青骨干培養(yǎng)與能力提升方案

青骨干培養(yǎng)與能力提升方案前言青骨干細(xì)胞是一種特殊種類的多能干細(xì)胞，具有很好的再生和修復(fù)能力。因此，青骨干細(xì)胞的處理、培養(yǎng)和應(yīng)用一直是研究的熱點(diǎn)之一。本文將介紹青骨干干細(xì)胞的培養(yǎng)及其能力提升方案。青骨干細(xì)胞的培養(yǎng)培養(yǎng)基的選擇青骨干細(xì)胞的培養(yǎng)需要一個(gè)適合其生長和繁殖的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基包括DMEM（低糖高氨基酸），RPMI-1640，以及MEM（培養(yǎng)基中的成分比較多，細(xì)胞容易生長）等。其中DMEM是青骨干細(xì)胞培養(yǎng)的一種最為常用的培養(yǎng)基，其適用于絕大多數(shù)的細(xì)胞系。DMEM的添加物是FetalBovineSerum(FBS)，含量通常在10%左右。在選擇培養(yǎng)基時(shí)，首先要了解青骨干細(xì)胞的生長特性，并且注意質(zhì)量問題。青骨干細(xì)胞的分離青骨干細(xì)胞的分離可以使用Percoll離心法，F(xiàn)icoll-Paque離心法，以及膠原酶、組織膠原酶、胰蛋白酶等消化酶的膠原酶分離。其中Percoll離心法是最為常用的分離方法之一，它可以有效地分離出單個(gè)的青骨干干細(xì)胞，同時(shí)還可以保持細(xì)胞的生活狀態(tài)。青骨干細(xì)胞的培養(yǎng)青骨干細(xì)胞的培養(yǎng)區(qū)分為常規(guī)培養(yǎng)和無血清培養(yǎng)兩種方式：常規(guī)培養(yǎng)在常規(guī)培養(yǎng)方法中，將青骨干細(xì)胞分別培養(yǎng)在25T和75T的培養(yǎng)瓶中;周期為5天，在每個(gè)周期的第三天，將一半的培養(yǎng)基替換為新的培養(yǎng)基；當(dāng)細(xì)胞達(dá)到80%的程度時(shí)，將細(xì)胞分離到新的培養(yǎng)器中完成細(xì)胞的播種。無血清培養(yǎng)青骨干細(xì)胞的無血清培養(yǎng)是一種不需要使用FBS培養(yǎng)基的方法，大量節(jié)約藥費(fèi)和提高了生物安全性。無血清培養(yǎng)的青骨干細(xì)胞不會(huì)受到FBS抗體等一系列影響，細(xì)胞的生長和發(fā)育狀況發(fā)生了非常明顯的變化。無血清培養(yǎng)的青骨干細(xì)胞生長變得更為規(guī)律，穿插分散時(shí)間也同時(shí)增多。能力提升方案青骨干細(xì)胞能力強(qiáng)則意味著細(xì)胞生長得快，也就意味著細(xì)胞生長的周期時(shí)間較短，在退火溫度下生長周期ned短也不易死亡；同時(shí)青骨干細(xì)胞能力強(qiáng)的細(xì)胞能繼續(xù)生長，并能獲得更多的能量和條件。因此，將會(huì)讓細(xì)胞短時(shí)間得到較多好處。改變細(xì)胞形態(tài)將青骨干細(xì)胞改變原先的生長狀態(tài)，即可改變細(xì)胞形態(tài)從而提升青骨干細(xì)胞的能力。改變細(xì)胞形態(tài)的常見方法有:培養(yǎng)基成分的改變:培養(yǎng)基中添加胞外基質(zhì)以及其它的成分，比如德林培養(yǎng)液，其中含有ɑ+β成纖維蛋白原和膠原，可以促進(jìn)胚胎小鼠肝細(xì)胞的生長；在培養(yǎng)基中加入膠體硅，如果青骨干細(xì)胞中cytoskeletal組織排列比較疏松，硅膠可以使其形態(tài)改變?yōu)榻Y(jié)實(shí)。細(xì)胞培養(yǎng)條件的改變:蒸汽滅菌或?yàn)V過消毒的處理方法可以改變細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境，防止培養(yǎng)基中出現(xiàn)有害物質(zhì)；微重力或低氧環(huán)境是創(chuàng)造一種特殊的培養(yǎng)環(huán)境，對青骨干細(xì)胞的生長有一定的啟迪作用。多元化細(xì)胞生長環(huán)境青骨干細(xì)胞的生長并不只是留在培養(yǎng)器中，它也需要得到實(shí)際有效的訓(xùn)練。細(xì)胞生長環(huán)境的多元化是提高青骨干干細(xì)胞能力的一個(gè)重要條件。3D細(xì)胞培養(yǎng):3D細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞在多孔性的材料中或者是在凝膠中培養(yǎng)，并形成3D的細(xì)胞模型。特殊環(huán)境下培養(yǎng):有些微重力、低重力和高氧氣壓等的環(huán)境也可以針對具體操作在對青骨干細(xì)胞進(jìn)行生長、分化等操作。骨誘導(dǎo)生物素的使用青骨干細(xì)胞的能力可以通過骨誘導(dǎo)生物素來提升。它是由肝臟分泌的一種蛋白質(zhì)，可促進(jìn)骨的形成和修復(fù)，激活骨細(xì)胞的分化和增殖等于促進(jìn)青骨干細(xì)胞能力的提升?？偨Y(jié)本文介紹了青骨干細(xì)胞的培養(yǎng)及