![實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定_第1頁](http://file4.renrendoc.com/view/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab1.gif)
![實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定_第2頁](http://file4.renrendoc.com/view/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab2.gif)
![實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定_第3頁](http://file4.renrendoc.com/view/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab3.gif)
![實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定_第4頁](http://file4.renrendoc.com/view/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab4.gif)
![實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定_第5頁](http://file4.renrendoc.com/view/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab/dcc0ec1a1a2c8599f57bc75e0d4bf4ab5.gif)
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關(guān)于實驗五血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定第1頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三一、實驗?zāi)康恼莆昭灞彼岚被D(zhuǎn)移酶活性測定的基本原理。了解血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的測定方法及臨床意義。第2頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三510nm光吸收法測定相對血清ALT活力二、實驗原理丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)催化丙氨酸與α-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反應(yīng)形成相應(yīng)的2,4-二硝基苯腙,呈黃色,后者在堿性條件下呈紅棕色。(1)丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT
(2)丙酮酸+2,4-二硝基苯肼丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黃色)丙酮酸2,4-二硝基苯肼(3)苯腙硝醌化合物NaOH(黃色)(紅棕色)第3頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三三、實驗器材材料:人血清試劑:谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定試劑盒用具:分光光度計,微量移液槍,試管,試管架,恒溫水浴鍋第4頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三(1)取3支試管,按下表加入試劑:試劑試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管基質(zhì)液(uL)200200200標(biāo)準(zhǔn)液(uL)–50.0–血清樣品(uL)––50.0蒸餾水(uL)50.0––混合37℃水浴放置30min顯色劑(uL)20020020037℃水浴放置20min稀釋NaOH(uL)200020002000四、實驗步驟冷卻至室溫后,510nm處比色比色方法:以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管及樣品管光密度值。第5頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三(2)計算:依據(jù)朗伯-比爾定律:A=KLC標(biāo)準(zhǔn)管谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力:57U/L
樣品管谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力(U/L)=樣品管光密度值
標(biāo)準(zhǔn)管光密度值×57U樣=A樣A標(biāo)×U標(biāo)第6頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三參考值谷丙轉(zhuǎn)氨酶血清參考值:0~50U/L
第7頁,講稿共9頁,2023年5月2日,星期三正確使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液應(yīng)占比色皿的2/3。每次測定時都需用試劑空白溶液調(diào)零,不能用蒸餾水代替微量移液槍的正確使用注
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