué)檢測結(jié)果的因素第3頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第4頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第5頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、自動(dòng)尿液分析儀的發(fā)展史干化學(xué)尿液分析儀是測定尿中某些化學(xué)成份的自動(dòng)化儀器,是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室尿液自動(dòng)化檢查的重要工具。50年代即有人采用單一干化學(xué)試帶法測定尿中蛋白質(zhì)和糖。尿液分析儀的出現(xiàn)給臨床實(shí)驗(yàn)室尿液分析帶來了一個(gè)飛躍。返回本節(jié)目錄第6頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、自動(dòng)尿液分析儀的發(fā)展史60年代,世界上許多公司也開始研制生產(chǎn)尿液干化學(xué)試劑帶,如德國寶靈曼公司于1964年推出COMBUR-TEST試劑帶。70年代,隨著自動(dòng)化程度不斷的提高,半自動(dòng)尿液分析儀的問世,替代了肉眼觀察的結(jié)果,減少了人為誤差,提高了檢測的敏感度和特異性。返回本節(jié)目錄第7頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、自動(dòng)尿液分析儀的發(fā)展史到了80年代中期,由于計(jì)算機(jī)技術(shù)的高度發(fā)展和廣泛使用,尿液分析儀的自動(dòng)化才能得到迅猛發(fā)展,由半自動(dòng)發(fā)展到全自動(dòng)。我國尿干化學(xué)試帶的研制開始于60年代,1985年廣西桂林醫(yī)療電子儀器廠從日本引進(jìn)了當(dāng)時(shí)先進(jìn)的MA-4210型尿液自動(dòng)分析儀和專用試劑帶的生產(chǎn)技術(shù)和設(shè)備,以后幾年,經(jīng)過我國專家的努力,于1990年達(dá)到了全部國產(chǎn)化。返回本節(jié)目錄第8頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類按工作方式分類按測試項(xiàng)目將尿液分析儀分類按自動(dòng)化程度將尿液分析儀分類返回本節(jié)目錄第9頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類(一)按工作方式可分為濕式尿液分析儀干式尿液分析儀:干式尿液分析儀主要用于自動(dòng)評定干試紙法的測定結(jié)果,因其結(jié)構(gòu)簡單、使用方便,目前臨床普遍應(yīng)用。
返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第10頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
二、尿液分析儀的分類(二)按測試項(xiàng)目可分為8項(xiàng)尿液分析儀9項(xiàng)尿液分析儀10項(xiàng)尿液分析儀11項(xiàng)尿液分析儀返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第11頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
二、尿液分析儀的分類1.8項(xiàng)尿液分析儀
代表儀器:日本或國產(chǎn)的MA-4210型檢測項(xiàng)目:尿蛋白、尿糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿隱血、尿亞硝酸鹽。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第12頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類2.9項(xiàng)尿液分析儀
代表儀器:德國產(chǎn)的RL-9型檢測項(xiàng)目:尿蛋白、尿糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿隱血、尿白細(xì)胞。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第13頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類3.10項(xiàng)尿液分析儀
代表儀器:德國的MIDITRON型或美國的CLINITEK200型檢測項(xiàng)目:蛋白、糖、PH、酮體、膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、尿比密
返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第14頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類4.11項(xiàng)尿分析儀
代表儀器:美國的CLINITEK500型檢測項(xiàng)目:蛋白、糖、PH、酮體、尿膽紅素、尿膽原、尿亞硝酸鹽、尿隱血、白細(xì)胞、比密、維生素C;
返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第15頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿液分析儀的分類(三)按自動(dòng)化程度可分為半自動(dòng)尿液分析儀:代表儀器是德國的MIDITRON型、美國的CLINITEK200型全自動(dòng)尿液分析儀:代表儀器是德國的SUPERTRON型、美國的CLINTEKAT-LAS型返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第16頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀測試原理
尿液分析儀的測試原理主要有以下三個(gè)方面:尿液分析儀的試劑帶原理尿液分析儀檢測原理尿液分析儀計(jì)算原理返回本節(jié)目錄第17頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理試劑帶原理多聯(lián)試劑帶是將多種項(xiàng)目的試劑塊集成在一個(gè)試劑帶,使用多聯(lián)試劑帶,浸入一次尿液可同時(shí)測定多個(gè)項(xiàng)目。它采用了多層模結(jié)構(gòu);返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第18頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理
多聯(lián)試劑帶結(jié)構(gòu)圖返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第19頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三尼龍膜:防止大分子物質(zhì)對反應(yīng)的污染;絨制層:包括碘酸鹽層和試劑層:碘酸鹽層可以破壞維生素C等干擾物質(zhì),試劑層含有試劑成分,主要與尿液中測定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化;吸水層:可使尿液均勻快速的浸入,并能抑制尿液流到相鄰的反應(yīng)區(qū);塑料底層:作支持體。(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第20頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三另外,試劑帶中還有另一個(gè)墊-“補(bǔ)償區(qū)”,作為尿液本底顏色,以對有色尿及儀器變化等產(chǎn)生的誤差進(jìn)行補(bǔ)償。試劑帶按一定的順序排列,各個(gè)廠家不一樣,尿液中的各種成分被各測定塊吸收,引起化學(xué)反應(yīng)及酶反應(yīng),使試劑塊顏色根據(jù)尿液中各成分的比例而變化。
(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第21頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理項(xiàng)目縮寫符號反應(yīng)原理膽紅素BIL偶氮反應(yīng)法尿膽原URO醛反應(yīng)法,重氮反應(yīng)法酮體KET硝基鐵氫化鈉法亞硝酸鹽NIT亞硝酸鹽還原法白細(xì)胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚電解質(zhì)離子解離法
各項(xiàng)目測定原理表返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第22頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理1、PH測定:采用pH指示劑原理,常用甲基紅和溴麝香草酚藍(lán)組成的復(fù)合型指示劑,呈色范圍從pH4.5~pH9顏色由橘黃色、綠色變?yōu)樗{(lán)色,由此反映尿液的pH值。2、尿蛋白質(zhì)測定:利用pH指示劑蛋白質(zhì)誤差的原理。第23頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理3、尿葡萄糖測定:當(dāng)前有兩種完全不同的檢測尿糖的方法,一種是基于葡萄糖氧化酶法原理,能特異地檢出尿中的葡萄糖;另一種是基于銅還原法的原理,能檢測葡萄糖和其他還原性物質(zhì)。4、尿酮體測定:采用亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)測量酮體。第24頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理5、尿隱血測定:利用游離血紅蛋白、溶解紅細(xì)胞或肌紅蛋白中的血紅素具有過氧化物酶樣作用,能催化過氧化氫釋放出新生態(tài)氧,使色原氧化而顯色,其顏色深淺與血紅蛋白含量有關(guān)。6、尿膽紅素測定:采用重氮反應(yīng)法原理。7、尿膽原測定:采用Ehrlich醛反應(yīng)原理或重氮反應(yīng)原理。第25頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理8、尿亞硝酸鹽測定:尿亞硝酸鹽試驗(yàn)的化學(xué)基礎(chǔ)是利用某些細(xì)菌能將尿中硝酸鹽還原成亞硝酸鹽的特性。9、尿白細(xì)胞測定:利用中性粒細(xì)胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有機(jī)酸,吲哚酚可進(jìn)一步氧化成靛藍(lán)的原理;或吲哚酚和重氮鹽反應(yīng)成重氮色素而顯色,顏色深淺與粒細(xì)胞量的多少有關(guān)。第26頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理10、尿比密測定:基于某種預(yù)處理的多聚電解質(zhì)在一定離子濃度溶液中pKa變化來測量比密。11、尿維生素C測定:采用磷鉬酸緩沖液或甲基綠與尿中維生素C進(jìn)行反應(yīng),形成鉬藍(lán),顏色由藍(lán)色變成紫色,顏色深淺與尿中維生素C含量有關(guān)。第27頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理試劑帶的應(yīng)用不同型號的尿液分析儀一般使用自己配套的專用試劑帶。試劑塊要比測試項(xiàng)目多一個(gè)空白塊,有些儀器還多一個(gè)位置參考塊。各試劑塊與尿液中被測定成分反應(yīng)而呈現(xiàn)不同顏色。空白塊是為了消除尿液本身的顏色及試劑塊分布的狀態(tài)不均等產(chǎn)生出測試誤差,提高測量準(zhǔn)確度而設(shè)置的。固定塊是為了消除在測試過程中為免每次測定試劑塊的位置不同產(chǎn)生測試誤差設(shè)置的,每次測定前,檢測頭都會移到參考位置進(jìn)行自檢,必要時(shí),自動(dòng)調(diào)整發(fā)光二極管的亮度和靈敏度,以提高檢測的信噪比。第28頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三干化學(xué)分析試帶使用說明操作人員必須仔細(xì)閱讀試帶性能和儀器的操作方法;操作中應(yīng)充分混勻新鮮尿液標(biāo)本;將試帶全部迅速浸入尿液標(biāo)本;試帶從標(biāo)本中取出時(shí),除去多余的尿液;可疑結(jié)果必須進(jìn)行確診實(shí)驗(yàn);干化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)與理學(xué)、顯微鏡結(jié)果相關(guān)聯(lián)。(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第29頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三試帶保存方法:試帶貯存在干燥、不透明、有蓋的容器中,不能取出容器中的干燥劑;放置于陰涼干燥的地方,不要放冰箱;不能暴露于揮發(fā)性的煙霧中;不能使用過期的試帶,通常打開后6個(gè)月內(nèi)用完,不能使用已褪色的化學(xué)試帶。(一)、尿液分析儀的試劑帶的原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第30頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀檢測原理把試劑帶浸入尿液中后,除了空白塊外,其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越?。环粗瓷渎试酱?。因?yàn)轭伾纳顪\與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系,所以只要測得光的反射率即可以求得尿液中各種成分的濃度。第31頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三光電管球面積分儀濾光片光源第32頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀檢測原理尿液分析儀一般采用雙波長法測定試劑塊的顏色變化。一種波長為測定波長,它是被測試劑塊的敏感特征波長;另一種為參比波長,是被測試劑塊不敏感的波長,用于消除背景光和其他雜散光的影響。各種試劑塊都有相應(yīng)的測定波長。第33頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三檢測原理此類儀器一般用微電腦控制,將浸有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內(nèi),試帶上已產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)的各種試劑墊被光源照射,其反射光被球面積分儀接收,球面積分儀的光電管被反射的雙波長光(包括通過濾光片的測定光和一束參考光)照射。測定每種試劑帶塊反射光的光量值與空白塊的反射光量值進(jìn)行比較,通過計(jì)算機(jī)求出反射率,換算成濃度值,便可由分析儀打印出半定量的數(shù)值。三、尿液分析儀檢測原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第34頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀檢測原理各波長的比例由檢測項(xiàng)目決定在幾十秒鐘(根據(jù)不同分析儀自己的設(shè)定時(shí)間而定)的反應(yīng)時(shí)間內(nèi),各個(gè)項(xiàng)目(空白塊不參加反應(yīng),只作標(biāo)準(zhǔn)參考用)的試劑帶塊由于化學(xué)反應(yīng)而呈現(xiàn)顏色變化,并吸收照射的單色光,返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第35頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三各波長的選擇由檢測項(xiàng)目決定,球面積分儀上有三個(gè)光電管和特定波長濾光片:參比光為深紅色濾片(λ=720nm)。在測量光電管中:一個(gè)加有綠色濾光片(550nm)對亞硝酸鹽、酮體、膽紅素、尿膽原作測量。另一個(gè)紅色濾光片(620nm),對葡萄糖、蛋白質(zhì)、PH和隱血作測量。三、尿液分析儀檢測原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第36頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀檢測原理儀器的檢測過程為:光源燈發(fā)出的光通過積分球照射在試劑帶的膜塊上。試劑帶膜塊顏色的深淺對光的吸收和反射是不一樣的,顏色越深,吸收的光量值越大,反射光量值越小,則反射率越小。儀器按下列公式自動(dòng)計(jì)算出反射率,然后與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,自動(dòng)打印出各成分的相應(yīng)結(jié)果。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第37頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三三、尿液分析儀計(jì)算原理R(%):反射率Tm:試劑墊對測定波長的反射強(qiáng)度Ts:試劑墊對參考波長的反射強(qiáng)度Cs:標(biāo)準(zhǔn)墊對參考波長的反射強(qiáng)度Cm:標(biāo)準(zhǔn)墊對測定波長的反射強(qiáng)度計(jì)算原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第38頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)和功能尿液分析儀由:機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。返回本節(jié)目錄第39頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)和功能(一)機(jī)械系統(tǒng)
主要功能是將待測的試劑帶傳送到位。檢測后將試劑帶排送到廢物盒。
返回本節(jié)目錄第40頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
(二)光學(xué)系統(tǒng)四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)和功能返回本節(jié)目錄光學(xué)系統(tǒng)通常包括光源、單色處理、光電轉(zhuǎn)換三部分。
第41頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三光電管球面積分儀濾光片光源第42頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第43頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(三)電路系統(tǒng)其作用是將光電檢測器的信號進(jìn)行放大和運(yùn)算處理。四、尿液分析儀結(jié)構(gòu)和功能返回本節(jié)目錄第44頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三五、安裝、調(diào)校、維護(hù)安裝條件:遠(yuǎn)離電磁干擾源、電源、防止陽光照射、防潮、通風(fēng)好、溫度10~30℃,濕度<80%;調(diào)校:新儀器安裝后,或每次大維修之后,必須對儀器技術(shù)性能進(jìn)行測試,評價(jià),這對保證檢驗(yàn)質(zhì)量起到重要的作用。返回本節(jié)目錄第45頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三日常應(yīng)用和維護(hù)尿液分析儀的日常應(yīng)用和維護(hù):每臺尿液分析儀應(yīng)建立操作程序,并嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行操作;專人負(fù)責(zé)管理,健全專用的儀器登記本,對每天儀器操作的情況,出現(xiàn)的問題,以及維護(hù),維修的情況予以登記;五、安裝、調(diào)校、維護(hù)
返回本節(jié)目錄第46頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三每天開機(jī)測定前,要對儀器進(jìn)行全面檢查,測定完畢要對儀器進(jìn)行全面清理保養(yǎng);做到每日、每周、每月的維護(hù).五、安裝、調(diào)校、維護(hù)返回本節(jié)目錄第47頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三五、安裝、調(diào)校、維護(hù)一般評價(jià)程序
1.首先應(yīng)該對尿液分析儀進(jìn)行校正,校正的目的是讓儀器進(jìn)入廠商規(guī)定的狀態(tài)。其操作是用標(biāo)準(zhǔn)的校正條對儀器進(jìn)行測定儀器的光路,狀態(tài)進(jìn)行校正,以達(dá)到最佳狀態(tài),有些廠家的校正條是一次性的,不能重復(fù)使用,以免影響試驗(yàn)結(jié)果,有些廠家的校正條可重復(fù)使用,尿液分析儀只有在校正通過時(shí)才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn),否則要停機(jī)。返回本節(jié)目錄第48頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2.應(yīng)該對尿液分析儀及試紙條的準(zhǔn)確度進(jìn)行評價(jià)。準(zhǔn)確度指的是測定值與真值的接近程度,由于尿液分析儀是一個(gè)半定量的儀器,因此它的準(zhǔn)確度的評價(jià)只有根據(jù)儀器制造商規(guī)定的測定范圍配制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物,在儀器上嚴(yán)格按說明書操作,每份標(biāo)準(zhǔn)物測定3次,觀察測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)物濃度相符合程度。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)返回本節(jié)目錄第49頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三3.用傳統(tǒng)的方法與尿液分析儀測定作對比分析,對尿液分析儀的敏感性和特異性進(jìn)行評價(jià)。
4.了解該儀器對每項(xiàng)測試指標(biāo)的測試范圍,并建立該儀器的參考范圍。五、安裝、調(diào)校、維護(hù)返回本節(jié)目錄第50頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三六、干化學(xué)與鏡檢
中華醫(yī)學(xué)會經(jīng)過三次專家研討會,尋求一個(gè)簡單、快速的篩選方法,對干化學(xué)尿液分析提供了篩選的試驗(yàn)手段。在干化學(xué)尿試帶質(zhì)量合格,尿液分析儀運(yùn)轉(zhuǎn)正常情況下,試驗(yàn)中滿足以下條件時(shí),可免去鏡檢:白細(xì)胞、紅細(xì)胞、蛋白質(zhì)及亞硝酸鹽為陰性。返回本節(jié)目錄第51頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三另外,對腎臟疾病的病人不適合干化學(xué)檢查篩選法,對以鏡檢結(jié)果作為診斷依據(jù)和觀察療效指標(biāo)時(shí),不宜作篩選,如:結(jié)石、結(jié)晶、寄生蟲的檢查。六、干化學(xué)與鏡檢
返回本節(jié)目錄第52頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三七、干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作的局限性干化學(xué)尿液分析技術(shù)操作簡便,檢測項(xiàng)目多,診斷過篩面大,儀器價(jià)廉等諸多優(yōu)點(diǎn),很快在臨床推廣應(yīng)用,但這類儀器檢測的結(jié)果受許多因素的影響,務(wù)必嚴(yán)格控制才能獲得好的結(jié)果。返回本節(jié)目錄第53頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三八、影響干化學(xué)檢測結(jié)果的因素影響檢測結(jié)果的因素大致來自如下幾方面:試紙條因素尿標(biāo)本因素操作因素:包括儀器的校驗(yàn)和維護(hù),操作程序,環(huán)境因素等。返回本節(jié)目錄第54頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第二節(jié)尿沉渣分析儀尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展尿沉渣分析儀分類返回本節(jié)目錄第55頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展尿沉渣檢驗(yàn)包括有形成分計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)分析兩方面的檢驗(yàn)。尿液因物理性質(zhì)改變(滲透壓)引起被檢細(xì)胞形態(tài)學(xué)變異,鑒定技術(shù)較難,自動(dòng)化和機(jī)械化檢驗(yàn)發(fā)展很慢。但由于有血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀的開發(fā)經(jīng)驗(yàn),在美國和日本已有尿沉渣自動(dòng)分析儀的應(yīng)用,在我國,在較大的檢驗(yàn)科室,已有了各種檔次的尿沉渣分析儀在應(yīng)用。
返回本節(jié)目錄第56頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展尿液化學(xué)自動(dòng)分析儀的出現(xiàn),對尿液化學(xué)成分和部分有形成分的檢查提供了可靠和重要的數(shù)據(jù),但對尿液有形成分的定量計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)的分析還沒有完全解決,隨著計(jì)算機(jī)的高速發(fā)展,尿沉渣自動(dòng)分析儀的問世,較好的解決了顯微鏡鏡檢尿沉渣所存在的問題。返回本節(jié)目錄第57頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(1)開展利用干化學(xué)法檢測尿中WBC、RBC,進(jìn)行顯微鏡檢查的篩選。(2)利用圖象攝影系統(tǒng)攝制尿沉渣成分的靜止圖象,對尿沉渣成分進(jìn)行自動(dòng)分類、計(jì)算及儲存等,形成尿沉渣自動(dòng)分析系統(tǒng)。(3)利用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合電阻抗原理檢測尿中成分進(jìn)行定量分析的全自動(dòng)尿沉渣分析儀。一、尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展返回本節(jié)目錄第58頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(4)除利用普通顯微鏡外,還可采用干涉、相差、偏振光、掃描及透射電鏡等觀察。(5)現(xiàn)已采用尿沉渣活體染色及細(xì)胞化學(xué)等多染色法來識別各種細(xì)胞和管型。(6)近年來應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)識別各種細(xì)胞成分。一、尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展返回本節(jié)目錄第59頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三一、尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展返回本節(jié)目錄第60頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三二、尿沉渣分析儀分類(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀(二)影像式尿沉渣分析儀(三)尿沉渣分析工作站(四)尿沉渣分析儀與顯微鏡檢查返回本節(jié)目錄第61頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀分析原理儀器結(jié)構(gòu)尿沉渣細(xì)胞資料的綜合分析尿沉渣分析儀檢測項(xiàng)目尿沉渣自動(dòng)分析儀的評價(jià)紅細(xì)胞、白細(xì)胞的參考值儀器的安裝、使用及保養(yǎng)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第62頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三第63頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三返回知識點(diǎn)返回本節(jié)目錄(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第64頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三1.稀釋、染色的標(biāo)本通過鞘液池2.氬激光照射3.測定熒光、散射光和電阻抗返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀
分析原理第65頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
稀釋、染色的標(biāo)本通過鞘液池當(dāng)一個(gè)尿液標(biāo)本被稀釋液稀釋和染液染色后,它靠液壓作用通過鞘液流動(dòng)池,當(dāng)反應(yīng)樣品從噴嘴出口進(jìn)入鞘液流動(dòng)室時(shí),它被一種無粒子顆粒的鞘液包圍,使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形式通過流動(dòng)池的中心(豎直)軸線,UF-100分析原理返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第66頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
氬激光照射在這里每個(gè)尿液細(xì)胞將被氬激光光束照射。每個(gè)細(xì)胞有不同程度的:熒光強(qiáng)度(FL,fluorescentlight)是從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光強(qiáng)度,主要反映細(xì)胞的定量特性,如細(xì)胞膜、核膜、線粒體、核酸)、散射光強(qiáng)度(這種儀器測定的是前向角散射光Fsc,forwardscatterelight,它成比例的反映細(xì)胞的大小)電阻抗的大小(電阻抗電信號主要與細(xì)胞的體積成正比)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第67頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
測定熒光、散射光和電阻抗儀器正是將這種熒光、散射光和電阻抗的信號轉(zhuǎn)變成電信號,分析這些電信號,才能使得每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出直方圖和散射圖,然后分析這些圖形,即可區(qū)別出每個(gè)細(xì)胞并得出每個(gè)細(xì)胞的形態(tài)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第68頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
儀器結(jié)構(gòu)流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀包括:
光學(xué)檢測系統(tǒng)液壓系統(tǒng)電阻抗檢測系統(tǒng)電子系統(tǒng)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第69頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
光學(xué)檢測系統(tǒng):光學(xué)系統(tǒng)由氬激光(波長488nm)、激光反射系統(tǒng)、流動(dòng)池、前向光采集、前向光檢測器組成。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第70頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三激光作為光源用于流式細(xì)胞分析系統(tǒng),它被雙色反射鏡反射,然后被聚光器收集形成射束點(diǎn),而聚集于流動(dòng)池的中央。樣品流到流動(dòng)池,每個(gè)細(xì)胞被激光光束照射,產(chǎn)生前向散射光和前向熒光的光信號。散射光信號被光電二極管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺惠斔偷轿⑻幚砥?。返回本?jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第71頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三根據(jù)光散射定律,在分析尿標(biāo)本時(shí),由于細(xì)胞的種類不同和分布不均,光的反射和散射主要取決于細(xì)胞表面,因此散射光的強(qiáng)度主要取決于細(xì)胞的大小,所以儀器可以從散射光的強(qiáng)度得出測定細(xì)胞大小的資料。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第72頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三熒光通過濾光片濾過一定波長的熒光后,輸送到光電倍增管,將光信號放大再轉(zhuǎn)變成電信號,然后輸送到微處理器,得出細(xì)胞的定量特性。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第73頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三UF-100尿沉渣分析儀使用兩種熒光染料:一種為菲啶染料,主要染細(xì)胞的核酸成分(DNA),在480nm光波激發(fā)時(shí),產(chǎn)生610nm的橙黃色光波,用于區(qū)別有核的細(xì)胞和無核的細(xì)胞(如RBC與WBC,病理管型和透明管型);返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第74頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三另一種為羧花氰染料,它穿透能力強(qiáng),與細(xì)胞質(zhì)膜(細(xì)胞膜、核膜和線粒體)的脂層成分發(fā)生反應(yīng)結(jié)合,在460nm的光波激發(fā)時(shí)產(chǎn)生505nm的綠色光波,主要用于區(qū)別細(xì)胞的大?。ㄈ缟掀ぜ?xì)胞和白細(xì)胞的區(qū)別)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第75頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三這兩種染料具有下列特性:反應(yīng)快速:背景熒光低:從細(xì)胞發(fā)生的熒光與染料和細(xì)胞的結(jié)合程度成比例。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第76頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
液壓(鞘液流動(dòng))系統(tǒng):反應(yīng)池染色標(biāo)本隨著真空作用吸入到鞘液流動(dòng)池。為了使尿液細(xì)胞進(jìn)入流動(dòng)池不凝固成團(tuán)。而使單細(xì)胞流通過加壓的鞘液輸送到流動(dòng)池,使染色的樣品通過流動(dòng)池的中央,鞘液形成一股液渦流,使尿液細(xì)胞排成單個(gè)縱隊(duì)通過鞘液中心。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第77頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
電阻抗檢測系統(tǒng):●電阻抗測定系統(tǒng)包括測定細(xì)胞體積的電阻抗系統(tǒng)和測定尿液導(dǎo)電率的傳導(dǎo)系統(tǒng)。電阻抗測定的方法:與血細(xì)胞分析義的電阻抗原理相同●部分標(biāo)本含有某些結(jié)晶,影響電阻抗測定的敏感性,為了保證尿液標(biāo)本傳導(dǎo)性穩(wěn)定,可以在稀釋液中使用含EDTA鹽化合物或加熱使結(jié)晶溶解。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第78頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
電子系統(tǒng):
從樣品細(xì)胞中得到的前向散射光很強(qiáng),不需要極敏感光檢測器,光電二極管能夠?qū)⒐庑盘栟D(zhuǎn)變成電信號。但從樣品細(xì)胞中得到的前向熒光很弱,因此需要使用極敏感的光電倍增管。這種光電倍增管能夠吸收在光電表面光子的能量,并使用金屬光電效應(yīng)發(fā)出光電子。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第79頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三發(fā)出的光電子能夠被外加電壓促進(jìn),導(dǎo)致許多繼發(fā)電子放大。這種放大的前向熒光轉(zhuǎn)變成電信號。從樣品中得到的電阻抗信號和傳導(dǎo)性信號被感受器接受后直接放大輸送給微處理器。(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第80頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三光學(xué)分析系統(tǒng)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第81頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三分析原理流程圖(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第82頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
尿沉渣細(xì)胞資料的綜合分析儀器通過對前向散射光的波形(強(qiáng)度和散射光的脈沖寬度)、前向熒光波形(熒光強(qiáng)度和熒光脈沖寬度)和電阻抗值的大小綜合分析,得出細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞橫截面積、染色片段的長度、細(xì)胞容積等信息并繪出直方圖和散射圖。儀器通過分析每個(gè)細(xì)胞信號波形的特性來對其進(jìn)行分類。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第83頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三前向散射光信號主要反應(yīng)細(xì)胞體積的大小。前向散射光強(qiáng)度FSC反應(yīng)細(xì)胞的橫截面積;前向散射光脈沖寬度FSCW主要反應(yīng)細(xì)胞的長度;FSCW=CL+BW/VCL——細(xì)胞長度BW——激光束寬度V——流動(dòng)速度返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第84頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三前向熒光信號主要反應(yīng)細(xì)胞染色質(zhì)塊的大小熒光強(qiáng)度FL主要反應(yīng)細(xì)胞染色質(zhì)的強(qiáng)度;前向熒光脈沖寬度FLW反映細(xì)胞染色質(zhì)的長度。FLW可以用下列等式表示:FLW=NL+BW/VNL——細(xì)胞核長度BW——激光束寬度V——流動(dòng)速度返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第85頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三尿沉渣分析儀檢測項(xiàng)目UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀采集標(biāo)本體積為9ml,自動(dòng)進(jìn)樣模式所需標(biāo)本體積不少于4ml,實(shí)際吸取標(biāo)本體積為0.8ml,檢測標(biāo)本體積為9.0微升,每小時(shí)可檢測100個(gè)尿標(biāo)本,可報(bào)告以下參數(shù):返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第86頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三檢測項(xiàng)目紅細(xì)胞白細(xì)胞上皮細(xì)胞(EC)管型(CAST)細(xì)菌(BACT)其他的檢測導(dǎo)電率的測定返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第87頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三1.紅細(xì)胞儀器分析RBC直徑為8微米,無核和線粒體,所以RBC熒光強(qiáng)度(F1)很弱。另外,RBC在尿液標(biāo)本中大小不均,且部分溶解成小RBC碎片,或者在腎臟疾患時(shí)排出的RBC也大小不等,因此,可以看見RBC前向散射光強(qiáng)度(FSC)差異較大。一般來說,F(xiàn)1極低和FSC大小不等均為RBC。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第88頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三儀器除給出尿RBC定量(每微升的細(xì)胞數(shù)和每高倍視野的平均細(xì)胞數(shù))參數(shù)外,還可報(bào)告尿形態(tài)均一性RBC和形態(tài)非均一性RBC的百分比,非溶血性RBC的數(shù)量和百分比,平均紅細(xì)胞前向熒光強(qiáng)度、平均紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度和紅細(xì)胞熒光強(qiáng)度分布寬度。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第89頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三這種分類方法主要根據(jù)RBC形態(tài)的變化,將均一性的RBC歸為非腎性血尿;非均一性的RBC歸為腎性血尿,全自動(dòng)尿沉渣分析儀也具有此項(xiàng)功能,其規(guī)定:80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(Fsc)≥126ch;稱為均一性紅細(xì)胞;80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度(Fsc)≤84ch稱為非均一性紅細(xì)胞(變異性紅細(xì)胞);介于二者之間即為混合性紅細(xì)胞。
ch(channel):為檢測到的脈沖信號強(qiáng)度及寬度返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第90頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2.白細(xì)胞儀器分析
WBC在尿液的分布直徑大約為10um,約比RBC大,因此前向散射光強(qiáng)度也比RBC稍大一些,但WBC含有核而RBC無核,因此它有高強(qiáng)度的前向熒光,就能將RBC和WBC區(qū)別開來。當(dāng)WBC存活時(shí),會呈現(xiàn)前向散射光強(qiáng)和前向熒光弱;當(dāng)WBC損害或死亡時(shí),呈現(xiàn)前向散射光弱和前向熒光強(qiáng)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第91頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三利用尿液WBC激光散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度的技術(shù)識別WBC高活性和低活性的不同程度,來進(jìn)一步對急性感染和慢性感染,以及恢復(fù)期做出判斷。急性泌尿系感染W(wǎng)BC>60/ul,且白細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度強(qiáng)和熒光強(qiáng)度弱;慢性泌尿系感染W(wǎng)BC>10/ul,且白細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度弱和熒光強(qiáng)度強(qiáng)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第92頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三3.上皮細(xì)胞(EC)
由泌尿道的上皮細(xì)胞脫落而來,種類多,大小不等。上皮細(xì)胞胞體大,散射光強(qiáng),都含有細(xì)胞核、線粒體等,熒光也比較強(qiáng)。儀器除給出上皮細(xì)胞數(shù)量參數(shù)外,還標(biāo)出腎小管上皮細(xì)胞(SRC),并在第二個(gè)子幕上顯示出每微升細(xì)胞數(shù)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第93頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三小圓上皮細(xì)胞是指細(xì)胞大小與白細(xì)胞相似或略大,形態(tài)較圓的上皮細(xì)胞,它包括腎小管上皮細(xì)胞、中層和底層移行上皮細(xì)胞。由于這些細(xì)胞散射光、熒光及電阻的信號變化大,儀器不能完全區(qū)分出哪一類細(xì)胞,因此當(dāng)這類細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)儀器標(biāo)出未到達(dá)一定濃度時(shí),還需通過離心染色鏡檢得出準(zhǔn)確的結(jié)果。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第94頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三4.管型(CAST)
由于管型種類較多,且形態(tài)各不相同,儀器不能完全區(qū)分這些管型的性質(zhì);只能檢測出透明管型和標(biāo)出有病理管型的存在。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第95頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三透明管型由于不含有內(nèi)含物有極高的前向散射光脈沖寬度和微弱的熒光脈沖寬度出現(xiàn)在第二個(gè)散射圖的中下區(qū)域;而病理性管型,由于它們的體積與透明管型相等,但含有內(nèi)含物(如線粒體、細(xì)胞核等);所以有極高的前向散射光脈沖寬度和熒光脈沖寬度,出現(xiàn)在第二個(gè)散射圖的中上區(qū)域。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第96頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三借助于熒光脈沖寬度,即可區(qū)分出透明管型和病理管型,當(dāng)儀器標(biāo)明有病理性管型時(shí),由于儀器只能起過篩作用,不能完全判定就是病理管型,只有通過離心鏡檢才能確認(rèn)是哪一類管型。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第97頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三5.細(xì)菌(BACT)細(xì)菌由于體積小并含有DNA和RNA,所以前向散射光強(qiáng)度要比紅、白細(xì)胞弱,但熒光強(qiáng)度要比紅細(xì)胞強(qiáng),又比白細(xì)胞弱。因此,細(xì)菌分布在第1個(gè)散射圖紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間的下方區(qū)域。此儀器較好地解決了上述缺陷,能夠檢測出所有的細(xì)菌。細(xì)菌檢查臨床意義主要用于泌尿系細(xì)菌感染的診斷。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第98頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三6.其他的檢測全自動(dòng)尿沉渣分析儀除檢測上述五項(xiàng)參數(shù)外,還能標(biāo)記出酵母細(xì)胞(YLC)精子細(xì)胞(SPERM)結(jié)晶(X'TAL)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第99頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
酵母細(xì)胞(YLC)精子細(xì)胞(SPERM)類酵母細(xì)胞和精子細(xì)胞由于含有RNA和DNA,熒光強(qiáng)度很高,由于類酵母細(xì)胞的前向散射光脈沖寬度小于精子細(xì)胞的,因此,根椐前向散射光脈沖寬度,可將類酵母細(xì)胞和精子細(xì)胞區(qū)別開來。但在低濃度時(shí),精子細(xì)胞與酵母細(xì)胞區(qū)分有一定的難度;在高濃度時(shí),部分酵母細(xì)胞對紅細(xì)胞計(jì)數(shù)有交叉。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第100頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
結(jié)晶(X'TAL)結(jié)晶出現(xiàn)在散射圖紅細(xì)胞區(qū)域,由于結(jié)晶的多樣性,所以其散射光強(qiáng)度分布很寬,如草酸鹽在散射圖上分布接近FSC軸,尿酸鹽依靠自己的熒光分布區(qū)域和紅細(xì)胞重復(fù)在一起,因結(jié)晶的中心分布不穩(wěn)定,所以它和紅細(xì)胞能夠被區(qū)分開。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第101頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三當(dāng)尿酸鹽濃度增多時(shí),部分結(jié)晶會影響紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。因此,當(dāng)儀器對酵母細(xì)胞子、精子細(xì)胞和結(jié)晶有標(biāo)示時(shí),都應(yīng)離心鏡檢,才能真正的區(qū)分。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第102頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第103頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第104頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三7.導(dǎo)電率測定
概述導(dǎo)電率與滲透量有密切的關(guān)系:導(dǎo)電率代表溶液中溶質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)電荷,與質(zhì)點(diǎn)的種類、大小無關(guān);滲透量代表溶液中溶質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)(滲透活性粒子)數(shù)量,而與質(zhì)點(diǎn)的種類、大小及所帶的電荷無關(guān)。所以導(dǎo)電率與滲透量又有差異,如溶液中含有葡萄糖時(shí),由于葡萄糖是無機(jī)物,它沒有電荷,與導(dǎo)電無關(guān),但與滲量有關(guān)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第105頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三導(dǎo)電率測定臨床意義對糖尿病、尿崩癥的鑒別診斷、治療都具有十分重要的意義;通過對尿?qū)щ娐实母叩捅O(jiān)控,可以預(yù)防某些結(jié)石疾病的發(fā)生,有利于結(jié)石疾病的治療。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)(一)流式細(xì)胞術(shù)法尿沉渣分析儀第106頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三尿沉渣分析儀檢測評價(jià)
全自動(dòng)尿沉渣分析儀的優(yōu)點(diǎn)嶄新的流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)應(yīng)用于尿檢獨(dú)特的有形成份鑒別系統(tǒng)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第107頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三1.嶄新的流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)應(yīng)用于尿檢UF-100結(jié)合流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)與電阻抗測定對尿成份進(jìn)行直接鑒別及計(jì)數(shù),將染色的有形成份加壓使其通過鞘流室的小孔。用激光光束照射有形成份,光便產(chǎn)生散射,而尿液有形成份則發(fā)出熒光,然后對散射光、熒光及電阻抗的變化進(jìn)行測定和分析,使用這一已經(jīng)證實(shí)的流式細(xì)胞新技術(shù),是自動(dòng)化尿檢獲得了重大突破,即實(shí)現(xiàn)真正的無人檢驗(yàn)!返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第108頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2.獨(dú)特的有形成份鑒別系統(tǒng)將從每個(gè)粒子上所產(chǎn)生的散射光,熒光及電阻抗變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栠M(jìn)行分析,并將粒子分布制成簡明易懂的散射圖和直方圖。利用先進(jìn)的自適應(yīng)凝聚體分析系統(tǒng)(A.C.A.S)確定有形成份的類型,從而以自動(dòng)分析代替了主觀鑒別。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第109頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三3.全自動(dòng)尿沉渣分析儀的優(yōu)點(diǎn)1)可對血尿中紅細(xì)胞進(jìn)行定量計(jì)數(shù),同時(shí)對其形態(tài)進(jìn)行鑒別,有助于臨床分析泌尿系統(tǒng)出血部位。2)對尿中白細(xì)胞也可進(jìn)行定量計(jì)數(shù),可同NIT及細(xì)菌數(shù)結(jié)合分析,有助于尿路感染病人的診斷和療效監(jiān)控。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第110頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三3)儀器提供尿滲透壓的信息,對尿液狀態(tài)有更多了解。4)和尿化學(xué)分析一起使用,將更有利于臨床。5)可滿足大批尿液常規(guī)檢查單位的需要,減輕勞動(dòng)強(qiáng)度。 返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第111頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三紅細(xì)胞、白細(xì)胞參考值
由于尿液常規(guī)有形成分的檢查一般都使用顯微鏡檢查,該法操作要求高、費(fèi)時(shí)、重復(fù)性差,結(jié)果不宜臨床動(dòng)態(tài)觀察。干化學(xué)尿液分析儀的問世,雖然給尿液有形成分檢查帶來一些革新,但它給出的結(jié)果只是一個(gè)半定量的結(jié)果,只起過篩分析,也不宜于臨床動(dòng)態(tài)觀察。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第112頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三紅細(xì)胞、白細(xì)胞參考值的調(diào)查
全自動(dòng)尿沉渣分析儀的開發(fā)使用,較好地解決了尿沉渣檢查中存在的主要問題。目前國內(nèi)外雖有使用,但迄今未見健康人有關(guān)正常參考值的報(bào)道。叢玉隆等使用全自動(dòng)尿沉渣分析儀對400例健康人尿液紅、白細(xì)胞進(jìn)行測定。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第113頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三結(jié)果顯示紅、白細(xì)胞各年齡組之間無明顯差異男女性別之間有顯著性差異紅細(xì)胞:男性為0~12/ul,女性為0~24/ul白細(xì)胞:男性0~12/ul,女性0~26/ul返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第114頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三儀器的安裝、使用及保養(yǎng)儀器安裝儀器使用儀器維護(hù)及保養(yǎng)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第115頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三1.儀器安裝安裝條件:遠(yuǎn)離電磁干擾源、電源、防止陽光照射、防潮、通風(fēng)好、溫度10-30℃,濕度<80%;儀器兩側(cè)至少有0.5米空間,最好安裝在穩(wěn)定的水平實(shí)驗(yàn)臺上。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第116頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2.儀器使用儀器開機(jī)前,要對儀器進(jìn)行全面檢查;開機(jī)后,儀器先進(jìn)行自檢;儀器自檢后,進(jìn)行自動(dòng)沖洗并檢查本底;本底通過后,進(jìn)行儀器質(zhì)控檢查;質(zhì)控通過后,進(jìn)行樣品測試。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第117頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三3.儀器維護(hù)及保養(yǎng)儀器要有專人負(fù)責(zé),建立專用的儀器登記本;儀器必須嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行;儀器的保養(yǎng)必須按規(guī)程做:(1)每日保養(yǎng)(2)每月保養(yǎng)(3)每年保養(yǎng)返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)第118頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(二)影像式尿沉渣分析儀SEDTRON尿沉渣分析儀UD自動(dòng)染色尿沉渣分析儀返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第119頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三1.
SEDTRON尿沉渣分析儀分析原理檢測項(xiàng)目操作控制系統(tǒng)檢測方法返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第120頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(1)分析原理
該類儀器的分析原理與人工顯微鏡相似,其檢測主要靠兩個(gè)快速移動(dòng)的CCD攝像頭對樣品計(jì)數(shù)池掃描,兩個(gè)鏡頭的放大倍數(shù)分別為100和400倍,鏡頭所得影像數(shù)據(jù)化,取六個(gè)平均數(shù)據(jù),經(jīng)染色后,屏幕顯示尿沉渣有形成分,圖象可以貯存。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第121頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三細(xì)胞計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)示意圖
返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第122頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(2)檢測項(xiàng)目高倍視野:紅細(xì)胞(RBC),白細(xì)胞(WBC),小圓上皮細(xì)胞(SRC),酵母菌(YEA),細(xì)菌(BAT),結(jié)晶(CRY)。低倍視野:管型(PCAS),鱗狀上皮細(xì)胞(EPI),小圓上皮細(xì)胞(SRC),結(jié)晶(CRY)。返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第123頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(3)操作控制系統(tǒng)操作控制系統(tǒng)為電腦一體,面板操作鍵盤簡易,具有人機(jī)對話的菜單鍵。所有操作對話和掃描圖像可顯示在熒光屏上。返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第124頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(4)檢測方法取隨機(jī)新鮮尿液樣本10ml于離心管,使用1500r/min(相對離心力為400×g,有效離心半徑15cm)離心5min,棄去上清液,留取沉渣0.5ml。加入50μl染色液染色5min,搖勻,用微量移液管吸取尿沉渣注SEDTRON樣品板計(jì)數(shù)池(注意液體不要溢),便可用于檢測。返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第125頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2.UD自動(dòng)染色尿沉渣分析儀
UD自動(dòng)染色尿沉渣分析儀主要由:尿沉渣儀主機(jī)、流動(dòng)計(jì)數(shù)器、沉降器、溶液瓶(分別裝清洗液、強(qiáng)制清洗液、染色液、廢液)等組成。
返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第126頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第127頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
(1)工作原理
沉渣儀快速、自動(dòng)完成標(biāo)本和染色液的定量提取、混合染色一系列自動(dòng)程序,將混合、染色好后的分析標(biāo)本輸送至特制的光學(xué)流動(dòng)計(jì)數(shù)池中,通過顯微鏡攝像裝置,在顯示器屏幕上獲得清晰的彩色尿沉渣圖象,通過人工對尿沉渣中有形成分進(jìn)行定性分析、計(jì)數(shù),再由計(jì)算機(jī)以標(biāo)準(zhǔn)格式輸出尿常規(guī)分析的真彩色圖文報(bào)告。返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第128頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三(2)主要功能及特點(diǎn)1)儀器定量準(zhǔn)確2)自動(dòng)化3)自動(dòng)染色計(jì)數(shù)4)符合標(biāo)準(zhǔn)化要求5)安全潔凈6)智能控制7)功能齊備返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第129頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
(三)尿沉渣分析工作站返回本節(jié)目錄返回知識點(diǎn)二、尿沉渣分析儀分類第130頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)化構(gòu)成圖返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第131頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
尿液分析儀對尿樣進(jìn)行干化學(xué)分析,尿干化學(xué)分析的結(jié)果傳送到計(jì)算機(jī)中。再對離心后的尿沉渣用顯微鏡進(jìn)行檢查,顯微鏡的圖像傳送到計(jì)算機(jī)中,在屏幕上顯示出來。返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第132頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三
只要識別出尿沉渣成份,輸入相應(yīng)的數(shù)目,標(biāo)準(zhǔn)單位下的結(jié)果就會自動(dòng)換算出來。返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第133頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三尿沉渣工作站的特點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)定量1)玻璃流動(dòng)計(jì)數(shù)池的尺寸是恒定的0.178mm0.127mm返回本節(jié)目錄二、尿沉渣分析儀分類返回知識點(diǎn)第134頁,講稿共148頁,2023年5月2日,星期三2)每個(gè)刻度對應(yīng)的容積是恒定的
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