第十章 微生物應(yīng)用技術(shù)

第十章微生物應(yīng)用技術(shù)第一節(jié)微生物發(fā)酵概論第二節(jié)工業(yè)發(fā)酵的工藝流程第三節(jié)工業(yè)發(fā)酵的主要產(chǎn)品第四節(jié)微生物與環(huán)境保護(hù)發(fā)酵工程是一門具有悠久歷史，又融合了現(xiàn)代科學(xué)的技術(shù)，是現(xiàn)代生物技術(shù)的組成部分。本章主要介紹發(fā)酵工程的基本內(nèi)容和基本原理，重點(diǎn)介紹了工業(yè)發(fā)酵的工藝流程,還介紹了典型產(chǎn)品的發(fā)酵生產(chǎn)工藝，如青霉素，谷氨酸和維生素C的生產(chǎn)。第一節(jié)微生物發(fā)酵概論1857年巴斯德提出著名發(fā)酵理論：“一切發(fā)酵過(guò)程都是微生物作用的結(jié)果?！?929年Flemming爵士發(fā)現(xiàn)了青霉素，增加一大類新產(chǎn)品-抗生素。20世紀(jì)40年代，以獲取細(xì)菌的次生代謝產(chǎn)物-抗生素為主要特征的抗生素工業(yè)成為微生物發(fā)酵工業(yè)技術(shù)的支柱產(chǎn)業(yè)。20世紀(jì)50年代，氨基酸發(fā)酵工業(yè)又成為微生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的又一個(gè)成員，實(shí)現(xiàn)了對(duì)微生物的代謝進(jìn)行人工調(diào)節(jié)，這又使微生物技術(shù)進(jìn)了一步。20世紀(jì)60年代，微生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)又增加了酶制劑工業(yè)這一成員。20世紀(jì)70年代，為了解決由于人迅速增長(zhǎng)而帶來(lái)的糧食短缺問(wèn)題，進(jìn)行了非碳水化合物代替碳水化合物的發(fā)酵，如利用石油化工原料進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)，培養(yǎng)單細(xì)胞蛋白，進(jìn)行污水處理，能源開發(fā)等。80年代以來(lái)，隨著重組DNA技術(shù)的發(fā)展，可以按人類社會(huì)的需要，定向培養(yǎng)出有用的菌株，這為微生物發(fā)酵技術(shù)引入了遺傳工程的技術(shù)，使微生物技術(shù)進(jìn)入了一個(gè)新的階段。目前，人們把利用微生物在有氧或無(wú)氧狀態(tài)下生命活動(dòng)來(lái)制備微生物菌體或其它代謝產(chǎn)物的過(guò)程統(tǒng)稱為發(fā)酵。一、微生物發(fā)酵的概念及發(fā)展史1.微生物菌體發(fā)酵

是以獲得具有某種用途的菌體為目的的發(fā)酵。用于面包制作的酵母發(fā)酵及用于人類或動(dòng)物食品的微生物菌體蛋白發(fā)酵是比較傳統(tǒng)的菌體發(fā)酵工業(yè)。新的菌體發(fā)酵可用來(lái)生產(chǎn)藥用真菌，如香菇菌、依賴蟲蛹而生存的冬蟲夏草菌、與天麻共存的密環(huán)菌等藥用菌。2.微生物酶發(fā)酵

酶普遍存在于動(dòng)物、植物和微生物中。因?yàn)槲⑸锓N類多、產(chǎn)酶的品種多、生產(chǎn)容易和成本低等特點(diǎn)，所以目前工業(yè)應(yīng)用的酶大多來(lái)自微生物發(fā)酵。3.微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵

微生物代謝產(chǎn)物很多。在菌體對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期所產(chǎn)生的產(chǎn)物，如氨基酸、核苷酸、蛋白質(zhì)和糖類等是菌體生長(zhǎng)繁殖所必需的，這些產(chǎn)物叫做初級(jí)代謝產(chǎn)物。在菌體生長(zhǎng)靜止期，某些菌體能合成一些具有特定功能的產(chǎn)物，如抗生素、生物堿、植物生長(zhǎng)因子等。這些產(chǎn)物與菌體生長(zhǎng)繁殖無(wú)明顯關(guān)系，叫做次級(jí)代謝產(chǎn)物。

二、微生物發(fā)酵的類型4.微生物的轉(zhuǎn)化發(fā)酵

微生物的轉(zhuǎn)化是利用微生物細(xì)胞的一種或多種酶，把一種化合物轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)相關(guān)的更有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的產(chǎn)物。可進(jìn)行的轉(zhuǎn)化反應(yīng)包括：脫氫反應(yīng)、氧化反應(yīng)、脫水反應(yīng)、縮合反應(yīng)、氨化反應(yīng)、脫氨反應(yīng)等。

5.生物工程細(xì)胞的發(fā)酵

是指利用生物工程技術(shù)所獲得的細(xì)胞，如DNA重組的“工程菌”，細(xì)胞融合所得的“雜交”細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng)的新型發(fā)酵。此類發(fā)酵的產(chǎn)物多種多樣，如用基因工程菌生產(chǎn)胰島素、干擾素等。優(yōu)良的微生物菌種是發(fā)酵工業(yè)的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，微生物資源非常豐富，廣泛分布于土壤、水和空氣中，尤以土壤中為最多1.從微生物分類學(xué)的角度把所需菌種分為：細(xì)菌類如短桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌、梭狀芽孢桿菌等；酵母菌如啤酒酵母、酒精酵母、漢遜酵母和假絲酵母等；霉菌如黃曲霉、紅曲霉、青霉菌和赤霉菌等；放線菌如各種抗生素，鏈、慶大等。2.作為工業(yè)微生物發(fā)酵使用的菌種，通常有以下特點(diǎn)：(1)具有穩(wěn)定的遺傳學(xué)特性。(2)微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成對(duì)于基質(zhì)沒有嚴(yán)格的要求。(3)生長(zhǎng)條件易于滿足。(4)具有較高的各種酶活力。（5）對(duì)于包含體，要求在細(xì)胞破碎是不易破碎，而在目的產(chǎn)物的分離提出時(shí)，則易破碎。三、微生物發(fā)酵工業(yè)所用菌種1.微生物發(fā)酵過(guò)程是一個(gè)典型的化工過(guò)程。2.微生物發(fā)酵過(guò)程是一個(gè)典型的代謝控制發(fā)酵。3.微生物發(fā)酵工業(yè)又是一個(gè)有別于化工過(guò)程的一個(gè)工業(yè)。微生物發(fā)酵主要有以下幾個(gè)特征：（1）反應(yīng)條件溫和。通常由于微生物的生理特性，要求溫度為30℃～40℃、pH值中性偏酸性如酵母、霉菌、放線菌的發(fā)酵和pH值中性偏堿性如細(xì)菌的發(fā)酵。（2）無(wú)菌發(fā)酵，整個(gè)反應(yīng)過(guò)程要求無(wú)菌。培養(yǎng)基無(wú)菌、空氣無(wú)菌、補(bǔ)料和取樣要求無(wú)菌操作、某些工程菌，其尾氣也要求進(jìn)行無(wú)菌處理。（3）非連續(xù)性生產(chǎn)。微生物的生理特性決定了發(fā)酵過(guò)程的非連續(xù)性，大部分的工業(yè)發(fā)酵是以間歇操作為基礎(chǔ)進(jìn)行的，目前可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)的是啤酒的連續(xù)化生產(chǎn)。四、微生物發(fā)酵的基本特征第二節(jié)工業(yè)發(fā)酵的工藝流程

生物發(fā)酵工藝多種多樣，但基本上包括菌種的選育、菌種培養(yǎng)基的配制、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程下游處理即分離提純等幾個(gè)過(guò)程。找到合適的菌種是發(fā)酵工程的前提。人們最初是從自然界尋找所需要的菌種，如谷氨酸發(fā)酵時(shí)常用菌有谷氨酸棒狀桿菌等。但這種方法得到的菌種，產(chǎn)量一般都比較低。20世紀(jì)40年代，微生物學(xué)家開始用紫外線、激光、化學(xué)誘變劑等處理菌種，使菌種產(chǎn)生突變，以篩選出符合要求的優(yōu)良菌種。隨著細(xì)胞工程、基因工程等技術(shù)的日益成熟，科學(xué)家開始構(gòu)建工程細(xì)胞或工程菌，用它們進(jìn)行發(fā)酵，甚至能生產(chǎn)出一般微生物所不能生產(chǎn)的產(chǎn)品。

一、菌種的選育在大規(guī)模的發(fā)酵生產(chǎn)中，需要將選育出的優(yōu)良菌種經(jīng)過(guò)多次擴(kuò)大培養(yǎng)，讓它們達(dá)到一定數(shù)量以后，再進(jìn)行接種。二、菌種培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基是選擇出的菌種生活的環(huán)境，對(duì)菌種有多方面的影響，所以至關(guān)重要。一般來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)基的配方要經(jīng)過(guò)反復(fù)的實(shí)驗(yàn)才能確定。另外，發(fā)酵工程中所用的菌種多要求是純培養(yǎng)的，即整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不能混有雜菌，否則將導(dǎo)致產(chǎn)量大大下降，甚至得不到產(chǎn)品。例如，如果青霉素生產(chǎn)過(guò)程中污染了雜菌，這些雜菌會(huì)分泌青霉素酶，將形成的青霉素分解掉。因此，培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌。三、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種發(fā)酵過(guò)過(guò)程喇一般吐是在司發(fā)酵山罐內(nèi)志進(jìn)行驢的，務(wù)發(fā)酵步罐是泳一種炸圓柱管形的寫容器焦，容鐮量從靜幾升號(hào)到幾蛇百萬(wàn)搬升，細(xì)罐上為除有抹通氣塊、攪陳拌、廟接種現(xiàn)、加呢料、桐冷卻勇等裝骨置外豬，還畜有對(duì)蛇溫度沖、pH、通五氣量小與轉(zhuǎn)膝速等冰發(fā)酵看條件慨進(jìn)行砍檢測(cè)傍和控練制的監(jiān)裝置除。發(fā)酵懇過(guò)程銀中環(huán)貴境條答件的略變化領(lǐng)，不掠僅會(huì)堅(jiān)影響輛菌種宋的生幕長(zhǎng)繁藥殖，倦而且爬會(huì)影兄響菌攀種代犧謝產(chǎn)纖物的罪形成盈。為袋了使京發(fā)酵席過(guò)程海能順臟利進(jìn)溫行，誤要隨午時(shí)取蘭樣，躺檢測(cè)欲培養(yǎng)固液中臂的細(xì)檢菌數(shù)罩目、員產(chǎn)物醫(yī)濃度怪，同側(cè)時(shí)還竄要及洗時(shí)為針發(fā)酵塘菌提名供必桃需的滴營(yíng)養(yǎng)屋，并仆嚴(yán)格心控制京溫度希、pH、溶窯氧、竿通氣栗量與陶轉(zhuǎn)速談等發(fā)練酵條仆件。四、宵發(fā)酵僵過(guò)程發(fā)酵璃結(jié)束辮后，址要對(duì)教發(fā)酵葉液或勵(lì)生物典細(xì)胞老進(jìn)行找分離煩和提怒取精完制，汁將發(fā)佩酵產(chǎn)全物制袋成合制乎要攔求的績(jī)產(chǎn)品越。對(duì)棄發(fā)酵籮產(chǎn)品唱的要碧求不易同，性分離籌提純?cè)醯姆綄懛ㄒ矀鄳?yīng)瓦有些永區(qū)別接。利束用發(fā)該酵工服程生籮產(chǎn)的袍產(chǎn)品枕有菌值種代脂謝產(chǎn)令物和巷菌種表本身紀(jì)（如森酵母類菌和奴細(xì)菌本）兩灑大類細(xì)，如恢果產(chǎn)暑品是腰菌種故，分避離方應(yīng)法一阿般是其通過(guò)袖過(guò)濾些、沉碑淀從已培養(yǎng)頓液中債分離挖出；喚如果碰產(chǎn)品題是代葬謝產(chǎn)雄物，戚則采霞用蒸嚇餾、邁萃取宇、離思子交廟換等懸方法損提取毀。分?jǐn)囯x提隸純后逝的產(chǎn)池品，復(fù)還要青經(jīng)過(guò)暑質(zhì)量朝檢查玻合格司后，艙才能或成為展正式坐產(chǎn)品續(xù)。五、霸分離牙提純工藝責(zé)流程第三顯節(jié)框工務(wù)業(yè)發(fā)找酵的惱主要泄產(chǎn)品一、腹抗生張素發(fā)旺酵生預(yù)產(chǎn)抗生狹素是摟生物繡體在僅生命庸活動(dòng)有中產(chǎn)財(cái)生的堅(jiān)一種門次級(jí)頃代謝伙產(chǎn)物蜻。這材類有今機(jī)物咽質(zhì)能送在低采濃度晉下抑冶制或漁殺滅染活細(xì)許胞，珍這種略作用課又有途很強(qiáng)輔的選督擇性績(jī)?？贡旧鼐е饕梦⒄仙镨b發(fā)酵弦法生姻產(chǎn)，蟲少數(shù)按抗生乓素也傘可用立化學(xué)封方法板合成息，人催們還黎對(duì)天志然得略到的唯抗牛伍素進(jìn)殲行生奮化或良化學(xué)騎改造釘，使抽其具或有更潮優(yōu)越佩的性司能，組這樣命得到螞的抗嫩生素晝叫半起合成衛(wèi)抗生咐素，臭其數(shù)鍛目已斧達(dá)到辣兩萬(wàn)孤多種奴?？剐呱靥幉粌H鼓廣泛程用于街臨床啦醫(yī)療淺，而鐮且已價(jià)經(jīng)用啊于農(nóng)糞業(yè)、榮畜牧尾及環(huán)同保等俱領(lǐng)域穴。青霉據(jù)素是誕最早杰發(fā)現(xiàn)局并用體于臨儀床的—種抗疏生素菌，19集28年為殖英國(guó)科人A稻.攜Fl張em揪in叉g發(fā)現(xiàn)都，40年代慨投入火工業(yè)芹生產(chǎn)習(xí)。在故二戰(zhàn)饅期間辱立刻鄉(xiāng)豐大顯浙身手玻，它顫能有嫩效控莖制傷通口的胸細(xì)菌續(xù)感染多，挽墾救了君數(shù)百裳萬(wàn)戰(zhàn)貪爭(zhēng)中丘受傷含者的竭性命態(tài)。我話們就郵以青造霉素捧為例錄簡(jiǎn)單盒介紹窄抗生煮素的間發(fā)酵獨(dú)生產(chǎn)胖過(guò)程杠。(一)青霉岡素發(fā)垮酵生瞧產(chǎn)菌離株最初沿由弗放萊明原分離獸的點(diǎn)陰青霉具，只妻能產(chǎn)憲生2作U／ml的青趴霉素胃。目枝前全霜世界隙用于橡生產(chǎn)驢青霉垮素的稱高產(chǎn)愛菌株抹，大丈都由陡菌株Wi捏s葡Q臭l7退6(一種訂產(chǎn)黃振青霉)經(jīng)不飛同改餡良途容徑得藥到。70年代晚前育寸種采酸用誘鬧變和夸隨機(jī)碗篩選隊(duì)方法他，后指來(lái)由嫌于原蒸生質(zhì)鴉體融要合技拋術(shù)、貫基因占克隆疑技術(shù)繼等現(xiàn)榮代育淋種技聚術(shù)的殃應(yīng)用扣，青紛霉素奮工業(yè)訂發(fā)酵辨生產(chǎn)鍵水平爭(zhēng)已達(dá)85蔬0眾00物U／ml以上售。青捧霉素餡生產(chǎn)憂菌株混一般斧在真芹空冷痛凍干駱燥狀庭態(tài)下謹(jǐn)保存抖其分羞生孢挨子，舟也可獎(jiǎng)以用售甘油口或乳翁糖溶伍劑作鎖懸浮柿劑，衡在－70度冰虛箱或頌液氮修中保強(qiáng)存孢舊子懸臣浮液粉和營(yíng)瓜養(yǎng)菌木絲體援。(二)青霉堵素發(fā)嗚酵生么產(chǎn)培蜜養(yǎng)基1、碳那源金目前腥普遍鑒采用售淀粉誕經(jīng)酶狀水解仗的葡溉萄糖兇糖化歇液進(jìn)佳行流繳加。2、氮封源處可選四用玉獄米漿怕、花辟生餅隙粉、甜精制防棉籽絲式餅粉邪或麩期質(zhì)粉鑰，并虹補(bǔ)加都無(wú)機(jī)攝氮源懂。3、前馬體雹苯乙冤酸或合苯乙擇酰胺岡，由癥于它摩們對(duì)惜青霉愛菌有童一定韻毒性戀，故以一次勵(lì)加入盜量不息能大抬于0．1％，畢并采熟用多瞇次加隨入方臟式。4、無(wú)紛機(jī)鹽朵包括舊硫、勿磷、胃鈣、固鎂、潔鉀等臺(tái)鹽類燃，鐵份離子辱對(duì)青閃霉菌漲有毒深害作輪用，美應(yīng)嚴(yán)涌格控蛋制發(fā)栗酵波套中鐵晝含量壯在30膽ug／ml以下兵。(三)青霉察素發(fā)衛(wèi)酵工獸藝1.種子波制備種子觸制備興階段夾以生由產(chǎn)豐疏富的抓孢子杏（斜勉面和泳大米約孢子副培養(yǎng)浙）或仙大量呢健壯妹的菌頌絲體逗（種收子罐飾）為佩目的禽。2.發(fā)酵置培養(yǎng)影響央青霉放素發(fā)遼酵產(chǎn)介率的姿因素沸有環(huán)鴨境因現(xiàn)素，貍?cè)鏿H值、樸溫度說(shuō)、溶升氧飽況合度單、碳交氮組坡份含驗(yàn)量等詠；有介生理忍變量淋因素膚，包圍括菌削絲濃磚度、逼菌絲魯生長(zhǎng)謠速度蔽、菌燭絲形懸態(tài)等禽，對(duì)著它們瞧都要顧進(jìn)行賀嚴(yán)格蒜控制茅。3.發(fā)酵陪后處厭理(1波)過(guò)濾差：采奔用鼓斥式真牲空過(guò)形濾器仰，過(guò)紡濾前扮加去壇乳化圈劑并意降溫(2宏)提煉用溶城媒萃啄取法痕。將輪發(fā)酵澆濾液描酸化屬至pH改2，加1/覽3體積撐的醋邪酸丁丙酯，現(xiàn)混合拒后以鳴碟片寫式離猛心機(jī)姜分離旁，得摩一次BA提取便液。拘然后廊以1.禍3緞%～1.仍9棋%N忠aH惰CO浴3在pH前6衣.8～7.宅1條件株下將旁青霉克素從BA中提狡取到瞧緩沖尋液中凱。再嘩調(diào)pH至2.眉0，將招青霉炸素從低緩沖建液再忽次轉(zhuǎn)考入到BA中，令方法萌同上掌，二緊次BA提取云液。(3浙)脫色般在二紫次B棕A提取犬液中違加活葡性炭15趨0一30開0g／10億單退位，靈脫色渡、過(guò)雁濾。(4隆)結(jié)晶圾用丁惜醇共相沸結(jié)否晶法鄭。將冊(cè)二次BA萃取趟以0.棕5膊mo齡l/閃L途Na被OH液萃將取，察調(diào)pH至6.膝4～6.茄8，得盡青霉鏈素鈉益鹽水胳濃縮守液。成加3～4倍體圓積的揭丁醇水，在16～26環(huán)℃，5～10肚m層mH臨g下真企空蒸災(zāi)餾，響將水慎與丁食醇共砍沸物略蒸出錫，并碎隨時(shí)粱補(bǔ)加戴丁醇錢。當(dāng)腎濃縮氏到原富來(lái)水造濃縮訪體積厲，蒸但出餾堂分中括含水蟲達(dá)2％被～4％時(shí)餡，即付停止嶼蒸餾材。青霉程素鈉狗鹽結(jié)堂晶析四出，此過(guò)濾雕，將蛋晶體獨(dú)洗滌哲后進(jìn)黎行干匹燥得品成品爐?？蓷钤?0淚℃，20平mm韻Hg真空資中烘16池h，然躍后磨梁粉、揮裝桶筋。氨基裹酸是瘡構(gòu)成態(tài)蛋白替質(zhì)的政基本嗓單位瘦，是某人體壁及動(dòng)稱物的壓重要志營(yíng)養(yǎng)灑物質(zhì)浴。谷研氨酸賴是一煤種重橫要的溜氨基怠酸。茂我們呢就以寶谷氨識(shí)酸的費(fèi)發(fā)酵度生產(chǎn)距為例止簡(jiǎn)單副介紹四一下桂氨基徹酸的醫(yī)發(fā)酵善生產(chǎn)套。(一)谷氨梯酸發(fā)氧酵生倘產(chǎn)的身菌種谷氨戀酸酵秀生產(chǎn)派菌種拴主要駱有棒漸狀桿裕菌屬秒、短垂桿菌健屬、痛小桿事菌屬仍及節(jié)逆桿菌守屬的濤細(xì)菌或。除構(gòu)節(jié)桿珍菌外廁，其歉他三怠屬中延有許踐多菌曲種適撿用于悉糖質(zhì)母原料飾的谷駛氨酸伸發(fā)酵揚(yáng)。這摸些細(xì)燒菌都冶是需絨氧微咳生物溪，都灰需要樓以生揉物素插為生誤長(zhǎng)因之子。憶我國(guó)壤谷氨警酸發(fā)譽(yù)酵生哨產(chǎn)所凱用菌韻種有燭北京緊棒狀后桿菌AS豈12泄99、鈍交齒棒僅狀桿合菌AS府15疲42、HU南72清51及73夜38、B9等。譽(yù)這些涌菌株宰的斜舍面培紛養(yǎng)一葉般采堆用由廉蛋白興胨、慮牛肉劫膏、管氯化綁鈉等祝組成盜，pH為7.框0～7.信2的瓊良脂培麻養(yǎng)基顆，32詞℃培養(yǎng)24武h，冰窯箱保暗存?zhèn)鋲庞?。二、婚氨基拼酸發(fā)憐酵生啄產(chǎn)(二)谷氨俗酸發(fā)吳酵生貨產(chǎn)的糞原料再制備谷氨含酸發(fā)院酵生快產(chǎn)以擇淀粉銹水解病糖為殖原料孩。淀偵粉水橋解糖稠的制炎備一凈般有膊酸水趴解法芬和酶乖水解塘法兩腳種。暮國(guó)內(nèi)練常用容的是內(nèi)淀粉筒酸水休解工瞞藝嫁。(三)菌種識(shí)擴(kuò)大薄培養(yǎng)（1）一亂級(jí)種掃子培配養(yǎng)課采桿用液動(dòng)體培滑養(yǎng)基鋤，由飾葡萄附糖、胡玉米次漿、婦尿素保、磷雄酸氫林二鉀混、硫寄酸鎂倚、硫音酸鐵俱及硫頸酸錳物等組孟成忘，pH為6.面5～6.尋8；三臉角瓶攪內(nèi)32墳℃振蕩劇培養(yǎng)12露h，貯味于4石℃冰箱游備用篇。（2）二眾級(jí)種孫子培宰養(yǎng)詢培曉養(yǎng)基坊除用互水解棵糖代崗替葡寧萄糖舊外，自其他件與一午級(jí)種忙子培溪養(yǎng)基證相仿缺。種師子罐漿內(nèi)32委℃通氣斜攪拌鍋培養(yǎng)7～10繭h，即尖可移尤種或嫂冷卻嘆至10陸℃?zhèn)溆名}。(四)谷氨滴酸發(fā)晌酵生胸產(chǎn)發(fā)酵夢(mèng)初期關(guān)，菌脂體生滔長(zhǎng)遲篇滯，案約2～4分h后即讓進(jìn)入休對(duì)數(shù)紙生長(zhǎng)辛期，勒代謝害旺盛觸，糖攝耗快蛛，這丑時(shí)必耕須流坐加尿運(yùn)素以粱供給命氮源得并調(diào)山節(jié)培鼠養(yǎng)液盯的pH值至7.敏5～8.脹0，同蠟時(shí)保疾持溫釋度為30～32濕℃。本坡階段駱主要遭是菌固體生帥長(zhǎng)，菜幾乎子不產(chǎn)敗酸，醬菌體烈內(nèi)生疾物素?fù)岷磕c由豐寬富轉(zhuǎn)綠為貧壞乏，柔時(shí)間嘉約12稍h。隨丙后轉(zhuǎn)蜓入谷載氨酸西合成猛階段延，此經(jīng)時(shí)菌嬸體濃糾度基稿本不覆變，熄糖與珍尿素舞分解章后產(chǎn)防生的α-酮戊據(jù)二酸俗和氨鞠主要狂用來(lái)逝合成傳谷氨卡酸。漠這一窯階段燭應(yīng)及販時(shí)流鏡加尿港素以民提供六氨及辮維持姐谷氨譽(yù)酸合擔(dān)成最貝適pH應(yīng)7哄.2～7.掙4，需瓣大量促通氣溉，并喝將溫京度提蹲高到浩谷氨貍酸合唱成最銜適溫合度34～37薪℃。發(fā)私酵后飲期，恨菌體關(guān)衰老逼，糖別耗慢廳，殘數(shù)糖低蝕，需惰減少詠流加障尿素浩量。繁當(dāng)營(yíng)鑒養(yǎng)物降質(zhì)耗剛盡，強(qiáng)谷氨導(dǎo)酸濃既度不避再增賊加時(shí)誕，及順時(shí)放執(zhí)罐，掉發(fā)酵鍛周期會(huì)約為30藍(lán)h。(五)谷氨曉酸提摔取谷氨旅酸提叢取有芳等電聯(lián)點(diǎn)法攏、離清子交哈換法紫、金寒屬鹽磁沉淀壓法、夠鹽酸麻鹽法間和電蕩滲析詢法，缺以及像將上境述方嗎法結(jié)軌合使山用的戲方法游。國(guó)鋒內(nèi)多側(cè)采用笑的是偉等電燈點(diǎn)法扁。三、哭維生疏素發(fā)蠢酵生賊產(chǎn)維生罵素C又稱斜抗壞串血酸餃（as艱co顆rb樸ic折ac簡(jiǎn)id），閱能參袍與人易體內(nèi)返多種爽代謝符過(guò)程葡，使做組織仇產(chǎn)生算膠原匪質(zhì)，敬影響擁毛細(xì)泛血管漢的滲對(duì)透性覽及血螺漿的跡凝固恢，刺白激人普體造艘血功謊能，百增強(qiáng)世機(jī)體畜的免藏疫力潔。另退外，武由于終它具殲有較壞強(qiáng)的辮還原聰能力咐，可喝作為賞抗氧塑化劑燭，已紀(jì)在醫(yī)四藥、懷食品拖工業(yè)艱等方涂面獲老得廣棉泛應(yīng)虜用。啦我國(guó)利凳用一宏種微旅生物本將L-山梨霸糖轉(zhuǎn)籍化為2-酮基-L古龍凍酸，伴再經(jīng)川化學(xué)嫩轉(zhuǎn)化駕生產(chǎn)蔽維生法素C，稱隔為兩逢步發(fā)頃酵工甜藝。飽此法女使產(chǎn)堆品產(chǎn)沿量得蛋到大叨幅度瘋提高喜，限蒙于篇遠(yuǎn)幅，損僅簡(jiǎn)槍單介澤紹如敢下：第一挨步發(fā)歡酵是生黑級(jí)葡糖再桿菌童（或哪弱氧貓化醋百桿菌鈔）經(jīng)瓜過(guò)二測(cè)級(jí)種應(yīng)子擴(kuò)加大培惹養(yǎng)，越種子售液質(zhì)水量達(dá)抹到轉(zhuǎn)幅種液蛙標(biāo)準(zhǔn)螞時(shí)，禿將其貞轉(zhuǎn)移扎至含肯有山蝦梨醇懼、玉主米粉孤、磷勺酸鹽挽、碳辦酸鈣吊等組勺分的認(rèn)發(fā)酵蹲培養(yǎng)鋼基中套，在28～34鹽℃下進(jìn)括行發(fā)陶酵培扎養(yǎng)。嘩在發(fā)追酵過(guò)段程中鞋可采氣用流吵加山遼梨醇平的方協(xié)式，證其發(fā)冷酵收命率達(dá)95％，再培養(yǎng)崗基山梳梨醇奮濃度糊達(dá)到25％時(shí)輝也能踐繼續(xù)猾發(fā)酵者。發(fā)罵酵結(jié)對(duì)束，蛇發(fā)酵欺液經(jīng)變低溫鞋滅菌每，得閣到無(wú)緣瑞菌的仗含有姜山梨儀糖的甘發(fā)酵驗(yàn)液，盆作為勵(lì)第二泄步發(fā)蓮酵的黎原料賤。第二咸步發(fā)淹酵是氧化諸葡糖菌桿菌筒（或海假單飼胞桿德菌）緞經(jīng)過(guò)售二級(jí)之種子引擴(kuò)大藏培養(yǎng)瞧，種哭子液脊達(dá)到柴標(biāo)準(zhǔn)銷后，霜轉(zhuǎn)移挑至含勤有第欣一步香發(fā)酵另液的棕發(fā)酵返培養(yǎng)袍基中膚，在28～34豈℃下培義養(yǎng)60～72鉆h。最姜后發(fā)口酵液燙濃縮躍，經(jīng)她化學(xué)嘉轉(zhuǎn)化梨和精羞制獲跑得維紙生素C。第四爪節(jié)覆微易生物扔與環(huán)沿境保孝護(hù)一、吩微生弱物在茶自然盼界物紅質(zhì)循年環(huán)中襯的作射用自然祝界的員物質(zhì)周處于澤由無(wú)轟機(jī)物炮轉(zhuǎn)化供成有狹機(jī)物趟，再賞由有拐機(jī)物福轉(zhuǎn)化斃成無(wú)巡壽機(jī)物撲的往川復(fù)循眼環(huán)之封中。生產(chǎn)食者：從無(wú)鄙機(jī)物畢合成謝有機(jī)迎物，絮如植奧物、內(nèi)微生長(zhǎng)物消費(fèi)籌者：利用憂有機(jī)叼物進(jìn)皆行生虧活，輸如動(dòng)貪物分解桿者：分解籌有機(jī)似物成壞無(wú)機(jī)灑物，細(xì)如微喘生物微生冷物在壓生態(tài)克系統(tǒng)槳中的猜地位1、微駱生物襪是有攻機(jī)物撇的主掀要分村解者跟；2、微蚊生物屠是物責(zé)質(zhì)循達(dá)環(huán)中休的重疾要成龍員；3、微浙生物堪是生圓態(tài)系菠統(tǒng)中徒的初姑級(jí)生野產(chǎn)者正；4、微多生物告是物島質(zhì)和脊能量性的貯炕存者突；5、微鳳生物誕在地嗚球生楚物演鐘化中述的作君用；（一）、微生物在碳素循環(huán)中的作用微生恨物在杯碳素憤循環(huán)乓中作社用：1）將些二氧肚化碳棕合成脊有機(jī)提物；2）將石含碳瓜有機(jī)似物分覺解為慘二氧匙化碳辰。（二）、微生物在氮素循環(huán)中的作用（三）、微生物在硫素循環(huán)中的作用微生券物在S素循預(yù)環(huán)中卡的作口用：1）分診解含S有機(jī)傲物釋磁放出SO42-和H2S；2）同氣化硫際酸鹽幅為含S有機(jī)映物；3）氧木化S0、H2S、S2O32-為SO42-；4）還喂原SO42-為S0、H2S。二、砍利用兔微生流物處室理污驅(qū)水（一渣）微素生物砍處理缺污水慚的原菠則原理登：主要框根據(jù)芳水體顆自凈膨原理敘，利膀用微城生物浙酶的露催化朝性和塞代謝粥活性硬，好贈(zèng)氧或仗厭氧興分解芽和轉(zhuǎn)悼化污惕水中慣的污赤染物它。（二將）污睛水處虹理的姿有關(guān)爽名詞1、活間性污齒泥法啞處理2、生騎物膜懶處理李法3、厭斜氧處幅理法4、氧掃化塘射法（二鹿）污下水處凍理的唉方法蝴和裝忠置1、活訓(xùn)性污稈泥法是利寨用微顫生物粒在生糧長(zhǎng)繁膝殖過(guò)惕程中裙形成育表面歇積較直大的清菌膠團(tuán)型來(lái)大吉量絮促凝和耀吸附勵(lì)廢水凈中的幅污染餐物，敗并在扔氧的摘作用下睡，將伏這些層在同勁化為舍菌體量本身剪的組河分，虛或?qū)钸@些仔物質(zhì)氧看化為摘二氧扎化碳仇和水軋等物族質(zhì)，迎從而新達(dá)到嘆降低株水體托中有機(jī)泳物濃彈度的暖一種暈方法鍵。活性浴污泥是具秀有活勞性微深生物價(jià)菌膠結(jié)團(tuán)或顆絮狀露的微歲生物崖群體，織主要喇有細(xì)端菌、綁真菌棍、原壤生動(dòng)括物和輪少量磚藻類如?；钚匀ξ勰嗖裉幚硖镅b置由曝氣幫池和沉淀口池兩部哨分組商成。2、生閥物膜是法是利疼用微駕生物喬群落裳附著霞在固撞體填語(yǔ)料表縫面而騾形成俊的生物膜承來(lái)處煌理廢正水的仙一種變方法鄉(xiāng)豐。生物贈(zèng)膜法潮處理絞主要?jiǎng)?wù)是生物帝轉(zhuǎn)盤啊裝置。3、厭盾氧處燥理法4、氧邪化塘鞋法是大活面積龍敞開陷式的策污水言處理疼塘。三、笛沼氣儉發(fā)酵憲與環(huán)遞保沼氣凳發(fā)酵惜的意并義氰和鹽腈由于層石油抬化工核工業(yè)樣和人君造纖值維工柄業(yè)的榴發(fā)展應(yīng)，含嫩有機(jī)拒腈化盲物(如丙茶烯腈)和無(wú)偶機(jī)氰辟成分培的廢聰水日氏益增雞多，鑰它們頭均為查劇毒輛物。能分元解氰百和腈挪化物拍的微況生物督：諾卡竹氏菌榨、腐菜皮鐮傷孢霉的、木棟霉、蓮假單浸胞菌許、無(wú)效色桿融菌和執(zhí)產(chǎn)堿冰菌等14個(gè)屬禍，共價(jià)計(jì)49個(gè)種秩。四、虧微生蠻物對(duì)劉有毒串物質(zhì)賴的降錢解對(duì)烴籠的降剩解能降近解石碼油的垂微生魚物已脾報(bào)道客的約涼有70余屬20哥0多種霞。土壤除真菌沙和細(xì)邁菌以需及海恨洋細(xì)涼菌，鄰絲狀創(chuàng)真菌立等都龍是石明油的覆重要圣降解說(shuō)者，其沫中以呆灰綠臺(tái)青霉(Pe友ni撕ci虛ll劍iu高m幟gl貝au怨cu母m)、產(chǎn)尖朊假蒙絲酵興母(Ca晴nd逮id依a爸ut捕il伴is)等真叨菌，澡和假膊單胞翼菌屬乖、諾艇卡氏喪菌屬冤、分樂枝桿困菌屬寺中的植一些欣種類惜，降件解能株力最雞強(qiáng)。由于蠟石油伏是多短種烴丟類的嗚混合察物，稅一般魂是由適多種均微生怨物共疏同作候用而王使其閃降解俊。含苯拍化合勾物這類嫩化合危物耐慶酸、堵耐堿圾、耐膽腐蝕問(wèn)，具肯有穩(wěn)秤定性泉、絕澡緣性線、不番燃性恥、耐幣熱性面等特諷點(diǎn)，強(qiáng)而被條作為框絕緣論油、躲載熱犬體、備軟化棒劑、浴涂料藏、添賣加劑吩等廣梨泛用集于工過(guò)業(yè)。每因此晌，在