止瀉退熱分散片主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究

止瀉退熱分散片主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的對(duì)止瀉退熱分散片進(jìn)行主要藥效學(xué)研究，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)該藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法通過(guò)止瀉實(shí)驗(yàn)，腸功能實(shí)驗(yàn)，解熱實(shí)驗(yàn)考察止瀉退熱分散片的藥理作用。結(jié)果止瀉退熱分散片高、中、低劑量都能夠降低腹瀉小鼠的腹瀉指數(shù)；能夠減少小鼠小腸推進(jìn)功能，能夠?qū)剐滤沟拿魉滦∈笮∧c推進(jìn)功能的亢進(jìn)；能夠降低發(fā)熱大鼠的體溫。結(jié)論止瀉退熱分散片具有止瀉、抑制腸蠕動(dòng)、解熱作用。

【關(guān)鍵詞】止瀉退熱分散片藥效

止瀉退熱分散片是本實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的中藥新藥，主要藥物是黃芩、黃連。本實(shí)驗(yàn)的研究目的是考察該新藥的主要藥理作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。

1器材1藥物止瀉退熱分散片由南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院中藥新藥實(shí)驗(yàn)室提供。復(fù)方地芬諾酯，注射用活性碳(杭州木材廠)，羧甲基纖維素，啤酒酵母，甲硫酸新斯的明注射液。2動(dòng)物SPF級(jí)昆明小鼠18～22g，雌雄各半，動(dòng)物合格證號(hào)0016555；Wistar大鼠，體重(150±10)g，雌，動(dòng)物合格證號(hào)0019732，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)環(huán)境為南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。環(huán)境溫度(22±2)℃，相對(duì)濕度70%。動(dòng)物購(gòu)進(jìn)后適應(yīng)環(huán)境3d。3儀器與材料燒杯，雙腳規(guī)，直尺，濾紙，眼科剪，彎嘴鑷，體溫計(jì)，無(wú)菌操作臺(tái)；HIRAYAMAHVE-50高溫消毒柜；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，湖北省黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司；CIRRUSMODELCR-70恒溫振蕩器。4方法止瀉實(shí)驗(yàn)昆明小鼠18～22g，雌雄各半，禁食不禁水12h，隨機(jī)分組：模型對(duì)照組、復(fù)方地芬諾酯組、止瀉退熱分散片高、中、低組。各組灌蓖麻油ml/10g，h后給藥［1］，將動(dòng)物置于墊有濾紙的燒杯下。觀察并統(tǒng)計(jì)小鼠的便數(shù)、稀便數(shù)，按照周氏法［2］確定稀便級(jí)，表示稀便的程度。每只動(dòng)物的稀便率=稀便數(shù)/總便數(shù)×100%。腹瀉指數(shù)=稀便率×稀便級(jí)。每1h換1次濾紙，連續(xù)觀察4h。

級(jí)數(shù)1234污跡直徑＜1cm1～cm2～3cm3cm

干便與稀便的區(qū)分以濾紙上有無(wú)污跡為標(biāo)準(zhǔn)。級(jí)數(shù)直徑的測(cè)量:圓形測(cè)直徑，橢圓形或不規(guī)則形測(cè)最長(zhǎng)和近似圓的直徑。二者取平均數(shù)。統(tǒng)計(jì)時(shí)先逐個(gè)統(tǒng)計(jì)每一堆稀便的級(jí)數(shù),然后將該鼠所有稀便級(jí)數(shù)相加除以稀便數(shù)得到稀便的平均級(jí)數(shù),簡(jiǎn)稱稀便級(jí)。稀便次數(shù)以每一?；蛎恳欢?不能分清粒數(shù)者)為1次。腸功能實(shí)驗(yàn)對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)功能影響實(shí)驗(yàn)［3,4］：昆明小鼠18～22g，雌雄各半。動(dòng)物禁食不禁水12h，然后隨機(jī)分正常組、復(fù)方地芬諾酯組、止瀉退熱分散片高、中、低劑量組，灌胃給藥，給藥后1h每鼠灌胃4%活性碳羧甲基纖維素溶液/只［5］。20min后脫頸椎處死，開(kāi)腹分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，測(cè)量總長(zhǎng)度，將幽門至活性碳前沿的距離作為其在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照活性碳推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度×100%，計(jì)算推進(jìn)率。

對(duì)新斯的明造成小鼠小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)的影響實(shí)驗(yàn)［3,4,6］：昆明小鼠18～22g，雌雄各半。動(dòng)物禁食不禁水12h，然后隨機(jī)分正常組、模型組、復(fù)方地芬諾酯組，止瀉退熱分散片高、中、低劑量組，灌胃給予藥物。除正常對(duì)照組外，其余各組每只皮下注射甲硫酸新斯的明mg/kg，正常對(duì)照組皮下注射同體積生理鹽水，15min后，每只動(dòng)物灌胃4%活性碳羧甲基纖維素溶液ml/只,20min后脫頸椎處死，開(kāi)腹分離腸系膜。剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將腸管拉直，測(cè)量總長(zhǎng)度，將幽門至活性碳前沿的距離作為其在小腸內(nèi)推進(jìn)距離，按照活性碳推進(jìn)率=小腸推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度×100%，計(jì)算推進(jìn)率。解熱實(shí)驗(yàn)［7］Wistar大鼠，體重150g，雌性。將體溫溫度計(jì)插入大鼠直腸，深度為2cm，記錄為實(shí)驗(yàn)前直腸溫度。在大鼠頸部以下的背部皮下注射啤酒酵母懸液10ml/kg，引起動(dòng)物發(fā)熱。按摩注射部位以使懸浮液在皮膚下擴(kuò)散。室溫保持在22～24℃，注射酵母后立即禁食。18h后記錄直腸溫度。30min后再次測(cè)量，體溫達(dá)不到38℃的大鼠不能用于實(shí)驗(yàn)。合格的動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、安乃近組、止瀉退熱分散片高、中、低劑量組。同時(shí)設(shè)置正常對(duì)照組，然后灌胃給藥，給藥后60，120，180，240min后再次測(cè)定并記錄直腸溫度。

2結(jié)果

止瀉實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用統(tǒng)計(jì)軟件中重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)兩因素多水平的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。從表1中可以看出，給藥后1～4h以內(nèi)，止瀉退熱分散片高、中、低劑量以及陽(yáng)性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制動(dòng)物的腹瀉指數(shù)，與模型組相比差異有顯著性意義。同時(shí)還可以看出所有動(dòng)物的腹瀉指數(shù)隨著時(shí)間的推遲都呈現(xiàn)減少的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)閯?dòng)物在經(jīng)過(guò)12h的禁食之后，排便量高峰期主要在造模后2h以內(nèi)，隨后排便的次數(shù)和數(shù)量都減少了。表1小鼠止瀉實(shí)驗(yàn)

小腸推進(jìn)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用軟件按照Onewayanovo方法統(tǒng)計(jì)，分析不同組間小鼠活性碳推進(jìn)率的差異。結(jié)果見(jiàn)表2～3。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明止瀉退熱分散片高、中、低劑量以及陽(yáng)性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制正常小鼠的小腸推進(jìn)率。新斯的明能夠增強(qiáng)小鼠小腸的推進(jìn)率，與正常組相比差異有顯著性意義，說(shuō)明造模成功。同時(shí)止瀉退熱分散片高、中、低劑量與陽(yáng)性藥物復(fù)方地芬諾酯能夠抑制推進(jìn)功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)率，即具有減慢腸蠕動(dòng)的作用。表2對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)率的影響表3對(duì)新斯的明致小鼠推進(jìn)機(jī)能亢進(jìn)的推進(jìn)率影響

解熱實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用軟件，按照重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)的兩因素多水平統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行分析，比較正常動(dòng)物、模型動(dòng)物、陽(yáng)性對(duì)照動(dòng)物及受試藥物組之間的差異。結(jié)果見(jiàn)表4。表4大鼠解熱實(shí)驗(yàn)

從表4可以看出給藥后，發(fā)熱大鼠體溫出現(xiàn)下降，安乃近組在給藥后1h動(dòng)物體溫就顯著下降，與模型組相比。止瀉退熱分散片高、中劑量組動(dòng)物體溫也下降，與模型組相比，差異有顯著性意義。在給藥后2h，止瀉退熱分散片低劑量組動(dòng)物體溫下降，與模型組相比差異有顯著性意義。在給藥3，4h后，安乃近組與止瀉退熱分散片的3個(gè)劑量組的動(dòng)物體溫仍下降，與模型組相比，差異有顯著性意義?？梢钥闯?，止瀉退熱分散片高中低劑量都有顯著的解熱作用。

3討論

止瀉退熱分散片是主要用于治療感染性腹瀉的中藥新藥制劑。感染性腹瀉從病因?qū)W角度可以分為細(xì)菌性和病毒性腹瀉兩種。臨床表現(xiàn)主要以嘔吐、腹瀉等消化道癥狀為主。細(xì)菌性感染還會(huì)引發(fā)高熱等癥狀。本研究的目的是評(píng)價(jià)止瀉退熱分散片的止瀉與解熱作用，從而為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。關(guān)于該藥物的抑菌作用研究結(jié)果另外發(fā)表。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表明該止瀉退熱分散片能夠減緩正常小鼠和新斯的明造成小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)小鼠的小腸蠕動(dòng)，降低蓖麻油所致腹瀉小鼠的腹瀉指數(shù)，能夠降低啤酒酵母造成的發(fā)熱大鼠的體溫，具有較好的解熱功效。本實(shí)驗(yàn)研究表明該藥物藥理作用確切,具有良好的開(kāi)發(fā)價(jià)值。

【參考文獻(xiàn)】

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