末梢血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

關(guān)于末梢血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查第1頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三血細(xì)胞涂片自身的特點(diǎn)：

1

．涂片不易均勻：由于血液是混懸液，其中白細(xì)胞、有核細(xì)胞、

RBC

、血小板的形態(tài)大小、比重及生物活性和血漿成分等的不同和制片技術(shù)差異、質(zhì)量分布不均勻性差異頗大。

2

．細(xì)胞分布和檢查的非隨機(jī)性：

(1)

細(xì)胞分類標(biāo)準(zhǔn)與觀念不一；

(2)

采樣和計(jì)數(shù)

100~200

個(gè)白細(xì)胞的局限性；

(3)

細(xì)胞分布的生理變動(dòng)；

3.

與疾病的相關(guān)性；

4.

室內(nèi)、室間分類不一致性，開(kāi)展室間質(zhì)控也是促進(jìn)形態(tài)學(xué)提高重要手段第2頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三外周血涂片檢查及報(bào)告內(nèi)容：

1.WBC

數(shù)及主要成分（即分類比例）；

2.

分類細(xì)胞比例及形態(tài)是否正常；

3.

有無(wú)幼稚白細(xì)胞、幼紅細(xì)胞及異常細(xì)胞情況；

4.

成熟紅細(xì)胞形態(tài)（包括個(gè)體與群體、大小形態(tài)、異形）、色素狀態(tài)（中心淡染、低色素、高色素、多嗜性

RBC

）核殘余物及排列等情況；

5.

血小板數(shù)量、形態(tài)、聚集性；

6.

異常細(xì)胞、寄生蟲。

第3頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三1.確診白血病。2.貧血鑒別診斷的參考依據(jù)。3.了解疾病感染的程度。4.遺傳性疾病的血液依據(jù)。5.提示血小板疾病。6.診斷血液寄生蟲病7.血液分析儀質(zhì)量的監(jiān)控。形態(tài)學(xué)檢查的重要意義第4頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三染色：是識(shí)別細(xì)胞形態(tài)的重要標(biāo)記工序：

常規(guī)瑞氏

-

姬姆薩染色要點(diǎn)：

1

．要得到滿意、漂亮的血細(xì)胞染色標(biāo)本，新鮮涂片迅速染色是很重要的。

2

．染色液配制要合格；

3

．涂片切勿用甲醛固定（肝素抗凝），否則不著色；

4

．染色的好壞與染色液、緩沖液的質(zhì)量及比例、加液間隔時(shí)間、保持

玻

片染色液面的張力等染色技巧均有重大關(guān)系。染液要覆蓋涂膜面，再加緩沖液（

1:2

），其量要充足、混均，染色時(shí)間要

充足。第5頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三

一、白細(xì)胞檢查意義1.機(jī)體被感染的病因及感染程度。2.血液系統(tǒng)惡性疾病的診斷核療效評(píng)估。3.某些遺傳性疾病的診斷。如梅-罕氏綜合征二、紅細(xì)胞檢查的意義貧血的鑒別診斷為某些疾病診斷提供依據(jù)。如MM、DIC、骨纖等為瘧疾診斷提供重要依據(jù)。三、血小板檢查意義血小板疾病的診斷。驗(yàn)證血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確程度第6頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三

WBC

形態(tài)學(xué)診斷技巧：

1

．

WBC

數(shù)值準(zhǔn)確性估計(jì)：

（

1

）目前自動(dòng)化計(jì)數(shù)儀時(shí)有出現(xiàn)結(jié)果的偏差，低倍鏡觀察血涂片可以粗略估

WBC

數(shù)值及分布。低倍視野

WBC

數(shù)：正常

3~5

個(gè)，增多

6

個(gè)以上，減低

3

個(gè)以下。

（

2

）

WBC

如推至片尾，分布不均，估計(jì)將有一定難度。較大的細(xì)胞如單核、異淋及中性粒細(xì)胞及不成熟細(xì)胞多在片尾，體部則多為較小的淋巴細(xì)胞，使分類造成偏差，所以分類部位在適當(dāng)調(diào)整。第7頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三2

．

白細(xì)胞計(jì)數(shù)值限度分級(jí)：

（

1

）

WBC

正常范圍：

4.0~10.0

×

10

9

/L;

（

2

）

WBC

正常限度以下

:

●

輕度減少

(<4.0

～

3.0

×

10

9

/L),

●

中度減少

(<3.0

～

2.0

×

10

9

/L),

●

極度減少

(<2.0

×

10

9

/L);

（

3

）

WBC

正常高限度以上

:

●

分輕度增多

(>10.0

～

20.0

×

10

9

/L),

●

中度增多

(>20.0

～

40.0

×

10

9

/L),

●

明顯增多

(>40.0

～

80.0

×

10

9

/L)

●

極度增多

(>80.0

×

10

9

/L)

。

以此與所測(cè)知

WBC

計(jì)數(shù)值作粗略對(duì)比，推斷

WBC

計(jì)數(shù)值的準(zhǔn)確性。有核紅細(xì)胞單獨(dú)計(jì)數(shù)：有核紅細(xì)胞

個(gè)

/100

個(gè)

WBC

第8頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三

RBC

形態(tài)學(xué)在檢驗(yàn)中易被忽視，

觀察

RBC

形態(tài)

,

一般

以外周

血涂片較為可靠。

RBC

形態(tài)與排列（如重疊、

緡

錢狀）與涂片技術(shù)、涂片部位及厚薄有很大關(guān)系。這點(diǎn)在鏡檢時(shí)應(yīng)予注意。即是合格涂片，

RBC

形態(tài)依然與涂片部位及厚薄等多種因素有關(guān)：

—如取涂片中心區(qū)域，

RBC

中心淡染，多

>1/3

細(xì)胞面積大小

;

—取自涂片薄處或尾部，

RBC

形態(tài)誤給人以“球形”，失去雙

凹

盤形，中心淡染消失，所謂類球形改變；

—取厚片

或制片干燥過(guò)慢，

RBC

未攤開(kāi)，收縮變形，甚至出現(xiàn)人工中心染色過(guò)淡等；

—取厚片

RBC

則重疊堆積，呈假“緡錢狀”，不便查清形態(tài)；

—

玻

片不清潔，油脂過(guò)多或骨髓脂肪過(guò)多，制片干燥不快，

RBC

則會(huì)形成人工的中心淡染區(qū)或空白區(qū)。

第9頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三外周血血小板形態(tài)學(xué)診斷技巧：

1

．血小板數(shù)

:

形態(tài)及聚集性

,

血涂片也是估計(jì)

Plt

計(jì)數(shù)主要依據(jù)。根據(jù)

RBC

正常500

萬(wàn)

/ul:Plt

正常值

10

～

20

萬(wàn)

/ul=RBC:Plt=50:1(2)

個(gè)

，

一個(gè)油鏡視野

RBC

數(shù)約

RBC200

個(gè)：

PLT4

～

8

個(gè)，計(jì)數(shù)

10

～

20

個(gè)油鏡視野

Plt

數(shù)（分別計(jì)數(shù)正常和巨大異常

Plt

數(shù)）平均

每個(gè)油鏡視野

Plt

數(shù)如若

4

個(gè)相當(dāng)于

10

萬(wàn)

/ul

；

8

個(gè)相當(dāng)

20

萬(wàn)

/ul;2

個(gè)相當(dāng)

5

萬(wàn)

/ul;1

個(gè)

相當(dāng)

2.5

萬(wàn)

/

ul

。由于巨大和異常的

PLT

自動(dòng)化的儀器不能計(jì)數(shù)，造成誤差。

第10頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三

(

一

)

：外周血涂片檢查步驟：

1

．肉眼觀察：涂片面膜大小、厚薄是否適中，染色好壞。

2

．低倍鏡觀察全貌：

（

1

）涂片及染色是否合適；

（

2

）了解白細(xì)胞數(shù)（可大體校對(duì)

WBC

直接計(jì)數(shù)是否正確）；

（

3

）了解白細(xì)胞大致分布及其各階段大致比例，特別要注意由于涂片過(guò)力，把

WBC

及成熟粒細(xì)胞大多推于片尾部位，造成分類比值誤差。片尾有無(wú)異常細(xì)胞。（

4

）選擇具有代表性的細(xì)胞鏡檢區(qū)域。

第11頁(yè)，講稿共13頁(yè)，2023年5月2日，星期三3

．

油鏡觀察

：進(jìn)行

WBC

分類計(jì)數(shù)，觀察細(xì)胞形態(tài)、比例、有無(wú)巨大或異常細(xì)胞。

（

1

）血涂片對(duì)

WBC

總數(shù)準(zhǔn)確性估計(jì)：從低倍及油鏡中估計(jì)

WBC

數(shù)及其

分布。一般區(qū)分

WBC

數(shù)幾個(gè)等級(jí)（

油鏡視野

中

WBC

密度、分散無(wú)重疊）。參見(jiàn)

WBC

形態(tài)診斷技巧節(jié)段。

（

2

）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：血中主要兩大比例的中性成熟粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞及其他小比例細(xì)胞是否屬正常范圍及形態(tài)有無(wú)異常。

（

3

）注意片尾端有無(wú)巨大或出現(xiàn)不成熟或異常細(xì)胞（