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文檔簡介

生物技術---免疫學技術基本概念抗原(antigen)進入動物體內能刺激動物的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應答,從而引起動物產生抗體或形成致敏淋巴細胞,并能和抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性反應的物質分完全抗原和半抗原抗體(antibody):抗原刺激動物免疫系統(tǒng),由免疫系統(tǒng)產生分泌的能和相應抗原發(fā)生特異性結合的免疫球蛋白第三章免疫學技術--抗原抗體反應可對抗原或抗體進行定性、定量、定位的檢測抗體抗原以非共價鍵結合不可見反應:幾秒-幾分鐘可見反應:數分鐘(小時、日)影響因素電解質溫度酸堿度第三章免疫學技術酶聯免疫法放射免疫法將同位素分析的靈敏性和抗體抗原反應的特異性這兩大特點結合起來的免疫標記測定技術

缺點:需特殊儀器設備;一定的防護條件;半衰期短及試驗廢物難以處理熒光免疫法以熒光素和羅丹明作為標記物,可在熒光顯微鏡下檢查顯示熒光的復合物和所在部位主要用于醫(yī)學實踐中各類病原微生物的快速診斷以及組織切片中特異抗體的檢測其他

膠體金標記第三章酶聯免疫法(enzymeimmunoassay)以酶標記抗體或抗原進行的抗體抗原反應酶結合物應具有雙功能:高度特異的免疫反應、生物催化放大作用基本方法間接法雙抗體夾心法競爭法生物素-親和素系統(tǒng)(biotin-avidinsystem,BAS)某些新進展酶聯免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)間接法1、將已知可溶性抗原吸附于載體2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗體的待檢液4、溫育后清洗5、加入酶標記的二抗6、溫育后清洗7、加入酶作用底物8、測定反應顏色深淺雙抗體夾心法1、將已知抗體吸附于載體上2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗原的待檢液4、溫育后清洗5、加入酶標記特異性抗體6、溫育后清洗7、加入酶作用底物8、測定顏色反應深淺酶聯免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)競爭法1、將已知抗體吸附于載體上2、溫育后清洗3、加入可能含特異性抗原的待檢液和酶標記的已知抗原液4、溫育后清洗5、加入酶作用底物6、測定顏色反應深淺酶聯免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)生物素-親和素系統(tǒng)(biotin-avidinsystem)基本概念生物素:是一種維生素H,經活化后,可與抗體、抗原、酶以多配一的方式共價結合,且不影響它們的活性親和素:從卵蛋白中提取的一種堿性糖蛋白,可與酶偶合,以1配多的方式對生物素有很強的親和力BAS用于檢測的基本方法:BAB法或BRAB法BA法ABC法酶聯免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)酶聯免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)均相菊酶免酬疫測照定法無需雁“固倍定在蔬載體佳上”;無袖需“失溫育賠后清盤洗”斑點壞免疫禮結合來試驗以微脫孔薄問膜為領載體堂,酶到免疫功反應鹽陽性魄結果翅在膜濫上出攝現色奶斑點膠體守金標避記較謝酶標墊記更備為簡接便酶聯糊免疫則吸附蓬(en幫zy恢me達l等in腹ke削dim窮mu友no罩so每rb校en巡壽tas刪sa直y)豬肉焰和尿佳液鹽麥酸克登倫特茅羅的免疫車膠體弱金法樹快速女檢測“瘦脂肉精刷”學魔名為脖鹽酸欺克倫唯特羅蜻,醫(yī)正學上醒又稱泰克喘紅素,節(jié)常用勒于治煩療哮甩喘。由于稼鹽酸洋克倫櫻特羅欲添加火于飼浩料飼牢喂動弊物后侮可明勉顯促衡進動置物生競長,提高瘦肉膚率,所以財養(yǎng)殖女戶稱味其為買“瘦灑肉精盜”,泳曾在扣國內始外廣顫泛用虧于動情物飼狂養(yǎng)生豬綠食用腔瘦肉射精后麻皮毛唯光亮填,呼學吸急墨促,兔個別塊會出治現腿僚抽搐怠,站冬不穩(wěn),多爬坡嗚困難曾;宰裹后豬旺的肌腐肉特告別鮮遣紅,逢后臀遇肌肉姥飽滿例,肥界肉非區(qū)常薄瘦肉的精介根紹瘦肉走精介蔽紹“瘦輩肉精圖”化切學性戶質特禁別穩(wěn)悉定,畝加熱久到17爹0℃時才敢能被租分解膊,故停一般忽家庭兼廚房神加熱投不能名將其牌分解嗽破壞食用積后在渣胃腸駱道吸釘收快簽,作萄用維原持時鮮間持匹久。蜂中毒首后主敏要癥螞狀表繁現為菊頭疼崖、頭剝暈、摧心悸劫、心猾慌、件面色絞潮紅群、四覺肢發(fā)碧抖等同癥狀違法趴者使勿用該萌物質儉以提乒高豬絨的瘦疲肉率驗和顏惑色鮮估艷程庭度,叫不知艦情的芬市民旨錯灘誤地蛛認為騰這樣葵的肉伏才是練“好約肉”四而特爽別喜權歡選滲購《食品竭衛(wèi)生盡法》《食品叨添加澡劑衛(wèi)猜生管害理辦攏法》(GB踩27施60)《動物濾性食脫品中牢獸藥家殘留給最高耗限量》(農梯業(yè)部少公告線第23播5號,20翠02年12月24日)熊規(guī)定仆:禁狡用藥仁物,廉動物咳性食悼品中句不得確檢出握:瘦肉胳精、選沙丁膜胺醇絕、西弄馬特少羅等31種違法邁者的瞎法律顫責任件:民燦事賠賭償、爐行政朱處罰培、刑賠事處兩罰法律采規(guī)定鹽酸憶克倫薄特羅捧殘留腥檢測拳方法《動物腦性食涼品中遍克倫煩特羅罰殘留事量的晝測定》(GB饞50袖09嬌.1摧92她-2革00劈燕3)第一領法:填氣相辛色譜——質譜雕法,尺檢出定限:0.功5p春pb第二托法:僵高效駐液相贊色譜綱法,奮檢出撕限:0.克5p揮pb第三四法:戰(zhàn)酶聯屠免疫白法(EL讓IS誰A篩選袖法),檢糞出限甩:0.毯5p財pb《動物監(jiān)組織餅中鹽渾酸克僅倫特覆羅的猶測定——氣相向色譜/質譜亡法》(NY壘/T滿4粥68-20效06),構檢出縮慧限:2.宜0p走pb《動物糠尿液市中鹽再酸克哥倫特許羅的恥測定——氣相壟色譜/質譜域法》(NY趣/X色Q扭42災1-20趟03),鉛檢出涉限:1.業(yè)0p鞋pb《尿液鍋中鹽淡酸克問侖特霜羅的劣測定像膠體蹤蝶金免寺疫層頂析法(NY王/T輪93披3-川20懶05),恒檢出百限:3.局0p多pb豬肉斥全程擁監(jiān)控仗中瘦瓣肉精身檢測捏方法漢的選短擇生豬碗飼養(yǎng)屠宰濱場大型森批發(fā)生市場零售膜市場飼料觸檢測豬尿直檢測豬尿終檢測豬肉海檢測豬肉檢測豬肉檢測酶聯陣免疫剝法免疫慰膠體宏金免疫土膠體就金酶聯文免疫獵法免疫謹膠體關金篩檢復陽性GC燃-M臉S確認大型抵儀器笨確認政府校部門監(jiān)督補抽檢GC方-M租S餐飲擴業(yè)豬肉檢測免疫親膠體辟金銷毀粥和溯偉源陽性GC費-M酸S確認大型席儀器深確認陽性免疫兵膠體科金快來速檢船測板司的外陷觀圖免疫說膠體貸金快夕速檢朽測板(試劑)的結碑構圖檢測互原理鹽酸用克倫爪特羅沖快速纏檢測屆試劑補板的植中央樂膜面仙上固戰(zhàn)定有封兩條鍵隱形敞線,閉克倫至特羅借抗原紀固定靈在測集試區(qū)廣作為殖檢測肢線(T線)種,二略抗固懶定在愉質控唯區(qū)作威為對標照線肢(C線)綢。當待絲式檢樣猶品溶混液滴吧入試乒劑板律加樣繭孔后轉,樣釋品溶信液因辮層析兆作用貓往上噸擴散也。如到果樣南品溶另液含辟有相肝應藥斜物的冬殘留睡,藥梳物將絮和膠血體金拒顆粒此上的錘抗體剝先行廟反應絲式,因悟此當癢膠體穿金顆橫粒隨頃樣品想溶液規(guī)擴散由至T線時院,膠君體金厘顆粒抱上抗雁體活驗性位揮點將堪因被楊樣品灘溶液鼻中的竿藥物室占據迎而無殼法與T線上制藥物怕抗原忌結合刃;所響以當齊樣品妹中鹽逆酸克封倫特慰羅含鬧量1p巖pb績(檢測絞限)以上修時,臘試劑染板上悄的T線將嗚較C線顯薦色淡鴨或甚鈴至無匪顯色槐,判精定為激陽性鄰。反斜之,寇當樣脾品中另鹽酸??藗悊翁亓_巴含量熟在1p制pb以下恭或無驗殘留蚊時,盒試劑土板上蹲的T線顯餓色與C線相輪近或醫(yī)偏深唐,判餐定為啞陰性靈敏牧度肉樣杯或組視織樣糕:1p遵pb病(標準碗前處頃理)或5p或pb(簡隆單前江處理桑)尿樣仔:1p蒜pb滑(標準丟前處晃理)特異未性:衡與沙務丁胺雨醇等帳苯乙董胺類志藥物擇沒有富交叉殊反應武;準確哄性:圍與瘦荷肉精EL哭IS活A試劑長盒的祝檢測景結果符合券率>9輝0%有效郊期:舞半年拼(冷漫藏閉撐光保鍋存)膠體泊金免忙疫層我析法診檢測偵瘦肉殺精的玩技術傾指標操作獎步驟于5m昨l離心窩管中非加入5g左右猜剪碎萌或是待高速壩勻漿過窯的豬沈肉組濤織樣竿,蓋舉緊管驕蓋1將裝有朝樣品赤的離競心管貸在90拖℃以上匯水浴乘鍋中樹加熱10分鐘加熱漢完成將后取吧出冷拴卻至消室溫擇;可魚以明召顯看到底賭部有描溶液丈滲出32吸取3滴(擇約10學0u狐l)煮首出的心樣品眾滲出黨液到1.殼5m腿l的離就心管呼中4

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